大體積樣品濃縮 Centricon? Plus-70離心濃縮裝置 用于15-70mL生物溶液的快速濃縮等操作。70mL的樣品在25分鐘內(nèi)濃縮至350μL;死體積設(shè)計(jì)確保樣品不會(huì)被離干而損失。依起始材料不同、起始體積不同,樣品可被濃縮50-200倍。低吸附豎向再生纖維素超濾膜及雙超濾柱設(shè)計(jì),加快處理速度;反轉(zhuǎn)離心操作進(jìn)一步使寶貴的濃縮樣品回收率得以提高。這個(gè)產(chǎn)品替代傳統(tǒng)的透析、凍干、沉淀或攪拌式濃縮等技術(shù)和方法,是非常方便的工具。 特別推薦的應(yīng)用: 色譜洗脫產(chǎn)物的濃縮和脫鹽 單克隆抗體濃縮 培養(yǎng)上清中蛋白和***的濃縮 組織勻漿液和細(xì)胞裂解液澄清超濾濃縮管的系列有很多種。江蘇Mer...
用于攪拌式超濾杯的Ultracel?預(yù)切超濾膜片 Ultracel? 再生纖維素膜可以用來對較為稀釋的溶液進(jìn)行脫鹽或濃縮。Ultracel? 膜是親水性的,微觀結(jié)構(gòu)緊密,確保對蛋白、核酸等大分子吸附比較低而回收率比較高。 *膜的常規(guī)截留分子量分為1, 3, 5, 10, 30及 100 kDa等。 *膜片直徑分為25, 44.5, 47, 63.5, 76, 90及150 mm。 對于大體積、高濃度(如蛋白濃度大于 1.0 mg/mL)的樣品進(jìn)行脫鹽和濃縮,Biomax?聚苯醚砜(PES)超濾膜是很好的選擇。血清、血漿或條件組織培養(yǎng)基等,都是 Biomax?超濾膜適合處理的樣品。 *...
如果能確保用同樣的超濾管對其它蛋白成功操作的話,那么有可能是這個(gè)目的蛋白的原因。有時(shí)蛋白會(huì)因其本身的一些特性(構(gòu)象差異)而影響濃縮效果,建議選用上一分子量級(jí)別的超濾管(如原本選用30k,此時(shí)可以選擇10k)。 2)如果目的樣本也不在濾過液中,那么: a)蛋白樣本起始濃度是否大于25ug/mL? b)用來確定樣本濃度的方法是什么?是否可信? c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具體解決方法請參考上面的關(guān)于蛋白沉淀問題的解釋。上海超濾濃縮管代理銷售哪家好?Millipore超濾濃縮管報(bào)價(jià)將裝有樣品的Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管接在Amicon?Pro上樣池的下端。 3. ...
蛋白復(fù)性,溫和透析 D-Tube? 透析管 如果樣品很敏感而難以處理,采用溫和的透析方法可以避免其在過度濃縮時(shí)發(fā)生沉淀和離心操作剪切力對樣品的損害。。D-Tube?是雙膜設(shè)計(jì)的透析管,**提高了樣品透析表面積,在2-5小時(shí)內(nèi)即可完成透析,是非常溫和而高效的緩沖液置換工具。D-Tube? 透析管的獨(dú)特優(yōu)點(diǎn): 樣品回收率> 89% ? 膜和管壁皆為低吸附性材質(zhì),增加樣品回收率可靠而易用 ? 不會(huì)像使用夾子或打結(jié)那樣造成樣品滲漏和污染,安全可靠 旋蓋式設(shè)計(jì),易于打開和關(guān)緊 硬管設(shè)計(jì),易于更充分地吸取、移走樣品,即使是μL級(jí)樣品加樣方便,功能多樣 ? 采用標(biāo)準(zhǔn)***頭加樣,而非注射器和...
高濃度樣品濃縮 Centriprep?超濾管 Centriprep?超濾管是一次性使用的離心管,可以用于2-15mL生物樣品的純化、濃縮、脫鹽等過濾應(yīng)用。這種離心超濾管流速很快,設(shè)計(jì)緊湊,螺旋蓋使用起來非常方便,過濾收集管內(nèi)置低吸附的Ultracel?再生纖維素膜,裝有氣密蓋。 優(yōu)點(diǎn)與應(yīng)用 特有的反向流操作模式,較大的死體積 采用Ultracel?膜,用于濃縮和純化富含顆粒物 的高濃度樣品,樣品回收率>90% 配合標(biāo)準(zhǔn)的50mL離心管吊籃式轉(zhuǎn)子使用 從發(fā)酵培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)基、細(xì)胞裂解液中分 離低分子量溶質(zhì)超濾濃縮管零售多少錢呢?Merck離心濃縮管聯(lián)系電話經(jīng)典離心濃縮裝置 ...
無血清樣品選擇 3kDa 孔徑是為了盡可能提高外泌體的回收率。 有血清樣品選擇100kDa/500kDa孔徑是為了盡可能去除細(xì)胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌體的白蛋白造成的影響。 研究者可根據(jù)樣品的粘稠程度,以及需要制備的目標(biāo)外泌體 / 囊泡 / 顆粒的大小分布來選擇和優(yōu)化超濾孔徑(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa),以便達(dá)到更好的得率和操作體驗(yàn)。 樣品體積大于 30mL 時(shí)可以考慮用超濾杯或 Centricon-70 超濾管,請注意攪拌式超濾杯在200mL 以內(nèi)時(shí)吸附損耗可能較離心式超濾管略偏高。如需進(jìn)一步提高特定外泌體的純度,可選用包被相應(yīng)抗體的磁珠進(jìn)行親...
高濃度樣品濃縮 Centriprep?超濾管 Centriprep?超濾管是一次性使用的離心管,可以用于2-15mL生物樣品的純化、濃縮、脫鹽等過濾應(yīng)用。這種離心超濾管流速很快,設(shè)計(jì)緊湊,螺旋蓋使用起來非常方便,過濾收集管內(nèi)置低吸附的Ultracel?再生纖維素膜,裝有氣密蓋。 優(yōu)點(diǎn)與應(yīng)用 特有的反向流操作模式,較大的死體積 采用Ultracel?膜,用于濃縮和純化富含顆粒物 的高濃度樣品,樣品回收率>90% 配合標(biāo)準(zhǔn)的50mL離心管吊籃式轉(zhuǎn)子使用 從發(fā)酵培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)基、細(xì)胞裂解液中分 離低分子量溶質(zhì)超濾濃縮管的好處有很多。徐匯區(qū)濃縮管聯(lián)系電話通量(超濾效率)及其影響因素...
外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體:300μg樣品(相當(dāng)于300μg總蛋白)用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋,與protein A/G磁珠共孵育1hr,漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯(lián)在磁珠上(以避免抗體洗脫下來對外泌體的干擾),請參考默克磁珠操作說明書。(Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3))。推薦使用試劑目錄號(hào)信息:cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經(jīng)建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備...
膜的吸附損失 對于濃度很低及珍貴的樣品,除了考慮截留效率和操作方便外,額外 要關(guān)注的是采用的超濾膜及設(shè)備對目標(biāo)蛋白的潛在非特異性吸附損 失。不同膜材質(zhì)對生物分子吸附程度不同,默克密理博的 Ultracel? 再 生纖維素膜在各類膜中對生物分子吸附**小,是 Amicon? Ultra 超濾管 等超濾產(chǎn)品成為優(yōu)先的**技術(shù)關(guān)鍵之一。濾膜和裝置表面對溶質(zhì)的 吸附對樣品收率會(huì)產(chǎn)生直接影響,所以如果希望盡可能提高得率,就 應(yīng)該考慮采用較小的設(shè)備和膜面積。小量的、較為稀釋的樣品應(yīng)該選 用膜面積小的裝置,同時(shí)保證一定的流速。默克密理博設(shè)計(jì)了一系列 離心式或攪拌式裝置,配合不同的膜面積、不...
Amicon? Pro純化超濾管簡明操作指南 親和純化 用于純化GST?Tag,His?Tag等重組表達(dá)蛋白及抗體,適合~0.5 mL裂解液操作 6次低速離心,總耗時(shí)~100分鐘(含65分鐘孵育時(shí)間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂(50%懸濁液)和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h,其間可溫和攪動(dòng)促進(jìn)結(jié)合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結(jié)合雜質(zhì)。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液,1,000×g離心1 min。 外泌體用于細(xì)胞學(xué)或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前的無菌處理...
蛋白如果濃縮過快或者過度濃縮都有可能引起蛋白沉淀。建議蛋白濃縮后的**終濃度不超過 20mg/ml。對于對濃縮速度敏感而容易沉淀的蛋白,建議的改進(jìn)方法是: 1)離心力降為推薦離心力的30%-50% 2)改用截留分子量更大的超濾管(如原本選用10k,此時(shí)可以選擇30k) 3)在濃縮過程中取出超濾管,用***頭反復(fù)吹吸幾次后再繼續(xù)濃縮 Amicon? Ultra超濾膜中含有微量甘油。如果出現(xiàn)這種情況,請先用0.1 N NaOH清洗再離心。***用緩沖液或Milli-Q?水再次清洗后甩干。清洗后的濾膜應(yīng)立即使用,如暫時(shí)不用,請保持潤濕狀態(tài),避免重新干燥。益啟生物公司主要超濾濃縮管代理銷售。普...
Amicon? Ultra超濾管的膜材質(zhì)為默克密理博特有的 Ultracel? 再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴(yán)格,截留分子量明確而精細(xì),蛋白吸附損失基本上大概小。 如果要用超濾的方法分離兩種蛋白,那么這兩個(gè)蛋白的大小需要相差多少? 按照經(jīng)驗(yàn),建議兩個(gè)蛋白的分子量要相差一個(gè)數(shù)量級(jí)(10倍)。 Amicon? Ultra與70%乙醇是兼容的,但是對滅菌處理的具體方法沒有做相關(guān)的測試,所以無法提供更進(jìn)一步的參考信息。 Amicon? Ultra都是采用熱封設(shè)計(jì),不可以用高壓高溫滅菌。 不保證超濾管不包含RNA酶,建議用0.1% DEPC在37度浸泡2小時(shí),以完全滅活RNA酶;殘留的DEPC可以用...
外泌體用于細(xì)胞學(xué)或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前的無菌處理 已經(jīng)經(jīng)過上述方法制備的外泌體在進(jìn)行細(xì)胞或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之前還需進(jìn)行一步除菌過濾,這個(gè)時(shí)候考慮到得率,應(yīng)該采用離心法處理,以減少過濾時(shí)的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進(jìn)行澄清[目錄號(hào)SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號(hào)UFC901024,10 kDa MWCO) ,4000g離心 X 10 min。 從超濾...
默克密理博 Amicon? Ultra 離心式超濾管因其完美的設(shè)計(jì),一經(jīng)推出即成為生物樣品操作的行業(yè)頭牌產(chǎn)品。不論是蛋白、核酸、病-毒-或顆粒物,抑或低濃度樣品或?qū)氋F的活性樣品,Amicon? Ultra 都能兼顧高回收率和操作的方便性及標(biāo)準(zhǔn)化,并滿足下游各種應(yīng)用的要求,使研究者處理樣品時(shí)倍感輕松。 這款A(yù)micon Ultra 15 mL離心式過濾器借助10 kDa NMWL的濾膜可以進(jìn)行蛋白濃縮。Amicon Ultra離心式過濾器是蛋白純化、蛋白濃縮和脫鹽的理想工具。 Amicon? Ultra 超濾管的獨(dú)特優(yōu)點(diǎn): 有效濃縮同時(shí)保證高的蛋白回收率 1.合理的死體積設(shè)計(jì) 2...
微濾中膜的孔徑大小通常以微米計(jì),表示大于這一規(guī)格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據(jù) NMWL分級(jí),有時(shí)也用截留分子量(MWCO)。NMWL表示大多數(shù)大于這個(gè)值的分子將在超濾時(shí)截留。一個(gè)確定NMWL的超濾膜應(yīng)該截留至少90%以上的這個(gè)大小的球形分子。但為了保險(xiǎn)起見,實(shí)踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時(shí)膜截留分子量應(yīng)該充分大于流過的溶質(zhì)。當(dāng)膜材料相同時(shí),孔徑減小 會(huì)增加排阻而減小濾過率。截留及產(chǎn)物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質(zhì)、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設(shè)備構(gòu)造等。因此常常發(fā)生同樣 NMWL 的膜對一定范圍內(nèi)的不同分子截留效果有一定差異的情況。使用超濾方法進(jìn)行樣品濃縮或除鹽時(shí)...
創(chuàng)新的純化 - 濃縮 - 換液一體化系統(tǒng) Amicon? Pro 純化超濾系統(tǒng) 目前的蛋白純化常常包括很多步驟,用到多種器具,卻又因此帶來蛋白降解和損失的問題。為了避免因樣品轉(zhuǎn)移帶來的各種風(fēng)險(xiǎn),減少您在樣品孵育、漂洗、洗脫、濃縮及換液各步上耗費(fèi)的時(shí)間,默克密理博的研發(fā)團(tuán)隊(duì)創(chuàng)新地推出了Amicon?Pro一體化純化超濾系統(tǒng)。Amicon?Pro提供了對小量蛋白樣品的標(biāo)準(zhǔn)化操作,使純化濃縮蛋白變得簡便高效,數(shù)據(jù)穩(wěn)定易得。 開放的設(shè)計(jì)使您可以根據(jù)實(shí)際需要靈活使用,Amicon?Pro將成為實(shí)驗(yàn)室小量蛋白純化、濃縮、換液各種操作的多功能工具。超濾濃縮管和其他的空壓機(jī)有什么區(qū)別呢?青浦區(qū)默克15m...
外泌體用于細(xì)胞學(xué)或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前的無菌處理 已經(jīng)經(jīng)過上述方法制備的外泌體在進(jìn)行細(xì)胞或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之前還需進(jìn)行一步除菌過濾,這個(gè)時(shí)候考慮到得率,應(yīng)該采用離心法處理,以減少過濾時(shí)的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進(jìn)行澄清[目錄號(hào)SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號(hào)UFC901024,10 kDa MWCO) ,4000g離心 X 10 min。 從超濾...
如果能確保用同樣的超濾管對其它蛋白成功操作的話,那么有可能是這個(gè)目的蛋白的原因。有時(shí)蛋白會(huì)因其本身的一些特性(構(gòu)象差異)而影響濃縮效果,建議選用上一分子量級(jí)別的超濾管(如原本選用30k,此時(shí)可以選擇10k)。 2)如果目的樣本也不在濾過液中,那么: a)蛋白樣本起始濃度是否大于25ug/mL? b)用來確定樣本濃度的方法是什么?是否可信? c)目的蛋白是不是沉淀了?如果是的,具體解決方法請參考上面的關(guān)于蛋白沉淀問題的解釋。上海超濾濃縮管供應(yīng)商。南京離心濃縮管咨詢問價(jià)超濾(UF)常用于分離溶液中極其微小的顆粒和不溶分子。雖然分離效果受到包括化學(xué)性質(zhì)、電荷等多種因素影響,這種方法主要還是以分...
外泌體用于細(xì)胞學(xué)或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前的無菌處理 已經(jīng)經(jīng)過上述方法制備的外泌體在進(jìn)行細(xì)胞或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之前還需進(jìn)行一步除菌過濾,這個(gè)時(shí)候考慮到得率,應(yīng)該采用離心法處理,以減少過濾時(shí)的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進(jìn)行澄清[目錄號(hào)SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號(hào)UFC901024,10 kDa MWCO) ,4000g離心 X 10 min。 從超濾...
首先,Amicon? Ultra超濾管的蛋白比較低起始濃度為25ug/ml。請確保樣本的起始濃度大于這個(gè)濃度。其次,如果問題仍然出現(xiàn),請不要丟棄樣本濾過液以便用于分析可能的原因: 1)如果目的樣本在濾過液中,那么請排查: a)是否選擇了合適截留分子量的超濾管(目的蛋白分子量的1/2或者1/3)? b)使用的離心力是否是在限定范圍內(nèi)?如果使用的是rpm,請換算成相應(yīng)的g離心力,具體換算方法請垂詢。 c)離心機(jī)**近是否有校準(zhǔn)過? d)是否***嘗試這個(gè)蛋白?上海超濾濃縮管供應(yīng)商。徐匯區(qū)超濾濃縮管訂購高濃度樣品濃縮 Centriprep?超濾管 Centriprep?超濾管是一次性使...
樣品的澄清、過濾和除菌 Ultrafree?-MC和Ultrafree?-CL微濾管 Ultrafree?-MC(0.5mL)和Ultrafree?-CL(2mL)是一次性使用的微濾離心管,可以用于各種水性樣品和在某些溶劑中的樣品除顆粒物、除沉淀的處理。提供兩種體積及多種膜孔徑以及已經(jīng)經(jīng)過無菌處理的產(chǎn)品供選擇。Ultrafree?微濾離心管操作簡便、樣品回收率高且重復(fù)性很好,是蛋白和核酸樣品處理的理想選擇。 特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn) 有0.1-5.0μm五種膜孔徑供選擇 采用高回收率的親水Durapore? (PVDF)膜和親水PTFE膜 提供無菌包裝和非無菌包裝形式產(chǎn)品 過濾速度快,數(shù)據(jù)穩(wěn)定...
提供的超濾管是沒有經(jīng)過去內(nèi)***處理的,同時(shí)由于內(nèi)***通常以多聚體的形式存在,大小 在10-1000KD之間不等,在超濾的過程中是無法去除的??稍趯?shí)驗(yàn)前通過先用0.5M NaOH預(yù)清洗,隨后用Milli-Q?水/緩沖液清洗的步驟去除大部分內(nèi)***。關(guān)于針對Amicon?,Microcon? , Centricon?嘗試過的內(nèi)***去除方案。 Amicon? Ultra超濾管使用的是再生纖維素膜,這種材質(zhì)是蛋白吸附比較低的超濾膜。但是對于一些疏水性蛋白或非極性蛋白,它們和膜的非特異吸附可能會(huì)增強(qiáng),對于這種情況,可以嘗試在實(shí)驗(yàn)前對超濾管進(jìn)行封閉處理。也可以嘗試換成Amicon? Ultra ...
特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn): 特別的反轉(zhuǎn)離心回收設(shè)計(jì),滯留體積很小,樣品損失少, 樣品回收率通常>90% 濃縮倍數(shù)達(dá)到50-200倍 Ultracel?再生纖維素膜和聚丙烯外殼將吸附降至比較低 特別設(shè)計(jì)的死體積防止離干,保證樣品回收率和活性 有四種截留分子量供選擇 法醫(yī)gDNA鑒定、PCR產(chǎn)物純化與小分子分離 Microcon? 超濾管 Microcon?為橫膜式超濾管,沒有死體積,用于大分子樣品的濃縮、脫 鹽、換液都非常高效方便。實(shí)際應(yīng)用中還常用于大分子與其它分子的分 離,比如蛋白酶切后的處理及藥物結(jié)合率分析等等。超濾濃縮管批發(fā)價(jià)格是多少呢。奉賢區(qū)默克15ml超濾濃縮管訂購截留 截留...
上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(有5種截留分子量規(guī)格可選)。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹脂混勻。孵育5 min。 7. 4,000×g離心15 min。 8. 加上蛋白樣品**終需要的緩沖液1.5 mL。4,000×g離心15 min,置換緩沖液的同時(shí)進(jìn)行濃縮。 9. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。 * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管~1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法,但溶液體積和離心時(shí)間等需要略加優(yōu)化。 用Protei...
首先,Amicon? Ultra超濾管的蛋白比較低起始濃度為25ug/ml。請確保樣本的起始濃度大于這個(gè)濃度。其次,如果問題仍然出現(xiàn),請不要丟棄樣本濾過液以便用于分析可能的原因: 1)如果目的樣本在濾過液中,那么請排查: a)是否選擇了合適截留分子量的超濾管(目的蛋白分子量的1/2或者1/3)? b)使用的離心力是否是在限定范圍內(nèi)?如果使用的是rpm,請換算成相應(yīng)的g離心力,具體換算方法請垂詢。 c)離心機(jī)**近是否有校準(zhǔn)過? d)是否***嘗試這個(gè)蛋白?益啟生物公司作為上海一家專業(yè)從事超濾濃縮管代理銷售。寶山區(qū)默克0.5ml超濾濃縮管批發(fā)用于攪拌式超濾杯的Ultracel?預(yù)切超濾...
多臺(tái)同時(shí)操作模式 借助Amicon?超濾杯多臺(tái)操作連接裝置可以同時(shí)運(yùn)行多達(dá)3個(gè)超濾杯。 Amicon? stirred cells 耐溶劑型攪拌式超濾杯 用于對在有機(jī)溶劑中的樣品進(jìn)行濃縮和緩沖液置換。有 47mm 和 76mm 兩種規(guī)格。需要注意醛、酮(如**)、醚酯等會(huì)降低碳氟化合物材質(zhì) O 形圈的使用壽命。 特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn): 采用圓柱形硼硅酸鹽玻璃容器和 PTFE 超好化學(xué)兼容性超濾膜 可預(yù)裝膜后進(jìn)行高壓滅菌 直接從上面操作,避免拆卸裝置的麻煩 組件少,易于清潔和組裝 配套使用 47 或 76 mm 直徑預(yù)切膜片 應(yīng)用: 帶有有機(jī)成分的樣品的濃縮、換液上海超濾濃縮管供應(yīng)...
特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn): 高產(chǎn):沒有樣品轉(zhuǎn)移,損失更少 溫和:特別的滲濾設(shè)計(jì)使換液過程更溫和 快速:從細(xì)胞裂解到純化、優(yōu)化一共需要5次低速離心 靈活:一種離心方法,***支持各種樣品制備所需 蛋白緩沖液置換、脫鹽和透析 每一種蛋白的制備都是***的,常常需要摸索和優(yōu)化。應(yīng)該考慮為特定蛋白選擇相應(yīng)的工具進(jìn)行換液和透析。您可以從操作較快 Amicon? Pro 的滲濾法或更溫和的 D-Tube?透析法中選擇更適合樣品的操作方法。 選擇更直接而有效的方法! Amicon? Pro能做到一步離心完成脫鹽換液根據(jù)您的具體需求選擇不同的超濾濃縮管設(shè)計(jì)。寶山區(qū)默克離心濃縮管銷售這種小管適合在1.5mL離...
對于慢***推薦Amicon? Ultra 100kDa; 對于腺***推薦Amicon? Ultra 50kDa。具體的操作步驟可以參考***濃縮純化試劑盒FTLV00003和FTAV00003的產(chǎn)品使用說明書。另提供AAV(腺相關(guān)***)的制備方法供參考。 去污劑因其獨(dú)特的性質(zhì),當(dāng)濃度大于臨界微團(tuán)濃度(Critical Micelle Concentration, CMC)時(shí),去污劑分子會(huì)聚集形成微團(tuán)而改變分子構(gòu)象,這有可能會(huì)影響去污劑的去除效果。 Amicon? Ultra超濾膜含有微量甘油。如果此成分干擾分析,可用緩沖液或Milli-Q?水預(yù)清洗。如果干擾仍然存在,用0.1 N N...
雖然影響因素較多,我們通常建議截留分子量約為目的分子分子量一半的膜,這樣可以比較大化樣品的回收,同時(shí)節(jié)省過濾時(shí)間。截留微濾中膜的孔徑大小通常以微米計(jì),表示大于這一規(guī)格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據(jù)NMWL分級(jí),有時(shí)也用截留分子量(MWCO)。NMWL表示大多數(shù)大于這個(gè)值的分子將在超濾時(shí)截留。一個(gè)確定NMWL的超濾膜應(yīng)該截留至少90%以上的這個(gè)大小的球形分子。但為了保險(xiǎn)起見,實(shí)踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時(shí) 膜截留分子量應(yīng)該充分大于流過的溶質(zhì)。當(dāng)膜材料相同時(shí),孔徑減小 會(huì)增加排阻而減小濾過率。截留及產(chǎn)物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質(zhì)、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設(shè)備構(gòu)...
加入漂洗緩沖液(體積是樹脂柱床體積的7.5倍)并離心。< 500μL樹脂時(shí)1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時(shí)2,000×g離心4 min。 4. 使用一個(gè)新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液(體積是樹脂柱床體積的5倍)與樹脂混勻并離心。< 500μL樹脂時(shí)1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時(shí)2,000×g離心4 min?;厥展苤屑醇兓玫牡鞍住? 6. 如果是純化抗體,在純化產(chǎn)物中加入中和緩沖液。 * 進(jìn)行較大體積操作時(shí),可以延長結(jié)合反應(yīng)時(shí)間,并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購不帶Amicon? Ultra ...