青浦區(qū)Merck細(xì)胞分析儀Merck儀器參數(shù)

來源： 發(fā)布時間：2022-02-15

疫檢測對照，茴香霉素處理和PDGF處理的3T3小鼠成纖維細(xì)胞裂解液（10-0.63 ug）被轉(zhuǎn)移到Immobilon8-P膜上。印跡被阻止補(bǔ)充有0.5％脫脂奶粉（NFDM）的Tris緩沖鹽水含0.1％Tweeno 20表面活性劑（TBST），并用一級抗B-Tubulin進(jìn)行探測（MAB3408）和次級HRP偶聯(lián)的山羊螞蟻（AP1 24P）在上述條件。將印跡暴露于X射線膠片一分鐘。維護(hù)SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng)清理去除協(xié)議每次使用時應(yīng)清潔SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng)。清理去除鹽堿中的鹽或污染物和管道，抽吸真空并通過系統(tǒng)沖洗散去的水。注：請勿對SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)進(jìn)行高壓滅菌?？梢圆鹦犊蚣?，并用中性清潔劑洗滌，然后用蒸餾水徹底沖洗。風(fēng)干。要拆卸框架，請使用右側(cè)的藍(lán)色夾子調(diào)整框架的方買細(xì)胞計(jì)數(shù)器就找益啟生物。青浦區(qū)Merck細(xì)胞分析儀Merck儀器參數(shù)

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15分鐘。圖4.擴(kuò)展孵化（過夜）：SNAP i.d.8 2.0系統(tǒng)與標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測一種。 SNAP id.o 2.0蛋白檢測b。標(biāo)準(zhǔn)系統(tǒng)Midi印跡免疫檢測將A431細(xì)胞裂解液和大鼠肝裂解液（12至3 ug）轉(zhuǎn)移至Immobilon9-P膜。兩種印跡均用在TBST中制備的0.5％NFDM封閉。這SNAP i.d.c 2.0 Midi印跡被阻斷20秒，標(biāo)準(zhǔn)印跡為分鎖了1個小時。兩種印跡均與相同稀釋度的MAP激酶1/2（ErK1 / 2），但是，對于HRP偶聯(lián)的二抗山羊抗兔（AP132P），將SNAP i.d.2.0印跡孵育10分鐘在TBST中洗滌3次后，將標(biāo)準(zhǔn)印跡孵育1小時。 圖5.擴(kuò)展孵化（1小時）：，SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng)1小時協(xié)議與SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)協(xié)議與標(biāo)準(zhǔn)免青浦區(qū)Merck細(xì)胞分析儀Merck儀器參數(shù)關(guān)于細(xì)胞分析儀的詢價電話。

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2.0系統(tǒng)計(jì)算SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)所需的抗體濃度用于標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測的濃度標(biāo)準(zhǔn)SNAP i.d.o 2.0免疫檢測免疫檢測多印跡迷你印跡Midi污點(diǎn)_Ab濃度1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升所需抗體量_ 1微克0.25微克0.5微克1微克使用的抗體量30毫升2.5毫升5毫升10毫升比較終抗體稀釋1：30,0001：10,0001：10,0001：10,000使用的抗體庫存1微升0.25微升0.5微升1微升由于每種抗體都是只有一個的，并且檢測試劑的靈敏度各不相同，因此可能有必要進(jìn)行調(diào)整抗體或抗原濃度，使用的檢測試劑的類型或靈敏度或印跡X射線曝光時間。請注意，本指南只作為開發(fā)比較終抗體的起點(diǎn)濃度以獲得所需的性能。表2.封閉，抗體和洗滌的建議體積SNAP i.d.o 2.0SNA

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潤濕印跡。，對于大多數(shù)應(yīng)用和大多數(shù)抗體而言，0.5％的脫脂/低脂干奶溶液可以提供足夠的膜的阻塞。注意：請勿使用濃度高于0. 5％的干奶，因?yàn)樗赡軙?dǎo)致吸墨紙架堵塞膜。如果使用其他封閉溶液，請參閱表5了解兼容性和推薦濃度?！裨谙礈?，封閉和抗體緩沖液中始終使用0.1％Tween8 20表面活性劑。這將減少溶液的表面張力，并確保孵育過程中抗體在印跡支架中的均勻分布?！裼捎赟NAP i.d. @ 2.0系統(tǒng)中的免疫檢測時間很短，因此建議在開始操作之前應(yīng)準(zhǔn)備一抗和二抗稀釋液?！馦ultiBlot固定器所需的稀釋抗體的總體積為2.5 mL，Mini blot固定器為5 mL，10 mL用于Midi印跡固定器。，每次需要洗30次（MultiBlot為15毫升），以確保每次洗完后都能完全清洗印跡孵化步驟。青浦區(qū)Merck細(xì)胞分析儀Merck儀器參數(shù)