福建GlycINATORIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

如果您想分析單克隆抗體或單克隆抗體分子，現(xiàn)在有了Genovis的一些新產(chǎn)品（IgA酶，IgM酶），其他的模式和分子形式（IdeS高通量的產(chǎn)品形式）來測定和監(jiān)測許多不同的CQA，Genovis可以緩解使用不同分析方法時可能出現(xiàn)的瓶頸。 生產(chǎn)大量的樣品當(dāng)然很好，但如果分析團隊不能足夠快地處理它們，那就沒有什么意義了。 高通量分析需要一致的、易于使用的方法，當(dāng)然這些方法要快速，而且可能易于自動化。 這正是我們所能提供的，這使Genovis能夠支持更多不同功能的客戶。該酶對具有突變鉸鏈區(qū)域的抗體（如 LALA 突變）具有活性。福建GlycINATORIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

一些應(yīng)用（如結(jié)合研究）具有高度靈敏度，因此在制備中需要不含殘留酶的純抗體片段。因此，Genovis的 IgG 特異性蛋白酶也以固定化酶提供，可快速輕松地生成均質(zhì) F（ab'）2 和 Fc/2 片段。FabRICATOR Immobilized 含有固定化的 FabRICATOR （IdeS），用于制備來自多種 IgG 的 F（ab'）2 和 Fc 片段（對于兔 IgG，請咨詢），而小鼠 IgG2a 和 IgG3 可以使用含有 FabRICATOR Z Immobilized 的 FabRICATOR Z Fab2 試劑盒進行處理 。 為了生成和純化完整的 F（ab'）2 和 Fc/2 片段，使用 FabRICATOR Fab2 試劑盒處理曲妥珠單抗，并通過 SDS-page 進行分析。首先，在室溫下在FabRICATOR固定化離心柱上消化抗體15分鐘，然后進行短離心步驟。在 CaptureSelect ? 離心柱上純化 F（ab'）2 片段，并通過降低 pH 值，然后立即調(diào)整回中性 pH 值，一步洗脫結(jié)合的 Fc 片段。使用 FabRICATOR Fab2 試劑盒從酶切到收集片段的過程大約需要 1 小時山東FabRICATOR ZIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)小鼠 IgG1 在鉸鏈下方具有不同的序列，不被 FabRICATOR Z 消化。

與IdeS不同，在蛋白質(zhì)zhiliao藥物的質(zhì)量控制過程中，詳細(xì)分析和識別質(zhì)量屬性非常重要。對于具有柔性連接子的融合蛋白療法，這包括確認(rèn)連接蛋白的質(zhì)量以及蛋白質(zhì)接頭的質(zhì)量。使用 Genovis的GlySERIAS 的連接子酶切可以通過分離連接的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域來幫助這種質(zhì)量控制。然而，連接子中的大量甘氨酸殘基提供了酶的許多潛在消化位點，導(dǎo)致連接子內(nèi)多個位點同時水解。消化的產(chǎn)物通常由連接蛋白的幾種變體組成，并保留不同程度的連接子。雖然觀察到的異質(zhì)性通常不會對蛋白質(zhì)亞基的詳細(xì)表征產(chǎn)生負(fù)面影響，但有助于直接表征連接子，但有時需要更均勻的消化產(chǎn)物來詳細(xì)分析單個蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域。

Genovis是一家瑞典生物技術(shù)公司，自2010年起，為生物制藥公司提供SmartEnzymes工具酶。Genovis提供一系列獨特、快速且易于使用的酶學(xué)工具，主要用于生物制藥行業(yè)和學(xué)術(shù)界。我們在全球范圍內(nèi)提供創(chuàng)新的智能酶SmartEnzymes?，用于單克隆抗體、ADC、生物仿制藥和雙特異性生物藥物的開發(fā)、生產(chǎn)和質(zhì)量控制。您可以在我們的網(wǎng)站上“Application頁面”獲得更多應(yīng)用信息，如果您有興趣，可以和我們一起做一個“SmartStories”，也可以聯(lián)系我們。Genovis已經(jīng)測試了 PBS 和 150 mM 醋酸銨，并且也適用于FabRICATOR HPLC。

與IdeS不同，度拉糖肽由兩個胰高xue糖素樣肽-1 （GLP-1） 分子組成，它們通過柔性 GS 接頭連接到人 IgG4 的 Fc 區(qū)域。為了分別研究肽和 Fc 區(qū)域，從而鑒定結(jié)構(gòu)域特異性 PTM，用 Genovis的GlySERIAS 在 37°C 下凍干消化度拉糖肽 1 小時。為了降低樣品復(fù)雜性，使用內(nèi)切糖苷酶GlycINATOR Lyophilized去除Fc聚糖，并用DTT還原鏈間二硫鍵。反相LC-MS對樣品的分析表明，使用GlySERIAS進行連接子消化后，肽從Fc區(qū)域完全去除。連接子中的大量甘氨酸殘基為GlySERIAS提供了許多不同的潛在消化位點，這就是為什么Fc/2和GLP-1肽都被檢測為幾種變體，其中不同數(shù)量的甘氨酸和絲氨酸殘基仍然連接。此外，還鑒定了GLP-1肽的氧化。盡管GlySERIAS同時在多個位點進行消化，但一式三份的酶解在獲得的不同F(xiàn)c/2變體的相對量中顯示出可重復(fù)的結(jié)果。這正是您使用FabRICATOR（IdeS蛋白酶）可以得到的。海南FabDELLOIdeS蛋白酶蛋白組學(xué)

可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體，產(chǎn)生均質(zhì)的 F（ab'）2 和 Fc 片段。福建GlycINATORIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

抗體 Fc 糖基化譜是一種重要的 CQA，因為它會影響療效、和免疫原性。因此，需要從早期開發(fā)、工藝開發(fā)到質(zhì)量控制和批量放行的整個過程對Fc聚糖譜進行監(jiān)測。傳統(tǒng)的分析方法基于對游離的聚糖進行熒光標(biāo)記，然后通過HILIC-HPLC或CE進行分析，這需要多步驟的樣品制備方案，這需要大量的時間和資源。使用Genovis的FabRICATOR MagIC酶解mAb，然后使用LC-MS進行中級分析，為Fc聚糖分析提供了一種快速、直接的替代方法。如上所示，它很容易實現(xiàn)自動化，以提高通量并降低處理錯誤的風(fēng)險。福建GlycINATORIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶