Genovis的半胱氨酸蛋白酶 FabALACTICA (IgdE)與IdeS酶一樣是特異性蛋白酶。在二維核磁共振波譜 (2D-NMR) 之后,可以通過 HOS 分析在精確的原子水平上評(píng)估 mAb 的關(guān)鍵質(zhì)量屬性。從Genovis的FabALACTICA Immobilized獲得均相Fab和Fc片段的工作流程,是評(píng)估嵌合單克隆抗體英夫利昔單抗中HOS的理想選擇,在海報(bào)“FabALACTICA產(chǎn)生純和均相的mAb亞基,促進(jìn)2D-NMR波譜分析”中進(jìn)行了描述。來自生成的 Fab 和 Fc 片段的高質(zhì)量信號(hào)和光譜分辨率導(dǎo)致能夠觀察 Fab 和 Fc 之間的結(jié)構(gòu)變化、氧化和非氧化樣品之間的差異,并通過觀察原子分辨率來比較原研劑和生物仿制藥的 HOS。融合蛋白的中級(jí)分析既可以降低整體樣品的復(fù)雜性,又可以對(duì)翻譯后修飾進(jìn)行結(jié)構(gòu)域特異性鑒定和監(jiān)測(cè)。山東FabDELLOIdeS蛋白酶抗體酶切
與IdeS不同,Genovis的IgMBRAZOR是一種獨(dú)特的IgM特異性蛋白酶,可在重鏈中CH2結(jié)構(gòu)域下方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人IgM,產(chǎn)生均質(zhì)的F(ab')2和Fc片段。該酶能夠?qū)?fù)雜和高分子量的人IgM進(jìn)行中級(jí)分析,從而促進(jìn)疫苗、zhiliao和診斷等過程中的IgM表征。獨(dú)特-可實(shí)現(xiàn)IgM的中級(jí)表征和質(zhì)量控制;快速–在30分鐘內(nèi)生成均勻的F(ab')2和Fc片段;高度特異性–人IgM重鏈中的一個(gè)消化位點(diǎn)。IgMBRAZOR是一種獨(dú)特的IgM特異性酶,可在重鏈中CH2結(jié)構(gòu)域下方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人IgM,產(chǎn)生F(ab')2和Fc片段。消化在30分鐘內(nèi)完成,并且由于酶的特異性,如果孵育時(shí)間延長(zhǎng),則不存在過度消化的風(fēng)險(xiǎn)。該酶在pH值為5.5至9.0時(shí)具有活性,不需要還原條件或輔助因子即可發(fā)揮活性。良好的活性是在37°C下,但也可以在室溫下使用增加孵育時(shí)間進(jìn)行消化。IgMBRAZOR在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有His標(biāo)簽,分子量為38kDa。海南FabALACTICAIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶能夠在中級(jí)表征中并行快速自動(dòng)酶解多種抗體。
作為免疫系統(tǒng)的重要組成部分,IgA在自身免疫性疾病、過敏反應(yīng)、胃腸道疾病等許多不同的健康狀況中發(fā)揮作用。在天然條件和復(fù)雜生物樣品中選擇性和特異性消化IgA的能力在臨床醫(yī)學(xué)和研究中具有重要價(jià)值。IgASAP酶是降低zhiliao性IgA候選物樣品復(fù)雜性并簡(jiǎn)化IgA分析表征的寶貴工具。人IgA1和IgA2之間的一個(gè)顯著結(jié)構(gòu)差異是鉸鏈區(qū)域。與IgA2相比,IgA1具有更長(zhǎng)的富含O-聚糖且更靈活的鉸鏈區(qū)域。IgASAPSub1的消化位點(diǎn)位于該擴(kuò)展區(qū)域,使酶具有IgA1特異性。IgA2亞類以三種等位基因形式存在,A2m1、A2m2和A2m3。IgASAPSub1+2在脯氨酸(P)和纈氨酸(V)之間消化IgA1和IgA2m1只有N端到鉸鏈區(qū)域,但由于A2m2和A2m3中的脯氨酸殘基被精氨酸(R)殘基取代,因此這兩種同種異體型的IgA2對(duì)消化具有抗性。
Genovis提供具有低水平內(nèi)Du素的FabRICATOR(IdeS)凍干酶,用于IgG的鉸鏈以下消化。FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個(gè)氨基酸位點(diǎn)的抗體,產(chǎn)生均質(zhì)的F(ab')2和Fc片段。FabRICATORLowEndotoxin以凍干粉的形式提供兩種不同規(guī)格:2000和5000單位,分別用于消化2mg或5mgIgG。該產(chǎn)品配方每瓶的內(nèi)Du素含量較低,2000單位小瓶的內(nèi)Du素含量為<0.04EU/瓶,5000單位小瓶的內(nèi)Du素含量為<0.10EU/瓶。有效消化,內(nèi)DU素水平低;適用于靈敏的體內(nèi)或基于細(xì)胞的檢測(cè)。使用GlySERIAS 的連接子酶切可以通過分離連接的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域來幫助這種質(zhì)量控制。
Genovis的FabRICATOR是一種半胱氨酸蛋白酶,它對(duì)許多不同的物種和IgG亞類都有活性,包括人IgG亞類1-4以及猴子、兔子、大鼠和綿羊IgG的一些亞類。FabRICATOR在鉸鏈下方的單個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行消化,生成F(ab’)2和Fc/2子基,可以進(jìn)一步還原生成Fd’,輕鏈和F/2子基是必需的。FabRICATOR(IdeS)通過蛋白-蛋白相互作用與目標(biāo)抗體工作,這說明了它的高特異性。事實(shí)上,它在單個(gè)位點(diǎn)消化意味著使用FabRICATOR時(shí)沒有過度消化的風(fēng)險(xiǎn),其高特異性也意味著相同的消化方案可以作為平臺(tái)方法應(yīng)用于許多不同的抗體。FabRICATOR(IdeS)不需要還原條件來獲得良好活性,也不需要任何額外的輔助因子,它將在不同生理緩沖中發(fā)揮作用。這意味著按照下面的鉸鏈消解,您將生成F(ab’)2和Fc/2片段用于分析或其他應(yīng)用。反相LC-MS對(duì)樣品的分析表明,使用Genovis的GlySERIAS進(jìn)行度拉糖肽的連接子消化后,肽從Fc區(qū)域完全去除。江蘇FabDELLOIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶
Genovis的FabRICATOR (IdeS)HPLC酶色譜柱,可快速進(jìn)行單克隆抗體的柱上酶切,并產(chǎn)生一致的亞基。山東FabDELLOIdeS蛋白酶抗體酶切
在Genovis,我們的策略是幫助客戶進(jìn)行中級(jí)(或亞基)分析,這是我們的工作,特別是我們的蛋白質(zhì)酶切產(chǎn)品。完整質(zhì)量和肽圖譜是蛋白質(zhì)表征的常用方法,我們發(fā)現(xiàn),與簡(jiǎn)單但信息有限的完整質(zhì)量和高度復(fù)雜但信息豐富的肽圖譜相比,中級(jí)方法具有優(yōu)勢(shì)。通過執(zhí)行中級(jí)描述,您可以生成從完整的質(zhì)量實(shí)驗(yàn)中獲得的所有信息,具有額外的優(yōu)勢(shì)。在對(duì)抗體進(jìn)行完整質(zhì)量分析時(shí),很難明確地識(shí)別某些修飾。質(zhì)譜儀器正在改進(jìn),可以更有效地分析更大的分子,但通過使用我們的SmartEnzymes,如IdeS,可以將抗體分解成更小的片段,這提高了這些實(shí)驗(yàn)可以執(zhí)行的分辨率,因此,增加了鑒定修飾的信心。此外,你不僅能夠更好地識(shí)別修改,而且你能夠?qū)⑺鼈兌ㄎ坏降鞍踪|(zhì)上的單個(gè)結(jié)構(gòu)域,這是你在完整水平上無法做到的。山東FabDELLOIdeS蛋白酶抗體酶切