高通量測序技術(shù)又稱“下一代“測序技術(shù)或深度測序技術(shù),可以一次性對(duì)幾十萬至幾百萬條DNA分子進(jìn)行序列測定。現(xiàn)已普遍應(yīng)用在基因組測序、基因表達(dá)分析、非編碼小分子RNA鑒定、轉(zhuǎn)錄因子靶基因篩選及DNA甲基化等相關(guān)的研究領(lǐng)域。高通量測序技術(shù)是對(duì)傳統(tǒng)測序一次性的改變,一次對(duì)幾十萬到幾百萬條DNA分子進(jìn)行序列測定,因此在有些文獻(xiàn)中稱其為下一代測序技術(shù)(nextgenerationsequencing)足見其劃時(shí)代的改變,同時(shí)高通量測序使得對(duì)一個(gè)物種的轉(zhuǎn)錄組和基因組進(jìn)行細(xì)致全貌的分析成為可能,所以又被稱為深度測序(deepsequencing)。分析不同大小和不同樣品類型的UViGs對(duì)于探索病毒基因組序列空白是有價(jià)值的。廣州高通量測序進(jìn)化分析公司
深度測序技術(shù)稱為深度測序(deepsequencing),是因?yàn)樗菍?duì)傳統(tǒng)測序技術(shù)的一次性改變,它通過一次性對(duì)幾十萬到幾百萬條DNA分子進(jìn)行序列測定(之前只是幾十至多幾千個(gè)堿基),同時(shí),如此的高通量測序使得對(duì)一個(gè)物種的轉(zhuǎn)錄組和基因組進(jìn)行細(xì)致全方面的分析成為可能。你以為深度測序只是一種“養(yǎng)”在實(shí)驗(yàn)室“深閨”中摸不著、看不透的高精尖技術(shù)?錯(cuò)!錯(cuò)!錯(cuò)!深度測序技術(shù)的巨大發(fā)展,與計(jì)算機(jī)的發(fā)展歷程有著類似之處,它將對(duì)人類的科學(xué)、經(jīng)濟(jì)和社會(huì)三個(gè)方面產(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響。RNA病毒全基因組二代測序分析技術(shù)病毒株都需要獲得盡量完整的基因組序列來指導(dǎo)下一步的研究。
對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序的價(jià)格合理,樣品具備什么條件才可以獲得比較質(zhì)量的組裝效果?其他公司對(duì)用于測序的樣本的要求較高。探普生物對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序是基于探普的專有流程,樣本要求非常低,不要求粒子純化,不要求總量到達(dá)微克,按探普的專門的收樣標(biāo)準(zhǔn)和送樣流程進(jìn)行即可。簡言之,經(jīng)過細(xì)胞或其他方式培養(yǎng)的樣本,若載量較高,不需要復(fù)雜處理,直接破碎細(xì)胞取上清提取核酸都可以獲得非常好的組裝效果;而臨床標(biāo)本,需要看情況,對(duì)于被侵害嚴(yán)重的個(gè)體,釋放較高的部位也可以獲得很好的效果;其他類型的樣本,就需要測ct值來確定是否可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn),以及評(píng)估測序效果。
病毒(Virus)由一種核酸分子(DNA或RNA)與蛋白質(zhì)(Protein)構(gòu)成或由蛋白質(zhì)構(gòu)成(如朊病毒)。根據(jù)遺傳物質(zhì)的組成,可分為單鏈DNA病毒(ssDNA)、雙鏈DNA病毒(dsDNA)、單鏈RNA病毒(ssRNA)、雙鏈RNA病毒(dsRNA)和蛋白質(zhì)病毒(如朊病毒)。根據(jù)宿主類型的不同,可以分為噬菌體(細(xì)菌病毒)、植物病毒(煙花葉病毒)和動(dòng)物病毒(如禽流感病毒、天花病毒和HIV等)。病毒全基因組測序(VirusWholeGenomeSequencing,VWGS),是指基于第二代高通量測序技術(shù),對(duì)病毒全基因組進(jìn)行測序,利用生物信息分析手段,得到病毒的全基因組序列,解析編碼信息,并獲得相應(yīng)的變異信息。病毒是由一種核酸分子與蛋白質(zhì)構(gòu)成或只由蛋白質(zhì)構(gòu)成。
有哪些技術(shù)手段能實(shí)現(xiàn)對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序?早期在高通量測序技術(shù)普及之前,對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序是通過非特異性擴(kuò)增+克隆結(jié)合sanger測序來完成的。當(dāng)物種有了參考的序列之后,可以通過特異性擴(kuò)增+sanger測序獲得全基因組序列。Sanger測序準(zhǔn)確度高,讀長很長,但與此同時(shí),擴(kuò)增和克隆工作費(fèi)時(shí)費(fèi)力,由于流程繁瑣,加上快速變異導(dǎo)致引物無法通用,該方法對(duì)于大量基因組的測序工作而言,可操作性不強(qiáng),這對(duì)于研究者一直是一個(gè)困擾。高通量測序技術(shù)正式啟用之后,研究者可以將樣品處理至標(biāo)準(zhǔn)濃度和體積后進(jìn)行測序和分析,減少了工作量,增加了成功率。探普生物進(jìn)行了大量有針對(duì)性的研發(fā)和測試,開發(fā)了全套的實(shí)驗(yàn)和分析流程用于對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序,該流程自運(yùn)行以來廣受研究者們好評(píng)。全基因組測序覆蓋面廣。病毒全基因組測序進(jìn)化分析診斷
病毒全基因組測序產(chǎn)品特點(diǎn):基于PCR技術(shù)和抗原抗體技術(shù)的售后驗(yàn)證平臺(tái)。廣州高通量測序進(jìn)化分析公司
二代測序可以用于對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序有哪些挑戰(zhàn)?二代測序相較sanger測序,差異主要就是單次運(yùn)行可以獲得海量的數(shù)據(jù)量,因此也稱為高通量測序。想要通過高通量測序獲得病毒全序列,需要經(jīng)歷:核酸純化-文庫構(gòu)建-生物信息學(xué)分析這三大基本流程。而高通量測序技術(shù)本身并不是以病毒為目標(biāo)開發(fā)的,因此每個(gè)環(huán)節(jié)都是挑戰(zhàn)。核酸純化步驟決定了Input核酸的起始濃度和總量,從而決定了文庫構(gòu)建的成敗、質(zhì)量和產(chǎn)量;文庫的好壞決定了數(shù)據(jù)的質(zhì)量和產(chǎn)出;而數(shù)據(jù)的質(zhì)量產(chǎn)出直接影響分析結(jié)果。樣品一般核酸濃度很低,且?guī)в写罅克拗魑廴荆虼藢?shí)驗(yàn)部分和分析部分都比較困難。探普生物基于這些困難點(diǎn),進(jìn)行了大量有針對(duì)性的研發(fā)和測試,開發(fā)了全套的實(shí)驗(yàn)和分析流程用于對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測序,該流程自運(yùn)行以來廣受研究者們好評(píng)。廣州高通量測序進(jìn)化分析公司
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