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    具有保密性的材料除外）。2、目的蛋白相應(yīng)一抗：請(qǐng)您提供質(zhì)量保證的一抗（或委托我公司準(zhǔn)備）?？贵w的使用量通過預(yù)實(shí)驗(yàn)后進(jìn)行確認(rèn)，原則上不回收使用一抗。3、陽性對(duì)照樣品（盡量提供）。4、相關(guān)文獻(xiàn)（可選）。注：若要檢測磷酸化蛋白，請(qǐng)?jiān)?-3個(gè)月內(nèi)進(jìn)行，因?yàn)殚L時(shí)間保存的樣品容易使磷酸化蛋白去磷酸化而檢測不到磷酸化條帶。五、提交給客戶結(jié)果1、預(yù)實(shí)驗(yàn)顯色結(jié)果（TIFF格式、JPEG格式或PNG格式），預(yù)實(shí)驗(yàn)采取3個(gè)一抗稀釋度，選取部分實(shí)驗(yàn)樣本。2、正式實(shí)驗(yàn)顯色結(jié)果（TIFF格式、JPEG格式或PNG格式）。3、完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告。六、服務(wù)項(xiàng)目說明1、提供的蛋白量與待檢測的目的蛋白數(shù)量有關(guān)，蛋白數(shù)量增加相應(yīng)的樣品量也要增加。2、每張膜樣品數(shù)量為1-8個(gè)，不足8個(gè)以8個(gè)收取。9-16個(gè)樣品為2張膜，17-24個(gè)樣品為3張膜；以此類推。舉例：7個(gè)樣品，1個(gè)目的蛋白，算1張膜；有9個(gè)樣品，1個(gè)目的蛋白，算2張膜；7個(gè)樣品，2個(gè)目的蛋白，算2張膜，有9個(gè)樣品，2個(gè)目的蛋白，算4張膜。注：以上為一般算法。如果客戶樣品數(shù)量需要按照組別等來進(jìn)行上樣時(shí)，需要重新確定每張膜的上樣量及膜的張數(shù)。3、選擇部分樣品進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，參考目的蛋白一抗說明書進(jìn)行3個(gè)稀釋度的預(yù)實(shí)驗(yàn)。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家便宜？上海東寰告訴您。北京品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢(shì)

EdU上的乙炔基能與生物素標(biāo)記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價(jià)銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，該反應(yīng)非常迅速，被稱作點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)，其反應(yīng)原理參見圖1。通過點(diǎn)擊反應(yīng)，新合成的DNA會(huì)被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記，從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測設(shè)備檢測到增殖的細(xì)胞。EdU檢測法中的點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標(biāo)記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細(xì)胞DNA中的EdU，在銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，終使細(xì)胞DNA標(biāo)記上生物素等探針。江西哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒說明書EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的原理是什么？上海東寰告訴您。

Jurkat細(xì)胞只用EdU標(biāo)記(左列)，或在標(biāo)記EdU0min用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)處理(右列)，2小時(shí)后染色，然后通過流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測。從流式結(jié)果圖中可以看出，EdU標(biāo)記的細(xì)胞有較高比例的綠色熒光陽性細(xì)胞，呈現(xiàn)綠色熒光陰性(弱染色)和陽性(強(qiáng)染色)的兩個(gè)峰，分別對(duì)應(yīng)于未增殖細(xì)胞和增殖細(xì)胞。經(jīng)過Hydroxyurea處理的細(xì)胞，綠色熒光陽性的細(xì)胞幾乎完全消失，剩下一個(gè)綠色熒光陰性的峰。Hela細(xì)胞只用EdU標(biāo)記(左列)，或在標(biāo)記EdU0min用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)處理(右列)，2小時(shí)后染色（步驟染Hoechst，方便觀察增殖細(xì)胞比例），然后通過熒光顯微鏡進(jìn)行檢測。鏡下可見，*EdU標(biāo)記的細(xì)胞有一部分染上綠色熒光的增殖細(xì)胞，未增殖細(xì)胞的細(xì)胞核呈藍(lán)色單染。

這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的，但被用于替代[3H]thymidine摻入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于細(xì)胞熒光示蹤的原理能檢測到單個(gè)的增殖細(xì)胞，但由于每增殖一次熒光減弱一半，在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細(xì)胞，檢測靈敏度不是很高，通常*適用于流式細(xì)胞儀檢測。在進(jìn)行科學(xué)研究時(shí)，上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine)，中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷，是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷，thymidine)類似物，EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好？

EdU-488細(xì)胞增殖檢測試劑盒(MeilunEdUCellProliferationKitwithAlexaFluor488)，是一種利用核苷滲入法對(duì)細(xì)胞增殖情況進(jìn)行快速、簡單、高靈敏檢測的試劑盒。其原理為：試劑盒中的EdU(5-ethynyl-2′-deoxyuridine)是一種胸苷(T)類似物，EdU可以在在細(xì)胞周期的S期中替代胸苷摻入到新合成的DNA中；另一方面，EdU上的乙炔基能與疊氮化物(如熒光探針AlexaFluor488Azide)通過Cu+的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，該反應(yīng)非常迅速，被稱作點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)(圖1)。通過點(diǎn)擊反應(yīng)，新合成的DNA會(huì)被綠色熒光標(biāo)記，然后通過檢測熒光信號(hào)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞增殖的檢測。上海東寰與您分享EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒發(fā)揮的重要作用。河南咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒原理

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EdU（5-溴-2-脫氧尿嘧啶）試劑盒是一種嘧啶類似物，可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。通過以上原理圖的對(duì)比，大家不難發(fā)現(xiàn)，EdU法檢測細(xì)胞增殖，無須抗體，無變性步驟，保持細(xì)胞形態(tài)和DNA完整性，是一種簡單，可靠，省事的創(chuàng)新方法。但是，現(xiàn)在依然有很多研究者們依然沒有得到細(xì)胞增殖檢測*行之有效，節(jié)約反應(yīng)時(shí)間的方法。Abbkine的EdU檢測試劑盒有兩個(gè)型號(hào)，分別匹配的是兩種不同的熒光通道，細(xì)胞增殖成像分析試劑盒（EdU法）(綠色熒光)，KTA2030，488通道；細(xì)胞增殖成像分析試劑盒（EdU法）(橘紅色熒光)，KTA2031，549通道。北京品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢(shì)