FBS替代品血小板裂解液使用注意事項

細胞培養(yǎng)基制備1.比較好在4°C下解凍ELAREM Prime血小板裂解液過夜或在37°C水浴中解凍1小時。2.通過將10%ELAREM Prime血小板裂解液添加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基（即MEMα、GlutaMAX補充劑、無核苷）和1%的青霉素/鏈霉素作為**終濃度來制備完整的細胞培養(yǎng)基。3.應(yīng)在完全細胞培養(yǎng)基中加入肝素以抗凝。我們建議添加肝素的**終濃度為2IU/mL PL SUPPLEMENT(貨號PL-SUP-500)or 0.024mg/mL PL SUPPLEMENT-XF(貨號PL-SUP-500-XF).4.完整細胞培養(yǎng)基可在4°C下儲存，并穩(wěn)定約4周儲存和穩(wěn)定性ELAREM Prime在標簽上注明的失效日期之前是穩(wěn)定的。ELAREM Prime在使用前在-20°C（或在-80°C進行長期儲存）冷凍儲存時穩(wěn)定。解凍后，建議將未使用的ELAREM Prime樣品分裝并在-20°C下重新冷凍。應(yīng)避免ELAREM Prime的重復(fù)凍融循環(huán)，因為這會導(dǎo)不溶性顆粒形成的增加。使用時，只需預(yù)熱一份完整的細胞培養(yǎng)基，并將剩余的培養(yǎng)基冷藏在4-8°C。血小板裂解液是由富含血小板的血漿純化萃取而成,其中包含很多不同的細胞生長因子。FBS替代品血小板裂解液使用注意事項

    血小板裂解液（plateletlysate，PL）是自體或異體血小板富集物經(jīng)細胞裂解后的產(chǎn)物，已經(jīng)被諸多研究推薦作為胎牛血清（fetalbovineserum，F(xiàn)BS）的替代品，應(yīng)用于間充質(zhì)干細胞（mesenchymalstemcells，MSC）的大規(guī)模擴增培養(yǎng)。但是，PL對諸如牙髓干細胞（dentalpulpstemcells，DPSCs）、牙周膜干細胞（periodontalligamentstemcells，PDLSCs）及根尖牙rutou干細胞（stemcellsfromapicalpapilla，SCAP）等牙源性干細胞的生物學(xué)效應(yīng)尚不明確。 制備血小板裂解液的解凍方法血小板裂解液可用于多種細胞培養(yǎng)，如MSC間充質(zhì)干細胞，角質(zhì)細胞，成纖維細胞，內(nèi)皮細胞等。

產(chǎn)品制造：nLivenPR由Sexton Biotechnologies制造，其質(zhì)量體系經(jīng)認證為符合ISO9001標準；制造過程根據(jù)制造商的要求進行控制質(zhì)量體系。處理包括匯集大約100個供體來源的血小板單位，以破裂血小板膜，用0.5μm和0.2μm過濾器過濾，經(jīng)過一系列的輻照和無菌填充流程。通過一系列的產(chǎn)品放行測試保持批次間的一致性；分析證書是有效的隨每批提供，以表明其符合所有放行標準。Sexton Biotechnologies申明生產(chǎn)nLivenPR所用的原材料成分均非人類動物起源。

前述所說的生長因子大多存在于血小板內(nèi)部的α顆粒中，當(dāng)血小板被活化后會產(chǎn)生脫顆粒作用（即血小板的α顆粒會和細胞膜融合），進而釋放大量活化的生長因子。而人源血小板裂解物就是直接將人類來源血小板細胞經(jīng)過連續(xù)的反復(fù)凍融裂解后，進一步提純這些血小板脫顆粒的商品；人源血小板裂解物除了擁有比富血小板血漿更高的生長因子濃度，更用特殊工藝去除了細胞碎片，大幅降低了使用過程中的免疫原性。

人源血小板裂解物的使用方式非常方便簡單，在培養(yǎng)基中添加5%血小板裂解物，混合均勻后即可直接用來培養(yǎng)間充質(zhì)干細胞，且在傳代過程中不需要預(yù)包被培養(yǎng)皿。適合應(yīng)用在多種來源的間充質(zhì)原代干細胞培養(yǎng)過程呦！ 血小板裂解液為什么要使用肝素？

MSCs是異質(zhì)性的細胞群，其組成可能受培養(yǎng)條件的影響。血小板裂解液中肝素及其濃度高低對細胞形態(tài)和生長模式并未有明顯的影響。通過免疫熒光顯微鏡分析未發(fā)現(xiàn)波形蛋白(一種通常在中胚層起源的細胞中表達的中間絲)和α-SMA表達的差異，肝素濃度對于α-SMA(綠色)和波形蛋白(紅色)的分布并無影響。脂肪組織源性間充質(zhì)干細胞（AT-MSC）和骨髓源性間充質(zhì)干細胞（BM-MSC）本身免疫表型就是相似的，經(jīng)添加不同濃度肝素的血小板裂解液培養(yǎng)擴增的AT-MSC和BM-MSC的流式細胞分析結(jié)果顯示出CD29、CD73、CD90和CD105表達，而表面標記CD14、CD31、CD34和CD45的缺失，可見肝素濃度對MSC免疫表型的表達水平幾乎是沒有影響的。血小板裂解液和胎牛血清相比有什么優(yōu)勢？無沉淀血小板裂解液保存溫度

血小板裂解液的制備方法是什么？FBS替代品血小板裂解液使用注意事項

由于在臨床中對血小板單元的需求而供體有限，因此使用新鮮的血小板單元來產(chǎn)生血小板裂解液引起了關(guān)注。過期的血小板單位可能是另一種來源，因為有證據(jù)表明可以使用從過期單位獲得的血小板而不會影響終產(chǎn)品的質(zhì)量。在一個擁有380萬居民的意大利地區(qū)，2014年生產(chǎn)了大約100,000個來自單一捐贈者的血沉棕黃層單位。其中約60％在有效期后被丟棄。考慮到50ml的平均血沉棕黃層體積，使用過期的血沉棕黃層單位可以生產(chǎn)約3000L的血小板裂解液。FBS替代品血小板裂解液使用注意事項

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