1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)withgDNAEraser是一種設(shè)計用于從RNA模板合成cDNA 鏈的試劑盒,它包含gDNAEraser以去除基因組DNA的污染,以及RNaseH-逆轉(zhuǎn)錄酶以減少RNA模板的降解。以下是該試劑盒的一些關(guān)鍵特點和應(yīng)用:1.**去除基因組DNA污染**:試劑盒中的gDNAEraser能有效去除RNA模板中的基因組DNA污染,確保后續(xù)實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。2.**RNaseH-逆轉(zhuǎn)錄酶**:該試劑盒使用的逆轉(zhuǎn)錄酶缺乏RNaseH活性,有助于保護(hù)RNA模板不被過早降解,從而可以合成更長的cDNA鏈。3.**高溫穩(wěn)定性**:逆轉(zhuǎn)錄酶經(jīng)過基因工程改造,具有較高的熱穩(wěn)定性,可以在高溫條件下(如50°C)進(jìn)行cDNA 鏈的合成,有助于打開RNA的二級結(jié)構(gòu)。4.**合成長鏈cDNA的能力**:能夠合成長達(dá)5kb甚至更長的cDNA片段,適合于需要合成全長或長片段cDNA的實驗。5.**包含所有必需組分**:試劑盒包含cDNA 鏈合成所需的所有試劑,如逆轉(zhuǎn)錄酶、RNase抑制劑、隨機(jī)引物、寡聚dT引物、dNTPs、緩沖液等。6.**適用于多種RNA模板**:可以用于從總RNA或mRNA模板合成cDNA 鏈,適用于實時熒光定量RT-qPCR、3'-和5'-RACE等實驗。畢赤酵母能夠進(jìn)行適當(dāng)?shù)牡鞍踪|(zhì)折疊和分泌,其內(nèi)源性分泌蛋白的產(chǎn)量有限,使得重組蛋白的純化過程相對簡單 。遼寧人膠原蛋白開發(fā)技術(shù)服務(wù)技術(shù)服務(wù)
這項技術(shù)服務(wù)在多個領(lǐng)域展現(xiàn)出了巨大的應(yīng)用潛力。在疫苗研發(fā)領(lǐng)域,VLP作為一種新型的疫苗候選物,具有良好的免疫原性,能夠誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)。江畢赤酵母表達(dá)的VLP疫苗可以針對多種病毒性疾病,為預(yù)防和控制傳染病提供了創(chuàng)新的解決方案。例如,在應(yīng)對一些新興病毒威脅時,VLP疫苗能夠快速啟動研發(fā)和生產(chǎn),為公眾健康提供及時的保護(hù)。此外,在生物醫(yī)學(xué)研究中,VLP還可以作為藥物載體或診斷試劑的重要組成部分,用于疾病的和檢測。遼寧重組蛋白表達(dá)服務(wù)技術(shù)服務(wù)臨床前研究此外,可以通過同源重組程序高效地插入線性化的外來 DNA,以產(chǎn)生穩(wěn)定的細(xì)胞系,同時可以輕松制備表達(dá)載體。
使用M-MLVUltraReverseTranscriptase(200U/μL)進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄時,通常需要以下緩沖液和其他組分:1.**反應(yīng)緩沖液**:通常提供的5XFirst-StrandBuffer,使用時需稀釋成1X工作濃度。例如,5XReverseTranscriptaseM-MLVBuffer的組成可能包含Tris-HCl(pH8.3)、KCl、MgCl2、DTT等。2.**dNTP混合物**:包含四種去氧核苷酸三磷酸(dATP、dCTP、dGTP、dTTP),通常為10mM的濃度,使用時稀釋至反應(yīng)所需的濃度(如0.5-1mM)。3.**引物**:可以是Oligo(dT)引物、隨機(jī)六聚體引物(RandomPrimers)或基因特異性引物(GeneSpecificPrimers),用于與RNA模板退火并啟動cDNA合成。4.**RNA模板**:可以是總RNA或mRNA,根據(jù)實驗需求確定使用量,一般為10pg至5μg。5.**RNase抑制劑**:如RNaseInhibitor(40U/μl),用于防止RNA模板被RNase酶降解。6.**水**:RNase-free的水,確保反應(yīng)體系中沒有核酸酶污染。7.**逆轉(zhuǎn)錄酶**:M-MLVUltraReverseTranscriptase(200U/μL),通常在反應(yīng)中加入,使用量根據(jù)模板RNA的量和酶的活性單位來確定。
終得到的高純度VLPs具有良好的穩(wěn)定性和免疫原性。這種技術(shù)服務(wù)在多個領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。在疫苗研發(fā)方面,VLPs可以模擬病毒的天然結(jié)構(gòu),激發(fā)人體的免疫反應(yīng),產(chǎn)生有效的免疫保護(hù),為預(yù)防各種傳染病提供了新的途徑。例如,針對某些病毒性疾病,通過大腸桿菌表達(dá)的病毒樣顆粒疫苗能夠誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體,增強(qiáng)人體對病毒的抵抗力。在生物醫(yī)學(xué)研究中,VLPs還可以作為載體,用于運(yùn)載藥物、基因等生物活性分子,實現(xiàn)精細(xì)的疾病和診斷。重組膠原蛋?產(chǎn)品中的主要雜質(zhì)包括殘留的外源DNA、宿主細(xì)胞蛋?及肽聚糖、細(xì)菌內(nèi)的毒物質(zhì)等。
ProbeOne-StepqRT-PCRKit是一種一步法反轉(zhuǎn)錄實時熒光定量PCR(qRT-PCR)的預(yù)混液,主要用于RNA的特異性超高靈敏度定量檢測。以下是它的一些主要特點:1.**一步法操作**:該試劑盒整合了反轉(zhuǎn)錄和PCR步驟,簡化了操作流程,減少了操作時間,并限度地減少了人為誤差和污染風(fēng)險。2.**高靈敏度檢測**:能夠檢測低至10個拷貝的目標(biāo)序列,適合于低豐度RNA的檢測。3.**多重檢測能力**:可以在單個反應(yīng)孔中進(jìn)行多重檢測,不同基因?qū)?yīng)不同探針,不同探針對應(yīng)不同熒光標(biāo)記,進(jìn)行多重?zé)晒舛縋CR檢測。4.**高特異性**:通過使用TaqMan探針,該試劑盒提供了高特異性的檢測,可以區(qū)分有單個核苷酸差異的miRNA。5.**熱啟動酶**:使用的BeyoFast?TaqDNAPolymerase是一種與抗體結(jié)合的熱啟動酶,有效避免非特異性擴(kuò)增,提高PCR反應(yīng)的特異性、靈敏度和定量檢測的準(zhǔn)確性。6.**兼容多種熒光定量PCR儀**:提供了LowROX和HighROX,兼容于無需ROX和需要LowROX或HighROX作為校正染料的熒光定量PCR儀。根據(jù)目標(biāo)蛋白的特性,選擇合適的表達(dá)系統(tǒng),如原核(如大腸桿菌)、真核(如酵母、)或無細(xì)胞系統(tǒng)。遼寧類人源膠原蛋白技術(shù)服務(wù)臨床前研究
使用如高效液相色譜(HPLC)、毛細(xì)管電泳(CE-SDS)、質(zhì)譜等技術(shù),評估蛋白的純度和均一性。遼寧人膠原蛋白開發(fā)技術(shù)服務(wù)技術(shù)服務(wù)
M-MLVAdvanceFastReverseTranscriptase(200U/μL)是一種高效的逆轉(zhuǎn)錄酶,用于將RNA模板轉(zhuǎn)換成cDNA。這種酶是從MoloneyMurineLeukemiaVirus(M-MLV)衍生而來,經(jīng)過基因工程改造,以提高其熱穩(wěn)定性和合成效率。以下是該產(chǎn)品的一些關(guān)鍵特點和應(yīng)用:1.**高濃度**:提供200U/μL的高濃度,便于進(jìn)行各種規(guī)模的實驗。2.**熱穩(wěn)定性**:該酶具有較高的熱穩(wěn)定性,可以在高達(dá)55°C的溫度下進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng),這有助于打開RNA的二級結(jié)構(gòu),提高長鏈cDNA的合成效率。3.**低RNaseH活性**:與野生型M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶相比,這種酶的RNaseH活性較低,有助于保護(hù)RNA模板不被降解,從而提高長鏈cDNA的合成。4.**合成長鏈cDNA的能力**:能夠合成長達(dá)7kb的cDNA,適合于需要合成長片段cDNA的實驗。5.**適用于多種RNA模板**:可以用于從總RNA或mRNA模板合成cDNA鏈,適用于實時熒光定量RT-PCR、3'-和5'-RACE等實驗。6.**儲存條件**:建議在-20°C下保存,以保持酶的活性和穩(wěn)定性。7.**使用方便**:通常,該酶會與5XFirst-StrandBuffer、0.1MDTT等組分一起提供,方便用戶進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。8.**產(chǎn)品規(guī)格**:提供不同規(guī)格的產(chǎn)品,以滿足不同實驗規(guī)模的需求。遼寧人膠原蛋白開發(fā)技術(shù)服務(wù)技術(shù)服務(wù)