Recombinant Human Neurturin

來源: 發(fā)布時間:2024-07-18

重組酶是一類能夠促進(jìn)DNA分子之間同源或非同源序列的重組的酶。它們在分子生物學(xué)、遺傳工程和細(xì)胞生物學(xué)中扮演著重要角色。重組酶的作用機(jī)制通常涉及識別特定的DNA序列,催化DNA鏈的斷裂和重新連接,從而實現(xiàn)遺傳物質(zhì)的重組。重組酶的主要類型和功能包括:1.限制性內(nèi)切酶**(RestrictionEnzymes):這些酶可以識別特定的DNA序列并在這些序列處切割DNA鏈。它們是基因工程中常用的工具,用于DNA片段的精確切割和克隆。2.連接酶(Ligases):連接酶可以將兩個DNA片段連接在一起,形成穩(wěn)定的DNA分子。在DNA克隆和修復(fù)過程中,連接酶用于封閉切割位點產(chǎn)生的缺口。3.整合酶(Integrases):整合酶能夠?qū)⒁欢蜠NA序列插入到宿主基因組的特定位置。它們在基因和遺傳工程中具有應(yīng)用。4.轉(zhuǎn)座酶(Transposase):轉(zhuǎn)座酶可以催化DNA片段從一個位置移動到另一個位置,這種機(jī)制在基因組中存在,并且在遺傳多樣性和進(jìn)化中起著作用。5.**重組酶**(Recombinases):如RecA蛋白和Rad51蛋白,它們在同源重組中發(fā)揮作用,促進(jìn)DNA雙鏈斷裂的修復(fù)和遺傳物質(zhì)的重組。6.DNA聚合酶:這類酶在DNA復(fù)制和修復(fù)中添加新的核苷酸,以現(xiàn)有DNA鏈為模板合成新的DNA鏈。

FnCas12a產(chǎn)品不含DNA內(nèi)切酶和外切酶,也不含RNA酶,保證了實驗的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。Recombinant Human Neurturin

Recombinant Human Neurturin,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)是一種用于合成互補(bǔ)DNA(cDNA)的試劑盒,它通過逆轉(zhuǎn)錄過程從信使RNA(mRNA)或總RNA模板合成cDNA的鏈。這類試劑盒通常包含逆轉(zhuǎn)錄酶(ReverseTranscriptase,RT)和其他必要的組分,以確保高效和準(zhǔn)確的cDNA合成。RNaseH-表示該試劑盒使用的逆轉(zhuǎn)錄酶缺乏RNaseH活性,這意味著在合成cDNA鏈的過程中不會發(fā)生RNA的降解,從而可以產(chǎn)生更高產(chǎn)量的全長cDNA,特別是從較長的模板(可達(dá)13kb)。該試劑盒通常包括以下組分:-逆轉(zhuǎn)錄酶,如RevertAidHMinusM-MuLVReverseTranscriptase,它通過點突變完全消除了RNaseH活性。-RiboLockRNaseInhibitor,這是一種重組蛋白,可有效保護(hù)RNA在高達(dá)55°C的溫度下不受RNases的降解。-緩沖液、dNTPs(去氧核苷酸三磷酸)和其他輔助成分,以支持cDNA合成反應(yīng)。-有時還包括用于去除RNA樣品中污染的基因組DNA的DNaseI。合成的cDNA可以作為PCR或?qū)崟rPCR的模板直接使用,也適用于第二鏈cDNA合成或線性RNA放大。此外,可以在cDNA合成過程中加入放射性或非放射性標(biāo)記的核苷酸,以便在包括微陣列在內(nèi)的雜交實驗中作為探針使用。Recombinant Mouse CD5L Protein,His TagGPCR家族是一類存在于生物體中的跨膜蛋白,它們可以識別并與外界分子相互作用,引發(fā)各種細(xì)胞內(nèi)信號。

Recombinant Human Neurturin,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

BloodDirectPCRMasterMix(2×)適合血液樣本的PCR擴(kuò)增主要通過以下幾個方面:1.**抗血液抑制劑能力**:該預(yù)混合溶液含有的DNA聚合酶和其他成分能夠抵抗血液樣本中的PCR抑制劑,如膽酸鹽、血紅素、蛋白質(zhì)等。2.**優(yōu)化的緩沖體系**:預(yù)混合溶液中的緩沖體系經(jīng)過特別優(yōu)化,以適應(yīng)血液樣本中的特定條件,包括pH、離子強(qiáng)度和Mg2+濃度,從而提高PCR擴(kuò)增的效率和特異性。3.**高保真DNA聚合酶**:包含的DNA聚合酶具有高保真度,能夠在復(fù)制DNA時減少錯誤,保證擴(kuò)增結(jié)果的準(zhǔn)確性。4.**快速擴(kuò)增速度**:一些BloodDirectPCRMasterMix產(chǎn)品具有快速擴(kuò)增的特點,可以縮短PCR實驗的時間。5.**寬泛的GC含量適應(yīng)性**:該產(chǎn)品可以用于擴(kuò)增不同GC含量的基因,包括高GC和低GC區(qū)域,提高了PCR的適用性。6.**直接使用血液樣本**:無需對血液樣本進(jìn)行DNA提取或純化,可以直接將抗凝血樣品或干血斑樣品加入PCR反應(yīng)中。7.**兼容性**:兼容多種抗凝劑,如EDTA、肝素或檸檬酸鈉,適用于不同來源的血液樣本。8.**簡化的操作流程**:由于省去了DNA提取的步驟,BloodDirectPCRMasterMix簡化了實驗操作流程,減少了實驗時間和潛在的污染風(fēng)險。

T4UvsX重組酶是一種來源于T4噬菌體的酶,它是RecA/Rad51家族的同源體。這種重組酶在雙鏈DNA斷裂的修復(fù)和復(fù)制叉重新啟動的過程中起到重要作用。T4UvsX重組酶可以通過與其他DNA結(jié)合蛋白或輔助因子一起與單鏈DNA形成核酸蛋白復(fù)合物,并通過尋找與靶標(biāo)DNA的互補(bǔ)區(qū)域進(jìn)行雜交,以完成鏈置換反應(yīng)。此外,T4UvsX重組酶在生產(chǎn)時由大腸桿菌表達(dá)和純化。T4UvsX重組酶的產(chǎn)生過程涉及到基因工程和蛋白質(zhì)表達(dá)的常規(guī)技術(shù)。首先,T4噬菌體的基因序列被識別并克隆到適合的表達(dá)載體中,然后這個載體被轉(zhuǎn)化到大腸桿菌宿主細(xì)胞中。在宿主細(xì)胞內(nèi),T4UvsX基因被轉(zhuǎn)錄和翻譯,產(chǎn)生重組酶蛋白。隨后,通過一系列步驟包括細(xì)胞培養(yǎng)、蛋白質(zhì)表達(dá)、細(xì)胞裂解、蛋白質(zhì)純化等,獲得所需的T4UvsX重組酶。這一過程通常在生物技術(shù)實驗室中進(jìn)行,并且需要精確的分子生物學(xué)操作和蛋白質(zhì)工程知識。

FnCas12a的雙鏈或單鏈DNA靶標(biāo)都能激發(fā)其反式剪切活性,即在形成三元復(fù)合物后,針對非特異序列ssDNA的剪切。

Recombinant Human Neurturin,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

染料預(yù)混合的PCRMasterMix是一種特殊的PCR反應(yīng)液,它在配方中已經(jīng)預(yù)先加入了適合電泳分析的染料。這種設(shè)計使得PCR擴(kuò)增后的產(chǎn)物可以直接用于凝膠電泳,無需額外添加上樣緩沖液,從而簡化了操作流程并減少了實驗時間。以下是一些關(guān)于染料預(yù)混合PCRMasterMix的特點:1.**方便性**:由于省去了擴(kuò)增后添加上樣緩沖液的步驟,使得PCR到電泳的過渡更為簡便快捷。2.**一致性**:預(yù)混合的染料確保了每次PCR實驗中使用的染料濃度一致,有助于提高實驗結(jié)果的可重復(fù)性。3.**可視化**:一些染料預(yù)混合PCRMasterMix使用的染料在紫外光下具有明顯的熒光或顏色變化,有助于在電泳過程中實時監(jiān)控DNA條帶的形成。4.**兼容性**:預(yù)混合的染料通常與各種類型的PCR儀器和電泳設(shè)備兼容。5.**穩(wěn)定性**:預(yù)混合的染料在MasterMix中保持穩(wěn)定,直到使用時才與DNA樣本接觸,減少了染料降解或失效的風(fēng)險。6.**靈敏度**:某些染料具有較高的靈敏度,可以檢測到極少量的DNA,有助于提高PCR檢測的靈敏度。7.**安全性**:預(yù)混合的染料減少了操作過程中的接觸次數(shù),降低了樣品交叉污染的風(fēng)險。

酵母重組表達(dá)N-糖苷酶F(PNGase F)是一種通過酵母重組表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)的酶。Recombinant Mouse LRG1 Protein,His Tag

在一項研究中,比較了具有不同NLS融合的Cas9蛋白和Cas9 mRNA在斑馬魚基因組編輯中的效率。Recombinant Human Neurturin

pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是通過將ProteinA與Tn5轉(zhuǎn)座酶進(jìn)行融合來構(gòu)建的。ProteinA是一種來源于金黃色葡萄球菌的蛋白質(zhì),它具有高親和力結(jié)合大多數(shù)哺乳動物IgG抗體的Fc片段的能力。Tn5轉(zhuǎn)座酶是一種能夠識別特定DNA序列并在基因組上進(jìn)行“剪切-粘貼”或“復(fù)制-粘貼”的酶。融合ProteinA的目的是為了在實驗中實現(xiàn)對特定蛋白質(zhì)的靶向。下面是pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶融合的一般步驟:1.**基因克隆**:首先,將Tn5轉(zhuǎn)座酶的基因和ProteinA的基因克隆到一個表達(dá)載體中。這通常涉及到分子克隆技術(shù),如PCR擴(kuò)增、限制性內(nèi)切酶消化和連接酶連接。2.**融合蛋白設(shè)計**:設(shè)計一個融合蛋白,其中ProteinA的基因序列和Tn5轉(zhuǎn)座酶的基因序列通過一個短的連接肽(LinkerPeptide)相連。這個連接肽通常包含幾個氨基酸殘基,以確保兩個蛋白部分在融合后仍能保持各自的構(gòu)象和功能。3.**表達(dá)載體構(gòu)建**:將融合基因插入到適合的表達(dá)載體中,這個載體應(yīng)該包含適當(dāng)?shù)膯幼印?biāo)記基因(如抗性基因)和終止子,以確保融合蛋白在宿主細(xì)胞中得到高效表達(dá)。4.**宿主細(xì)胞表達(dá)**:將構(gòu)建好的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化到宿主細(xì)胞(如大腸桿菌)中,通過誘導(dǎo)表達(dá)融合蛋白。Recombinant Human Neurturin