中國(guó)香港MEM a培養(yǎng)基常用知識(shí)

    參與細(xì)胞的代謝活動(dòng)。此外，通過(guò)提供鈉，K+和Ca2+，幫助細(xì)胞調(diào)節(jié)細(xì)胞膜功能。Na+是細(xì)胞外液中**主要的陽(yáng)離子，對(duì)維持滲透壓的恒定有決定性的作用，還與Cl－共同參與生物電活動(dòng)、維持水平衡和酸堿平衡等。K+主要分布在細(xì)胞內(nèi)液，對(duì)于***某些酶是必需的，并在調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的酸堿平衡上也有極重要意義。Ca2+和Mg2+主要參與信號(hào)傳導(dǎo)、能量代謝、脂肪酸合成、核糖體穩(wěn)定和蛋白質(zhì)合成等多種生理作用。PO43－、SO42－、HCO3－是基質(zhì)所需陰離子，同時(shí)是細(xì)胞內(nèi)電荷的調(diào)節(jié)者。磷對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝和調(diào)控都有重要的作用，含磷的化合物如核酸、磷脂、蛋白質(zhì)是構(gòu)成細(xì)胞的主要成分，ATP、ADP是能量生成、存儲(chǔ)和利用的不可或缺的化合物。上述離子對(duì)于細(xì)胞的作用各有不同，它們共同構(gòu)成了細(xì)胞賴以生存的滲透壓、pH和電化學(xué)平衡的微環(huán)境，細(xì)胞對(duì)于某種元素的吸收利用會(huì)受到其它元素的干擾，例如培養(yǎng)基中過(guò)高的鈣離子濃度會(huì)使鎂和鋅的吸收利用受到干擾。因此，在保證培養(yǎng)基中上述離子濃度滿足要求以外，還需保證上述離子之間種類和比例的平衡。此外，微量元素如鐵、鈷、鎳、硒、碘、銅、鋅、錳、鉻、鉬、氟等對(duì)于細(xì)胞生長(zhǎng)代謝和產(chǎn)物合成都有促進(jìn)作用。DMEM培養(yǎng)基提供了細(xì)胞生長(zhǎng)所需的基本營(yíng)養(yǎng)成分。中國(guó)香港MEM a培養(yǎng)基常用知識(shí)

    如何正確地使用培養(yǎng)基及**大程度地保持培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)，對(duì)每個(gè)培養(yǎng)者都很重要。培養(yǎng)基的使用依不同的培養(yǎng)基種類、培養(yǎng)方式、細(xì)胞種類的不同而存在差異。細(xì)胞培養(yǎng)液的構(gòu)成細(xì)胞培養(yǎng)液指細(xì)胞生長(zhǎng)的液體環(huán)境，一般指完全培養(yǎng)液，添加了血清、水解乳蛋白、各種添加劑等可以直接使用的培養(yǎng)液。細(xì)胞培養(yǎng)基&血清模式血清對(duì)于在傳統(tǒng)培養(yǎng)基配方中生長(zhǎng)和增殖的大多數(shù)細(xì)胞系來(lái)說(shuō)是需要的，因?yàn)榇蠖鄶?shù)單獨(dú)的培養(yǎng)基并不能提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的全部營(yíng)養(yǎng)，如MEM培養(yǎng)基，較為常用的量為5％～10％的比例，而特殊的低血清培養(yǎng)基血清量可降至3％左右，細(xì)胞的形態(tài)和功能不受影響。細(xì)胞培養(yǎng)基&乳歐液模式化學(xué)合成培養(yǎng)基現(xiàn)雖已大規(guī)模使用，但在某些培養(yǎng)領(lǐng)域水解乳蛋白仍在使用，以補(bǔ)充培養(yǎng)液中缺乏的氨基酸、小肽物質(zhì)。較為常用的方式是用漢氏（Hanks’BSS）或歐式(Earle’sBSS)平衡液溶解水解乳蛋白（一般為5‰濃度），即成乳漢（歐）液，再與化學(xué)合成培養(yǎng)基（一般為MEM）按比例混合使用（如1：1）。細(xì)胞培養(yǎng)基&各類添加劑（生長(zhǎng)因子等）模式成分復(fù)雜的培養(yǎng)基還含有許多化合物，包括蛋白質(zhì)、多肽、核苷、檸檬酸循環(huán)的中間產(chǎn)物、**酸及脂類等。培養(yǎng)基供應(yīng)商使用減血清培養(yǎng)基能減少實(shí)驗(yàn)的變異性。

    維持15-20分鐘，可殺滅所有的繁殖體和芽胞。本法適用于耐高溫、耐濕物品的**，如普通培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)敷料等。（二）下向主要介紹高壓蒸氣**器**效果的驗(yàn)證方法高壓蒸氣**器使物品**后達(dá)到無(wú)菌要求，這是**實(shí)驗(yàn)中的基本保證。高壓**器**效果是否合格足實(shí)驗(yàn)成敗的**基礎(chǔ)**關(guān)鍵的首要步驟。除少數(shù)培養(yǎng)基只需加熱溶解，不需高壓**外，大部分培養(yǎng)基均需121℃高壓**15-30分鐘。尤其是對(duì)無(wú)菌試驗(yàn)培養(yǎng)基**不徹底，直接關(guān)系到對(duì)**的無(wú)菌試驗(yàn)結(jié)果。因此必須認(rèn)真對(duì)高壓**器進(jìn)行**效果的驗(yàn)證。為此我們提供了進(jìn)行**效果驗(yàn)證的一個(gè)簡(jiǎn)易可行的方法。1．試驗(yàn)材料(1)嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片。嗜熱脂肪芽胞桿菌(Bacillusstearothermophilus)ATCC7053是本法常用的生物指示菌，含芽胞量5-lO5CFU/片。(2)121℃壓力蒸氣**化學(xué)指示卡。(3)溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基116℃高壓**20分鐘后備用。(4)O—150℃留點(diǎn)溫度計(jì)。2．方法與結(jié)果將嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片（以下簡(jiǎn)稱菌片）用無(wú)菌鑷子放人密封試管中?；瘜W(xué)指示卡和留點(diǎn)溫度計(jì)放入敞口試管中。以上兩種試管各準(zhǔn)備5-10份。分別放置在高壓**器蒸氣口處、底部排氣口處及底部出水口處或上下左右中間5處。如**器為二層，則需放10處。

    器）10升-120升Systec產(chǎn)品型號(hào)MediaPrep-10MediaPrep-20MediaPrep-30MediaPrep-45MediaPrep-65Medi品牌：Systec型號(hào)：Systec參考報(bào)價(jià)：面議轉(zhuǎn)1452全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀全自動(dòng)批量制備和分裝培養(yǎng)基系統(tǒng)儀器簡(jiǎn)介我公司自主研發(fā)的培養(yǎng)基制備儀采用**的攪拌技術(shù)，設(shè)定了消毒、加熱、攪拌和制冷等步驟一體化程序，只需要再控制面板上進(jìn)行簡(jiǎn)單的參數(shù)設(shè)定即可完成。根據(jù)真空高壓下會(huì)增加水蒸氣的沸點(diǎn)原理，采用品牌：恒奧型號(hào)：HMP-01參考報(bào)價(jià)：面議轉(zhuǎn)0510【分享】ISO/TS11133-1:2000食品和動(dòng)物飼料微生物學(xué)－培養(yǎng)基制備指南－實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備質(zhì)量保證通則ISO/TS11133-1:2000食品和動(dòng)物飼料微生物學(xué)－培養(yǎng)基制備指南－實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備質(zhì)量保證通則ISO/TS11133-1:2000Microbiologyoffoodandanimalfeed品牌：安捷倫型號(hào)：1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià)：20萬(wàn)-50萬(wàn)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備質(zhì)量保證通則（中文和英文版）實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備質(zhì)量保證通則。MEM培養(yǎng)基含有多種必需的營(yíng)養(yǎng)成分和礦物質(zhì)。

    此法由巴斯德創(chuàng)立，用于酒類消毒而得名。目前用于牛乳消毒。方法有兩種：一種為℃加熱15秒，另一種為63-66℃加熱30分鐘。大多采用第一種方法。(2)煮沸法。在1個(gè)大氣壓下，水煮沸后溫度達(dá)100℃，煮沸5分鐘后可殺死一般**繁殖體。如于水中加入2%碳酸鈉，可將其沸點(diǎn)提高至105℃，既可促進(jìn)芽胞的殺滅，又可防止金屬器皿生銹。(3)流通蒸氣消毒法。又稱常壓蒸氣消毒法，常用附諾(Amold)流通蒸氣**器，利用1個(gè)大氣壓下100℃水蒸氣進(jìn)行消毒，10-30分鐘后**繁殖體被殺死，但對(duì)芽孢作用不大。(4)間歇**法（fractionalsterilization）。采用間歇方式達(dá)到**目的。將**物品置于阿諾流通蒸氣**器內(nèi)，100℃加熱15-30分鐘，每日1次，連續(xù)3次。每次**后取出物品置37℃孵育箱過(guò)夜，致殘存的芽胞發(fā)育成繁殖體，次日再通過(guò)流通蒸氣**器加熱而被殺滅。如此反復(fù)，既可殺滅芽胞，又可使不耐高溫的物質(zhì)免受影響。若某些物質(zhì)不耐100攝氏度，則可將溫度下降至75-80℃，每次加熱時(shí)間延長(zhǎng)到30-60分鐘，常用血清凝固器對(duì)呂氏血清培養(yǎng)基和L-J培養(yǎng)基的**屬此方法。(5)高壓蒸氣火菌法。利用密閉的耐高壓蒸氣**器(autoclave)，在蒸氣不外溢的條件下，使鍋內(nèi)壓力增高，隨之蒸氣溫度也增高。通常在℃。無(wú)血清培養(yǎng)基適合于無(wú)血清環(huán)境的細(xì)胞培養(yǎng)。河南培養(yǎng)基價(jià)目表

使用減血清培養(yǎng)基能提高實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性。中國(guó)香港MEM a培養(yǎng)基常用知識(shí)

    一般情況下應(yīng)調(diào)pH比所需值低～，因過(guò)濾**后，pH值會(huì)升高約。8）在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，建議不加或加少量的***，如血清的濃度較低則所加***的量也要相應(yīng)降低一些。9）建議用1NHCl或1NNaOH來(lái)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，因?yàn)橛锰妓釟溻c來(lái)調(diào)對(duì)培養(yǎng)液的滲透壓影響比較大。如下圖所示：圖6-1MEM培養(yǎng)基（SLM，MD611）在pH值相同情況下所加的碳酸氫鈉、氫氧化鈉的量及所對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)液滲透壓圖6-2199培養(yǎng)基（MD502）在pH值相同情況下所加的碳酸氫鈉、氫氧化鈉的量及所對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)液滲透壓培養(yǎng)基**培養(yǎng)基的**方法主要有兩種，高壓**及um微孔濾膜過(guò)濾**。與過(guò)濾相比，高壓**的工作強(qiáng)度小，相對(duì)便宜，失敗率低，但易造成營(yíng)養(yǎng)成分的流失。高壓**某些培養(yǎng)基（如MEM）可進(jìn)行高壓**，例如清大天一的MEM培養(yǎng)基中的MD605、MD609等。其中不含有L-谷氨酰胺和碳酸氫鈉，可在高壓**后加入。另外可高壓的谷氨酸鹽（如L-丙氨酰-L-谷氨酰胺）可代替L-谷氨酰胺。為保證高壓**的效果，**設(shè)備的驗(yàn)證很關(guān)鍵，可高壓**的培養(yǎng)基在121℃、15psi，15分鐘的條件下完全可達(dá)到**效果及營(yíng)養(yǎng)成分的**小損失，因此不需將**時(shí)間延長(zhǎng)。過(guò)濾**大多數(shù)培養(yǎng)基采用～μm孔徑的微孔濾膜進(jìn)行過(guò)濾**，并且已成為培養(yǎng)基**的發(fā)展方向。中國(guó)香港MEM a培養(yǎng)基常用知識(shí)