斑馬魚轉(zhuǎn)基因品系制備服務(wù)簡介1.轉(zhuǎn)基因斑馬魚轉(zhuǎn)基因技術(shù)包括顯微注射、電穿孔技術(shù)(電脈沖介導(dǎo))、精子載體法、GAL4/UAS轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)、Tol2轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)、擬型反轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)、重組桿狀病毒介導(dǎo)等方法。2.轉(zhuǎn)基因技術(shù)目的2.1通過定點敲除技術(shù)進行基因鑒定和功能研究;2.2利用報告基因?qū)κ荏w等蛋白質(zhì)進行功能研究;2.3構(gòu)建各種斑馬魚突變體,通過斑馬魚疾病模型進行人類疾病研究和藥物篩選;2.4構(gòu)建含有特異性啟動子的生物感應(yīng)器,用于環(huán)境監(jiān)測。3.Tol2轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因技術(shù)優(yōu)點3.1Tol2轉(zhuǎn)座子可攜帶大片段DNA;3.2Tol2轉(zhuǎn)座子沒有位置偏好性,幾乎能整合到染色體的任意位置;3.3Tol2轉(zhuǎn)座子的耐受范圍很廣;3.4Tol2作為天然的具有自主轉(zhuǎn)座活性的脊椎動物轉(zhuǎn)座子,能夠在胚胎發(fā)育的不同時期進行有效的轉(zhuǎn)移;3.5Tol2轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因技術(shù)能夠有效克服外源基因在后代傳遞頻率低的技術(shù)難題。服務(wù)流程▲客戶提出轉(zhuǎn)基因品系制備需求→▲分析可行性→▲構(gòu)建載體→▲斑馬魚胚胎注射→▲founder篩選→▲F1代斑馬魚養(yǎng)殖→▲F2代斑馬魚養(yǎng)殖環(huán)特生物優(yōu)勢1.特有的養(yǎng)殖方法可縮短服務(wù)周期;2.豐富的經(jīng)驗和及時溝通助力科研實驗。利用斑馬魚實驗成效點評。斑馬魚行為分析系統(tǒng)中標(biāo)
測驗斑馬魚的行為和認(rèn)知才能:在多孔板試驗中,能夠測驗斑馬魚在多孔板試驗中,能夠測驗斑馬魚的行為和認(rèn)知才能,經(jīng)過記載它們的行為和反應(yīng)來評價其學(xué)習(xí)和回憶才能,以及對環(huán)境的感知才能。例如,能夠記載斑馬魚幼魚經(jīng)過多孔板的時刻、路徑、錯誤次數(shù)和成功率等數(shù)據(jù)。這些數(shù)據(jù)能夠用來評價幼魚對迷宮的回憶才能和學(xué)習(xí)才能。經(jīng)過屢次試驗,還能夠評價幼魚的長期學(xué)習(xí)和回憶才能。一起,能夠在多孔板的不同方位放置食物,以測驗斑馬魚對環(huán)境的感知才能。此外,多孔板試驗還可以用于評價斑馬魚的心情和行為反響。例如,在試驗中加入一些壓力因素,例如模擬掠食者等,以測驗斑馬魚的心情和應(yīng)激反響。這些數(shù)據(jù)可以用來研究斑馬魚的神經(jīng)生物學(xué)和行為??偟膩碚f,多孔板試驗是一種有效的辦法,可用于測驗斑馬魚幼魚的行為和認(rèn)知能力。它可以用于研究斑馬魚的學(xué)習(xí)、記憶、感知和心情等方面,為研究斑馬魚的神經(jīng)生物學(xué)和行為供給了一個有用的工具。斑馬魚行為分析系統(tǒng)中標(biāo)斑馬魚用來做什么試驗?
斑馬魚作為免疫學(xué)新模式生物的優(yōu)點在于:(1)與傳統(tǒng)的免疫學(xué)模式生物——小鼠相比,斑馬魚有體型小,子代數(shù)量多,培育要求低,易于養(yǎng)殖,飼養(yǎng)成本低,便于開展大規(guī)模研究。(2)斑馬魚個體發(fā)育過程是在全透明狀態(tài)下完成,使得整個心血管系統(tǒng)的發(fā)育過程能十分完整的被觀察。特別是免疫系統(tǒng)個體發(fā)育的相關(guān)資料,是無法從小鼠上所進行的實驗中輕易獲得的。(3)先期對斑馬魚的遺傳學(xué)研究積累的豐富突變庫也為研究免疫相關(guān)基因的功能提供了條件。(4)在已知生物中,魚類是**早具備獲得性免疫系統(tǒng)的綱。
身體透明,斑馬魚在發(fā)育的前7天身體透明,可直接觀察內(nèi)部***。結(jié)合***染料、抗體、核酸探針等方法能夠觀察自由活動的或者固定后的斑馬魚***樣本,這種直接的觀察為自動化藥物篩選和藥物靶***鑒別奠定了堅實有利的基礎(chǔ)。斑馬魚和人類的疾病信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路高度保守。斑馬魚體內(nèi)存在的人類同源基因比例高達87%,某些疾病相關(guān)基因與人類基因保守性高達99%,這意味著在其身上做藥物實驗所得到的結(jié)果在多數(shù)情況下也適用于人體。在已知生物中,魚類是**早具備獲得性免疫系統(tǒng)的綱。這就使得對斑馬魚免疫系統(tǒng)的研究成為人們了解非特異性免疫系統(tǒng)和獲得性免疫系統(tǒng)進化與功能相互關(guān)系的重要工具。這個獨特的免疫系統(tǒng)進化地位還賦予了斑馬魚作為免疫學(xué)研究模式生物的另一重要優(yōu)勢,即其成體可以在沒有胸腺、淋巴細(xì)胞生成的情況下存活傳代。新生斑馬魚為何具備數(shù)學(xué)能力?
報告基因選用GFP或RFP,**小啟動子來自斑馬魚gata2基因;將上述載體與體外轉(zhuǎn)錄得到的Tol2轉(zhuǎn)座酶的mRNA共同注射到斑馬魚的單細(xì)胞受精卵中,受精卵長大后成為founder;Founder外交(out-cross)得到F1代胚胎,從中挑選出對于報告基因具有組織特異性表達模式的胚胎,拍照記錄后分類培養(yǎng);F1長大后通過linker-mediatedPCR的方法鑒定對應(yīng)于GFP(或RFP)表達圖式的Tol2插入位點,并通過與已知基因組數(shù)據(jù)比較,對插入位點進行定位與分析;通過外交純化得到轉(zhuǎn)基因魚,直至得到只含有單個插入品系的轉(zhuǎn)基因魚。斑馬魚因其高度的基因保守性和獨特的轉(zhuǎn)錄學(xué)特性,在腦科學(xué)研究中具有不可替代的地位。斑馬魚房設(shè)計報價
斑馬魚在藥理學(xué)毒理學(xué)的應(yīng)用。斑馬魚行為分析系統(tǒng)中標(biāo)
空間學(xué)習(xí)與回憶空間學(xué)習(xí)回憶是外顯回憶的一種長時間存儲方式。和哺乳動物相同,越來越多的證據(jù)表明硬骨魚也具有學(xué)習(xí)和回憶的特性和神經(jīng)基礎(chǔ)。利用隱藏的的學(xué)習(xí)設(shè)備對魚類的空間學(xué)習(xí)和回憶才能進行了點評和測試。該儀器與以前報道所描繪的相同,由發(fā)動室、獎賞室和連接這兩個室的兩個隧道組成。在練習(xí)或測試中,迷宮被注入10厘米深的水,水的溫度與實驗水箱的溫度相同。兩周的學(xué)習(xí)練習(xí)和回憶評價基本上是像其他地方描繪的那樣進行的。空間學(xué)習(xí)練習(xí)從露出前7天開端,露出后7天完畢。每天進行一次練習(xí),每組10條魚放入發(fā)動室,30秒后開釋這些魚,在迷宮中探索30分鐘(左面或右邊的通道都是翻開的)。回憶評價為10分鐘(每組一個)。在本研討中,我們計算了獎賞室中魚的總數(shù)和魚在不同片段中所花費的時間。斑馬魚行為分析系統(tǒng)中標(biāo)