藥物研究實(shí)驗(yàn)方案

曾經(jīng)，很有效果的藥物是從植物或動(dòng)物中提取的某些物質(zhì)。草藥學(xué)是一門(mén)研究植物藥用價(jià)值的科學(xué)，早在5000多年前就被中國(guó)所認(rèn)識(shí)，如今在世界的許多地方盛行。幾乎所有當(dāng)前使用的藥物都是在實(shí)驗(yàn)室研發(fā)，然后經(jīng)過(guò)各種化學(xué)合成過(guò)程加工而成的。大約有1／4的藥物來(lái)自植物或者其他的生物。大部分藥物是化學(xué)合成的類(lèi)似物，但仍有一些藥物是用天然原料提取而成的。例如，阿片類(lèi)藥物，許多藥物和一些愈療重大疾病類(lèi)藥物仍然是自然產(chǎn)生的。植物來(lái)源的藥物與草藥的主要區(qū)別在于這些藥物已經(jīng)經(jīng)過(guò)徹底檢驗(yàn)證實(shí)它們是有效的且是安全的。利用斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)軟骨修復(fù)功效。藥物研究實(shí)驗(yàn)方案

細(xì)胞色素P450酶是許多同工酶組成的超大家族，主要位于肝臟微粒體中，參與生物體許多內(nèi)源性和外源性物質(zhì)的生物轉(zhuǎn)化。許多臨床相關(guān)藥物間的相互作用與抑制和/或誘導(dǎo)CYP酶有關(guān)，改變CYP酶的活性對(duì)藥效有重要影響，有時(shí)甚至?xí){生命。在眾多肝臟細(xì)胞色素P450酶家族中，CYP3A4和CYP2D6與70%以上的藥物代謝有關(guān)，其中CYP3A4占50%以上，而CYP2D6占20%左右，因此目前藥物代謝研究集中于評(píng)價(jià)藥物對(duì)CYP3A4和CYP2D6的影響。我們?cè)u(píng)價(jià)斑馬魚(yú)對(duì)細(xì)胞色素P450的影響作用有2個(gè)指標(biāo)：1.對(duì)CYP3A4的影響作用；2.對(duì)CYP2D6的影響作用。藥品安全性評(píng)價(jià)費(fèi)用利用斑馬魚(yú)模型實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)通便功效。

我們將受測(cè)試斑馬魚(yú)分成三組，分別是正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和服用心肌保護(hù)劑組。其中正常對(duì)照組未經(jīng)任何處理，模型對(duì)照組與服用心肌保護(hù)劑組都攝入了等量的鹽酸異丙腎上腺素（鹽酸異丙腎上腺素通過(guò)溶解到養(yǎng)魚(yú)用水中的方式攝入到斑馬魚(yú)體內(nèi)）。服用心肌損傷保護(hù)劑組在攝入鹽酸異丙腎上腺素的同時(shí)攝入N-乙酰半胱氨酸之類(lèi)的心肌保護(hù)劑。服用一段時(shí)間心肌保護(hù)劑后，我們對(duì)斑馬魚(yú)整體進(jìn)行特異性熒光染色，觀察心肌細(xì)胞的凋亡情況。可以看到，服用心肌保護(hù)劑組的心臟情況與正常對(duì)照組比較相似，細(xì)胞凋亡明顯比模型對(duì)照組減少。

我們將受測(cè)試斑馬魚(yú)分成三組，分別是正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和藥物組。其中正常對(duì)照組未攝入維拉帕米，模型對(duì)照組與藥物組都攝入了等量的維拉帕米（維拉帕米通過(guò)溶解到養(yǎng)魚(yú)用水中的方式攝入到斑馬魚(yú)體內(nèi)）。藥物組先攝入地高辛之類(lèi)的改善心動(dòng)過(guò)緩藥物再攝入維拉帕米。服用改善心動(dòng)過(guò)緩藥物后再加入維拉帕米共同處理至實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)后，我們對(duì)斑馬魚(yú)統(tǒng)計(jì)斑馬魚(yú)的心率?？梢钥吹剑Ｐ蛯?duì)照組心率明顯減慢，服用藥物組的心率與正常對(duì)照組比較相似，沒(méi)有明顯的心率減慢。新一輪基本藥物目錄調(diào)整在即。

斑馬魚(yú)消化道的解剖結(jié)構(gòu)和細(xì)胞結(jié)構(gòu)與人類(lèi)消化道相似，具有同心圓層的內(nèi)上皮、結(jié)締組織、環(huán)狀肌肉和外縱肌層。三硝基苯磺酸（TNBS）的乙醇溶液造模法屬于正常免疫系統(tǒng)下的半抗原誘導(dǎo)性模型，當(dāng)TNBS的乙醇溶液灌腸時(shí)，乙醇作為有機(jī)溶劑溶解腸粘膜表面的黏液，暫時(shí)性破壞腸粘膜屏障，使TNBS和腸組織蛋白結(jié)合形成完全抗原，導(dǎo)致腸黏膜免疫系統(tǒng)針對(duì)該抗原的遲發(fā)性變化反應(yīng)，并造成腸黏膜的損傷。杯狀細(xì)胞是黏蛋白的主要來(lái)源，其數(shù)量和形態(tài)反應(yīng)腸粘膜的健康狀況，是腸粘膜異常的敏感指標(biāo)。由于斑馬魚(yú)通體透明的特點(diǎn)，有兩種方法檢測(cè)結(jié)腸炎的防治作用。1.觀察腸腔面積的變化，2.通過(guò)特異性染料（呈藍(lán)色）對(duì)腸道的杯狀細(xì)胞染色，通過(guò)觀察杯狀細(xì)胞數(shù)量來(lái)判斷腸粘膜的損傷情況。利用斑馬魚(yú)模型評(píng)價(jià)抗癲癇作用。藥品安全性評(píng)價(jià)費(fèi)用

斑馬魚(yú)模型實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)細(xì)胞凋亡。藥物研究實(shí)驗(yàn)方案

我們將受測(cè)試斑馬魚(yú)分成三組，分別是正常對(duì)照組、模型對(duì)照組和腎保護(hù)劑組。其中正常對(duì)照組未攝入馬兜鈴酸，模型對(duì)照組和腎保護(hù)劑組都攝入了等量的馬兜鈴酸（馬兜鈴酸通過(guò)溶解到養(yǎng)魚(yú)用水中的方式攝入到斑馬魚(yú)體內(nèi)）。腎保護(hù)劑組在攝入馬兜鈴酸的同時(shí)攝入山牡荊水提取物之類(lèi)的腎保護(hù)劑。檢測(cè)腎小球?yàn)V過(guò)率的斑馬魚(yú)在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需額外靜脈注射熒光物質(zhì)。服用一段時(shí)間腎保護(hù)劑后，1.統(tǒng)計(jì)斑馬魚(yú)腎性水腫的發(fā)生率，2.用熒光顯微鏡拍照，通過(guò)斑馬魚(yú)全身熒光強(qiáng)度分析腎小球?yàn)V過(guò)率。藥物研究實(shí)驗(yàn)方案

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