改良高氏二號液體培養(yǎng)基

天然培養(yǎng)基：天然培養(yǎng)基是指一類利用動物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。常用的天然有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養(yǎng)基成本較低，除在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常使用外，也適于用來進(jìn)行工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產(chǎn)。組合培養(yǎng)基：合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分，用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計(jì)而配制的培養(yǎng)基。例如，高氏1號培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。合成培養(yǎng)基有一定的配方，配制合成培養(yǎng)基時(shí)重復(fù)性強(qiáng)，但與天然培養(yǎng)基相比其成本較高，微生物在其中生長速度較慢，一般適于在實(shí)驗(yàn)室用來進(jìn)行有關(guān)微生物營養(yǎng)需求、代謝、分類鑒定、生物量測定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。常見的細(xì)菌類培養(yǎng)基包括營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、大腸桿菌培養(yǎng)基、金黃色葡萄球菌培養(yǎng)基等等。改良高氏二號液體培養(yǎng)基

培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)濃度合適時(shí)微生物才能生長良好，營養(yǎng)物質(zhì)濃度過低時(shí)不能滿足微生物正常生長所需，濃度過高時(shí)則可能對微生物生長起抑制作用，例如高濃度糖類物質(zhì)、無機(jī)鹽、重金屬離子等不僅不能維持和促進(jìn)微生物的生長，反而起到抑菌或殺菌作用。另外，培養(yǎng)基中各營養(yǎng)物質(zhì)之間的濃度配比也直接影響微生物的生長繁殖和（或）代謝產(chǎn)物的形成和積累，其中碳氮比（C/N）的影響較大。嚴(yán)格地講，碳氮比指培養(yǎng)基中碳元素與氮元素的物質(zhì)的量比值，有時(shí)也指培養(yǎng)基中還原糖與粗蛋白之比。例如，在利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸的過程中，培養(yǎng)基碳氮比為4/1時(shí)，菌體大量繁殖，谷氨酸積累少；當(dāng)培養(yǎng)基碳氮比為3/1時(shí)，菌體繁殖受到抑制，谷氨酸產(chǎn)量則大量增加。 心浸液肉湯（Huntoon）HIB培養(yǎng)基培養(yǎng)基的配方也會受到環(huán)境、藥物和其他外部壓力的影響，因此，在實(shí)際應(yīng)用中需要不斷進(jìn)行調(diào)整和改進(jìn)。

營養(yǎng)培養(yǎng)基(nutrient media) 在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加一些特殊的營養(yǎng)物質(zhì)，如葡萄糖、血液、血清、酵母浸膏、生長因子等，可供營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌在其中生長。例如鏈球菌、肺炎鏈球菌等需在含血液或血清的培養(yǎng)基中生長；結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)基中須添加雞蛋、馬鈴薯、甘油等。比較常用的營養(yǎng)培養(yǎng)基是血瓊脂平板。增菌培養(yǎng)基(enrichment media) 一般為液體培養(yǎng)基，用于細(xì)菌的增菌培養(yǎng)，可泛用，也可專門用的，在專門用的增菌培養(yǎng)基中常含有目的菌生長所需要的特殊營養(yǎng)物質(zhì)或生長因子。

1951年厄爾開發(fā)了供動物細(xì)胞體外生長的人工合成培養(yǎng)基(MEM)。合成培養(yǎng)基的種類相當(dāng)多。合成培養(yǎng)基成分已知，便于對實(shí)驗(yàn)條件的控制。但與天然培養(yǎng)基相比，有些天然的未知成分尚無法用已知的化學(xué)成分所替代，因此，細(xì)胞培養(yǎng)中使用的基礎(chǔ)合成培養(yǎng)基還必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分，以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的作法是加入小牛血清。動物血清成分復(fù)雜，各種生物大小分子混合在一起，有些成分至今尚未搞清楚。血清對細(xì)胞生長很有效，但后期對培養(yǎng)產(chǎn)物的分離、提純以及檢測造會成一定困難。另外高質(zhì)量的動物血清來源有限，成本高，限制了它的大量使用。無血清培養(yǎng)基不加動物血清，在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入細(xì)胞生長有效因子等。特定的培養(yǎng)基可用于特定的微生物和組織細(xì)胞培養(yǎng)。

培養(yǎng)基的pH必須控制在一定的范圍內(nèi)，以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物。各類微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的較適pH條件各不相同，一般來講，細(xì)菌與放線菌適于在pH7-7.5范圍內(nèi)生長，酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范圍內(nèi)生長。值得注意的是，在微生物生長繁殖和代謝過程中，由于營養(yǎng)物質(zhì)被分解利用和代謝產(chǎn)物的形成與積累，會導(dǎo)致培養(yǎng)基pH發(fā)生變化，若不對培養(yǎng)基pH條件進(jìn)行控制，往往導(dǎo)致微生物生長速度下降或（和）代謝產(chǎn)物產(chǎn)量下降。因此，為了維持培養(yǎng)基pH的相對恒定，通常在培養(yǎng)基中加入pH緩沖劑，常用的緩沖劑是一氫和二氫磷酸鹽（如KH2PO4和K2HPO4）組成的混合物。K2HPO4溶液呈堿性，KH2PO4溶液呈酸性，兩種物質(zhì)的等量混合溶液的pH為6.8。當(dāng)培養(yǎng)基中酸性物質(zhì)積累導(dǎo)致H+濃度增加時(shí)，H+與弱堿性鹽結(jié)合形成弱酸性化合物，培養(yǎng)基pH不會過度降低；如果培養(yǎng)基中OH-濃度增加，OH-則與弱酸性鹽結(jié)合形成弱堿性化合物，培養(yǎng)基pH也不會過度升高。培養(yǎng)基是一種營養(yǎng)物質(zhì)混合物，可以為細(xì)胞提供生長所需的物質(zhì)。7%無菌脫纖維綿羊全血

培養(yǎng)基種類繁多，根據(jù)需求選擇適合的培養(yǎng)基對于成功的微生物培養(yǎng)至關(guān)重要。改良高氏二號液體培養(yǎng)基

細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞培養(yǎng)基是不可或缺的，細(xì)胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細(xì)胞中供給細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，也是培養(yǎng)細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。通常細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)需要加入血清，以維持細(xì)胞的生長和存活。而除了血清之外，部分細(xì)胞在培養(yǎng)過程中需要添加胰島素和β-巰基乙醇（β-mercaptoethanol）等成分來維持細(xì)胞狀態(tài)。MCF-7和NIH:OVCAR-3等細(xì)胞需要額外添加胰島素，而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等細(xì)胞則需要添加β-巰基乙醇，不同細(xì)胞加入量會有差異，需根據(jù)細(xì)胞類型判斷。改良高氏二號液體培養(yǎng)基

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