枯草芽孢桿菌對(duì)土壤脲酶活性的影響,應(yīng)用土壤酶作為監(jiān)測(cè)指標(biāo),評(píng)價(jià)農(nóng)藥的生態(tài)毒理效應(yīng)已成為環(huán)境科學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一。而脲酶屬于土壤中研究得比較深入的一種水解酶類,是惟一對(duì)尿素在土壤中轉(zhuǎn)化及尿素利用率有重大影響的酶。尿素施人土壤后,在脲酶的催化作用下,迅速分解成二氧化碳和氨,所以土壤脲酶活性的降低,不僅可使尿素水解減緩,令其水解產(chǎn)物更多地被土壤吸附而有效減少尿素水解產(chǎn)物氨的揮發(fā)損失,也可能相應(yīng)減少水解產(chǎn)物NH硝化作用潛勢(shì)。枯草芽孢桿菌能為以單細(xì)胞藻類為主的浮游植物提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),促進(jìn)繁殖。浮游植物的光合作用,又為池內(nèi)底棲水產(chǎn)動(dòng)物的呼吸、有機(jī)物的分解提供氧氣,從而使養(yǎng)殖水體形成一個(gè)良性的生態(tài)循環(huán)。銅綠假單胞菌的O抗原包含脂多糖,有特異性。勒克瑙曲霉菌種
枯草芽孢桿菌為接種微生物,對(duì)菲與苯并芘都可進(jìn)行吸附或生物降解,48h液相PAHs濃度達(dá)到平衡時(shí),微生物對(duì)菲消除了98%,對(duì)苯并芘消除85%;接種的樣品48h吸附等溫線均呈線形,能較好地符合線性方程;在接種微生物情況下,沉積物與土壤對(duì)菲和苯并芘吸附特征均發(fā)生較大變化,對(duì)菲的吸附量增大約35倍,而對(duì)苯并芘的吸附量卻降低了2/3左右;未接種微生物的土壤和沉積物對(duì)菲解吸率為20%,接種的樣品組為2.9%,而對(duì)苯并芘的解吸結(jié)果與菲相反,未接種的對(duì)照組為4%,接種的樣品組為3%。脲酶屬于土壤中研究得比較深入的一種水解酶類,枯草芽孢桿菌是對(duì)尿素在土壤中轉(zhuǎn)化及尿素利用率有重大影響的。廣州慢生根瘤菌菌株枯草芽孢桿菌有著很好的競(jìng)爭(zhēng)作用,保護(hù)作物根部不受病菌侵染和抑制作物體內(nèi)病原菌擴(kuò)散。
目前,科研人員已確定了幾種宿主因素與抗金葡菌傳染的作用有關(guān):補(bǔ)體系統(tǒng)、中性粒細(xì)胞、γδ+T細(xì)胞產(chǎn)生的IL-17、B細(xì)胞免疫應(yīng)答、Th1和Th17免疫應(yīng)答等。其中,越來(lái)越多的證據(jù)表明細(xì)胞免疫與金葡菌的反復(fù)傳染密切相關(guān)。然而,在病原體與宿主的“競(jìng)賽”中,金葡菌已進(jìn)化出多種策略來(lái)壓制宿主的獲得性抵御力的建立。葡萄球菌蛋白A(SpA)是一種明確的致病因子,能夠通過(guò)增強(qiáng)B細(xì)胞超抗原活性并阻斷抗體介導(dǎo)的吞噬作用來(lái)干擾B細(xì)胞活力和功能。到目前為止,只有肽聚糖O-乙?;D(zhuǎn)移酶(OatA)被證明可通過(guò)阻斷NLRP3炎性小體信號(hào)通路,進(jìn)而直接影響Th17保護(hù)性細(xì)胞免疫反應(yīng)的建立。因此,探究金葡菌逃避宿主保護(hù)性免疫反應(yīng)的潛在機(jī)制,對(duì)金葡菌疫苗的開發(fā)具有重要意義。
金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus),又稱金葡菌,是一種常見的革蘭陽(yáng)性菌,普遍存在于空氣、水、灰塵及人和動(dòng)物的排泄物中。它是一種生物共患病原菌,可導(dǎo)致人和動(dòng)物的多種疾病,包括偽膜性腸炎、敗血癥和膿毒癥等,嚴(yán)重威脅人類和動(dòng)物的生命安全。長(zhǎng)期以來(lái),青霉素和甲氧西林普遍用于救治敏感菌引起的傳染性疾病。隨著抑菌藥物的大規(guī)模使用以及人類的濫用和不合理使用,耐藥菌株層出不窮。金葡菌耐藥性較為突出,其中以耐甲氧西林金葡菌(Methicillin-resistantS.aureus,MRSA)危害較大。據(jù)報(bào)道顯示,MRSA傳染已經(jīng)和HBV傳染、AIDS并列為世界范圍內(nèi)三大難解決傳染性疾病。枯草芽孢桿菌在酸性胃環(huán)境中能保持活性,可以耐唾液和膽汁的攻擊。
大腸桿菌的培養(yǎng):將保藏狀態(tài)的菌種放入適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng),逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)得到純而壯的培養(yǎng)物,即獲得活力旺盛的、接種數(shù)量足夠的培養(yǎng)物。菌種發(fā)酵有一般需要2-3代的復(fù)壯過(guò)程,因?yàn)楸4鏁r(shí)的條件往往和培養(yǎng)時(shí)的條件不相同,所以要活化,讓菌種逐漸適應(yīng)培養(yǎng)環(huán)境。菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥后,生長(zhǎng)延遲期較長(zhǎng),需連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)。將菌種接種至一新鮮培養(yǎng)基上,每萌發(fā)一次即為一代,因此,當(dāng)原始菌種復(fù)溶并轉(zhuǎn)至新培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng),即認(rèn)為已傳代一次,從菌種保藏中心獲得的冷凍干燥的菌種為第0代,冷凍干燥的原始菌種開啟后轉(zhuǎn)種為第1代,直到第3代為工作菌種。菌種的傳代次數(shù)(自原始菌種凍干粉起)不得超過(guò)5代。直接從凍存搖的菌甘油放了不少可能會(huì)抑制菌的生長(zhǎng),活力差,而且多余的甘油對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)不利,經(jīng)劃板的菌株活力好,可以挑菌搖菌提質(zhì)粒或者做表達(dá)用。在有特殊用途的時(shí)候必須考慮大腸桿菌的性能、規(guī)格等。中國(guó)葡萄座腔菌
嗜酸乳桿菌 W37 嗜酸乳桿菌W55 副干酪乳桿菌W72 植物乳桿菌 W62 鼠李糖乳桿菌 W71 唾液乳桿菌 W24 干酪乳桿菌 LBC80R .勒克瑙曲霉菌種
保存的銅綠假單胞菌復(fù)蘇時(shí),直接從菌種保存管挑取少量細(xì)菌移種普通瓊脂平板或肉湯管,于37攝氏度培養(yǎng)18~24小時(shí)。主要生化指標(biāo)檢測(cè),取較低溫甘油保存法和半固體保存法兩種保存法保存的菌種分別進(jìn)行42攝氏度生長(zhǎng)試驗(yàn)、氧化酶試驗(yàn)、氧化-發(fā)酵試驗(yàn)、動(dòng)力試驗(yàn)及明膠液化試驗(yàn)檢測(cè)。半固體保存法在3個(gè)月內(nèi)復(fù)蘇,細(xì)菌生長(zhǎng)良好,但在6個(gè)月后復(fù)蘇,存活率降低,只達(dá)30%。移種普通瓊脂平板上無(wú)肉眼可見的藍(lán)綠色的色素產(chǎn)生,需連續(xù)移種3~4次后才可見到色素產(chǎn)生。改良的方法使菌種保存已達(dá)27個(gè)月,期間分別在6、12、18、24、27個(gè)月時(shí)復(fù)蘇,均可見綠膿桿菌在普通瓊脂平板上生長(zhǎng)良好,可見圓形、大小不一、光滑、濕潤(rùn)、邊緣不整齊的扁平菌落,菌落周圍的瓊脂被染成藍(lán)綠色;細(xì)菌存活率為100%。勒克瑙曲霉菌種
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