銅綠假單胞菌進行傳代保存時,培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于較適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣。銅綠假單胞菌主要用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或療養(yǎng),非藥用,非食用。主要用途有抗抵菌防腐劑的檢測、抗微生物效力測試、培養(yǎng)基測試、非無菌產(chǎn)品的控制菌測試、質(zhì)量控制菌株,無菌測試、產(chǎn)鼠李糖脂表面活性劑、藥品和個人護理用品檢測。通常采用冷凍干燥管保藏。與特異性有密切關(guān)系。標(biāo)本可取創(chuàng)面滲出物、膿汁、尿、血等。分離培養(yǎng),根據(jù)菌落特征、色素以及生化反應(yīng)予以鑒定。必要時可用血清學(xué)試驗確診。部分人群體內(nèi)銅綠假單胞菌滋生會使尿液呈綠色。銅綠假單胞菌為條件致病菌,常見于燒傷科影響等癥,因此絮用纖維等纖維產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定不得檢出銅綠假單胞菌。大腸桿菌是條件致病菌。Massilia kyomggiensis菌種
典型的金黃色葡萄球菌為球型,顯微鏡下排列成葡萄串狀。金黃色葡萄球菌無芽胞、鞭毛,大多數(shù)無莢膜。革蘭染色陽性。金葡菌具有抗干燥、耐熱、耐低溫、耐高滲的特性。在干燥環(huán)境中存活數(shù)月;空氣中存在,但不繁殖。加熱70℃1h,80℃30min不被殺死。在冷凍食品中不易死。在含有50%~66%蔗糖或15%以上食鹽食品中才可被抑制,能在15%NaCl和40%膽汁中生長。金黃色葡萄球菌是院內(nèi)傳染及社區(qū)獲得性傳染的常見細菌之一。隨著?-內(nèi)酰胺類維生素的普遍應(yīng)用,耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)隨之增加,且引起的傳染和病死率有逐年增加的趨勢。MRSA可通過接觸途徑進行傳播,即易感人群從攜帶者或傳染者身上獲得MRSA,導(dǎo)致傳播流行。球團產(chǎn)色鏈霉菌目前我國大腸桿菌的種類正在逐步增加,大腸桿菌生產(chǎn)技術(shù)也有了很大的提高。
凍存銅綠假單胞桿菌時,要先消化細胞,將細胞懸液收集至離心管中。1000rpm離心10分鐘,棄上清液。沉淀加含保護液的培養(yǎng),計數(shù),調(diào)整至5×106/毫升左右。將懸液分至凍存管中,每管1毫升。將凍存管口封嚴(yán)。如用安瓿瓶則火焰封口,封口一定要嚴(yán),否則復(fù)蘇時易出現(xiàn)爆裂。貼上標(biāo)簽,寫明細胞種類,凍存日期。凍存管外拴一金屬重物和一細繩。按順序降溫,室溫→4攝氏度(20分鐘〕→冰箱冷凍室(30分鐘)→低溫冰箱(-30攝氏度1小時)→氣態(tài)氮(30分鐘)→液氮。注意操作時應(yīng)小心,以免液氮凍壞。液氮定期檢查,隨時補充,不能揮發(fā)干凈,一般30立升的液氮能用1~1.5月。
金黃色葡萄球菌的檢驗方法操作步驟:直接計數(shù)方法6.2.1吸取上述1:10混懸液,進行10倍遞次稀釋,根據(jù)樣品污染情況,選擇不同濃度的稀釋液1mL,分別加人三塊Baird一Parker平板,每個平板接種量分別為0.3mL、0.3mL、0.4mL,然后用滅菌L棒涂布整個平板。如水分多不易吸收,可將平板放在36℃士1℃lh,等水分蒸發(fā)后反轉(zhuǎn)平皿置36℃士1℃培養(yǎng)。在三個平板上點數(shù)周圍有混濁帶的黑色菌落,并從中任選五個菌落,分別接種血平板,36℃士1℃24h培養(yǎng)后進行染色鏡檢、血漿凝固酶試驗,步驟同增菌培養(yǎng)法。金黃色葡萄球利用70%的乙醇可以在幾分鐘之內(nèi)將其快速殺死。
銅綠假單胞菌經(jīng)過多重檢驗(菌落形態(tài)、鏡檢及生化試驗),保證菌種的純度及活性,防碎標(biāo)準(zhǔn)包裝,避免運輸過程中雜菌污染。屬于標(biāo)準(zhǔn)菌種、標(biāo)準(zhǔn)菌株、質(zhì)控菌種、質(zhì)控菌株,用于實驗室質(zhì)控、檢測。規(guī)格型號通常為封閉凍干粉、斜面種、菌液。保質(zhì)期一般為8-10年,應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時轉(zhuǎn)接。菌種傳代場所為萬級潔凈室內(nèi)100級進口生物安全柜。每傳代一次均會做菌株純度及生化試驗,保證菌種的活性與純度。購買銅綠假單胞菌后應(yīng)及時使用,銅綠假單胞菌菌株適用于科研、教學(xué)及微生物檢測質(zhì)量控制,禁止用于人體。銅綠假單胞菌菌種活化前,如要長期保藏,請將安瓿管保存在4-10度的環(huán)境下。枯草芽孢桿菌在酸性胃環(huán)境中能保持活性,可以耐唾液和膽汁的攻擊。東京根霉菌株
銅綠假單胞菌存在的重要條件是潮濕的環(huán)境。Massilia kyomggiensis菌種
SHBCCD73676乳酸片球菌SHBCCD73676=ATCC8042=CCM2425=DSM20238=JCM20119=NBRC3076=NCTC6990PediococcusacidilacticiAssayofpanthenol,aminoacidanddexpanthenol;測定賴氨酸SHBCCD73677枯草芽孢桿菌SHBCCD73677BacillussubtilisSHBCCD73678嗜熱鏈球菌SHBCCD73678Streptococcusthermophilus酸奶SHBCCD73679解藻酸弧菌SHBCCD73679=ATCC17749VibrioalginolyticusTypestrainSHBCCD73680表皮葡萄球菌SHBCCD73680StaphylococcusepidermidisSHBCCD73681褪色沙雷氏菌(粘質(zhì)沙雷氏菌)SHBCCD73681Serratiamarcescens限制性內(nèi)切酶SmaⅠSHBCCD73682谷氨酸棒桿菌SHBCCD73682Corynebacteriumglutamicum賴氨酸;谷氨酸SHBCCD73683動物雙歧桿菌動物亞種SHBCCD73683B乳制品發(fā)酵,食品飲料SHBCCD73684解糖假蒼白桿菌SHBCCD73684PseudochrobactrumsaccharolyticumSHBCCD73685解糖假蒼白桿菌SHBCCD73685PseudochrobactrumsaccharolyticumSHBCCD73686淤泥根瘤菌SHBCCD73686RhizobiumborboriSHBCCD73687解糖假蒼白桿菌SHBCCD73687PseudochrobactrumsaccharolyticumSHBCCD73688人參田地類諾卡氏菌SHBCCD73688=KCTC19187Nocardioidespanacihumi模式菌株Massilia kyomggiensis菌種
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