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外泌體在肺病進(jìn)程中的作用:肺病細(xì)胞來(lái)源外泌體(LCC-exosome)可以通過(guò)刺激一些病癥血管的形成來(lái)促進(jìn)一些病癥的生長(zhǎng)。據(jù)相關(guān)報(bào)道稱,LCC-exosome中的miR-210可以通過(guò)調(diào)節(jié)基質(zhì)細(xì)胞中酪氨酸受體激酶A3的含量,促進(jìn)一些病癥血管的生成;而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過(guò)啟動(dòng)脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來(lái)促進(jìn)肺病的生血管作用。此外,有研究發(fā)現(xiàn),外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達(dá)增加,促使人正常支氣管上皮細(xì)胞出現(xiàn)EMT,從而使肺支氣管正常上皮細(xì)胞出現(xiàn)增殖,遷移能力。色譜法。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,但是需要特殊的設(shè)備,應(yīng)用不普遍。外泌體提?。好芏忍荻入x心。杭州外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家
外泌體(Exosome)是細(xì)胞主動(dòng)分泌的囊泡樣小體,大小均一,直徑30-200nm,密度1.10-1.18g/ml,來(lái)源普遍,幾乎所有細(xì)胞都可分泌,在血液,尿液,唾液,腦脊液,腹水,乳汁等體液中普遍分布。外泌體較早在1986年發(fā)現(xiàn)于培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中。1996年,研究者發(fā)現(xiàn)外泌體作為抗原呈遞因子參與T細(xì)胞依賴的抗一些病癥反應(yīng),開(kāi)啟了外泌體蛋白研究的新天地。2013年諾貝爾生物/醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)解答了細(xì)胞如何組織其內(nèi)部較重要的運(yùn)輸系統(tǒng)之一——囊泡傳輸系統(tǒng)的奧秘。超離法因操作簡(jiǎn)單,獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受?歡迎,但過(guò)程比較費(fèi)時(shí),且回收率不穩(wěn)定,純度也受到質(zhì)疑。南京正規(guī)外泌體提取試劑直銷廠家外泌體提?。盒》肿涌蛇M(jìn)入凝膠中絕大部分孔洞,在柱中受到更強(qiáng)地滯留,更慢地被洗脫出。
由于這些核酸被囊膜包裹而被保護(hù),穩(wěn)定性高,不易降解,是一種用于一些病癥診斷和預(yù)后監(jiān)測(cè)的非常理想的新型生物標(biāo)記物一些疾病的早期診斷、用藥監(jiān)控、預(yù)后判斷。近年來(lái),隨著人們對(duì)外泌體的研究和認(rèn)識(shí)加深,外泌體檢測(cè)作為一種新型的液體活檢熱點(diǎn)技術(shù)已被許多臨床科研機(jī)構(gòu)普遍地應(yīng)用于一些病癥和疾病的無(wú)創(chuàng)診斷、治病和監(jiān)測(cè);如何高效地提取外泌體是實(shí)現(xiàn)這項(xiàng)新興液體活檢技術(shù)臨床常規(guī)化應(yīng)用的關(guān)鍵。外泌體(Exosome)是從體液(尿液、血液、唾液、腹水、胸腹水等)和細(xì)胞液中快速提取的,其是活細(xì)胞分泌到胞外的囊泡樣小體,含有多種蛋白和核酸分子(DNA、RNA、以及miRNA),在體內(nèi)細(xì)胞間物質(zhì)和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中起到重要作用。
外泌體相關(guān)蛋白質(zhì)與肺病的診斷:近年來(lái)眾多文獻(xiàn)報(bào)道,肺病細(xì)胞分泌的外泌體中富含多種蛋白質(zhì)并促進(jìn)肺病的發(fā)生的發(fā)展,是早期診斷肺病的有效途徑。有研究發(fā)現(xiàn),NSCLC患者肺組織外泌體表面EGFR免疫染色呈陽(yáng)性的占80%,而慢性肺炎組織的外泌體EGFR呈陽(yáng)性的只占2%,因而認(rèn)為外泌體的EGFR蛋白可以用作NSCLC與慢性肺炎鑒別診斷的生物標(biāo)志物。Park等通過(guò)Sys-BodyFlu-id數(shù)據(jù)庫(kù)分析發(fā)現(xiàn)153種特異性胸腔積液外泌體蛋白質(zhì),進(jìn)一步的Westernblotting分析顯示多種特異性胸腔積液外泌體蛋白參與EGFR信號(hào)傳導(dǎo)途徑以促進(jìn)一些病癥的發(fā)生的發(fā)展,因此外泌體蛋白可能作為肺病診斷篩查的生物學(xué)標(biāo)記物。近幾年來(lái),市場(chǎng)上已出現(xiàn)各種商業(yè)化的外泌體提取試劑盒。外泌體的提取方法:色譜法。
外泌體是一種存在于細(xì)胞外的多囊泡體,可通過(guò)細(xì)胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成多泡內(nèi)涵體,內(nèi)涵體與細(xì)胞膜融合后釋放其中的小囊泡。外泌體的直徑在40-110nm之間,其中包含RNA、蛋白質(zhì)、microRNA、DN**段等多種物質(zhì),存在于血液、唾液、尿液、腦脊液和母乳等多種體液中。外泌體從發(fā)現(xiàn)至今已有30多年的歷史,雖然較初被認(rèn)為可能是細(xì)胞的“垃圾”,所以才被排出來(lái),但是近年來(lái)研究表明外泌體具有功能活性并可進(jìn)行細(xì)胞間信息傳遞。如今,研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體在抗原提呈細(xì)胞中呈遞抗原程中、一些病癥細(xì)胞發(fā)生的發(fā)展、神經(jīng)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中都發(fā)揮著重要作用。專利申請(qǐng)利用分離培養(yǎng)人尿液來(lái)源細(xì)胞并收集培養(yǎng)基來(lái)進(jìn)行體外培養(yǎng)。外泌體提取:超離法因操作簡(jiǎn)單,獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎。南京正規(guī)外泌體提取試劑直銷廠家
外泌體提?。涸诔匐x心力作用下,使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層。杭州外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家
外泌體與神經(jīng)退行性疾?。和饷隗w可能促進(jìn)或限制大腦中未折疊和異常折疊的蛋白質(zhì)的聚集。AD病人腦脊液外泌體中均可檢測(cè)到Tau和Aβ蛋白。類似的現(xiàn)象也在PD和ALS疾病中發(fā)現(xiàn)。PD病人腦脊液外泌體可檢測(cè)到α-synuclein,ALS病人外泌體中也可以檢測(cè)到SOD1或TDP-43。外泌體與疾病診斷(應(yīng)用潛能):外泌體生成機(jī)制表明,通過(guò)分析外泌體的組分,可以幫助識(shí)別其來(lái)源的細(xì)胞類型。這一特性已被應(yīng)用于開(kāi)發(fā)心血管疾病,神經(jīng)系統(tǒng)疾病和一些病癥的分子診斷方法,也在肝腎肺相關(guān)疾病中進(jìn)行研發(fā)測(cè)試。將沉淀物用PBS緩沖液進(jìn)行懸浮,使外泌體懸浮于液體上層。杭州外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家
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