長沙鼠尾膠原單價

來源: 發(fā)布時間:2023-01-09

要準備的器具:組織剪2把,有齒鑷1把,無齒鑷1把,200ml燒杯1個,培養(yǎng)皿1個,帶蓋廣口瓶1個,離心管、小瓶數(shù)個,滴管若干。以上物品須經(jīng)嚴格高壓消毒滅菌。需配制的液體0.1%醋酸溶液。經(jīng)44.48N10min高壓蒸汽滅菌(或是過濾除菌)后備用。此外還有用消毒雙蒸水配制75%酒精溶液。取大鼠尾巴,洗凈,置75%酒精浸泡消毒后,手持尾巴,用止血鉗夾住尾巴較高,折斷尾骨后拉出尾腱,將尾腱剪碎后置消毒的三角燒瓶中,稱尾腱的重量,按每克尾腱50ml的比例加入0.1%醋酸溶液,搖晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置48小時,離心。吸取其上清,分裝至小瓶,4℃保存。上述制備過程均在無菌條件下完成。吸去生理鹽水,將尾腱稱重(0.5-1克)。長沙鼠尾膠原單價

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鼠尾膠原簡介:鼠尾I型膠原蛋白(Collagenfromrattail,TypeI)系采用Birkedal-Hansen方法在無菌下制備,純度達到95%以上,可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于細胞培養(yǎng)皿的包被,特別適合普通細胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細胞的培養(yǎng);也可用于制備三維膠原凝膠,使細胞在模擬的三維環(huán)境中生長。質量標準:1、SDS-PAGE分析純度大于95%。2、無菌檢驗結果為陰性。3、本品2μg/cm2包被細胞培養(yǎng)皿后培養(yǎng)PC-12細胞,貼壁及生長正常。4、本品濃度1mg/mL,pH7.0時形成具有一定強度的三維膠原凝膠,NIH-3T3細胞在三維凝膠內生長正常、PC-12細胞在三維凝膠表面生長正常。長沙正規(guī)鼠尾膠原直銷價將尾腱剪斷置于平皿中,生理鹽水浸泡。

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鼠尾膠原使用方法:1、細胞培養(yǎng)器皿的表面包被以包被濃度為2μg/cm2為例,用無菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL。加到相應的培養(yǎng)器皿中,確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面。開蓋在超凈臺上過夜晾干,也可以在室溫放置1小時后,用PBS洗3~4次后直接使用。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三個月以上的時間。三維膠原凝膠的制備:A、無細胞三維膠原凝膠的制備(以配制1mg/mL三維膠1mL為例)將200μL本品加到置于冰浴的離心管中,加入690μL雙蒸水,然后加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結),立即混勻。再加入100μL10×PBS或10×培養(yǎng)液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,初次使用時需要測定pH值)。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,轉移到培養(yǎng)箱內。如果配制中使用的是10×PBS,使用前需要加入適當體積的細胞培養(yǎng)液預平衡。

膠原蛋白的功效與作用:1、膠原蛋白中含有大量甘氨酸,在人體內不僅參與合成膠原,而且還是大腦細胞中是一種克制性遞質,以產(chǎn)生對的安靜作用,對焦慮癥、神經(jīng)衰弱等有良好的治好作用膠原蛋白食品,在胃里可以克制蛋白質因胃酸作用引起的凝聚作用,從而有利于食物的消化,還有克制胃酸和胃原酶分泌的作用,可減輕胃潰瘍患者疼痛,促進胃潰瘍愈合。2、膠原蛋白是身體免疫作用中負責重要功能的阿米巴細胞清掃異物的感知器,因此對預防疾病很有幫助??商岣呙庖邫C能、克制細胞、活化細胞機能、活化筋骨、治好關節(jié)炎及酸痛。將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液。

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膠原蛋白的提取方法:酶法提取:酶法提取是利用蛋白酶使膠原溶解,水解條件溫和,反應速率快,提取的膠原蛋白仍有完整的三股螺旋結構,蛋白純度高,理化性質穩(wěn)定,且無環(huán)境污染。酶法提取常用的蛋白酶有:胃蛋白酶、胰蛋白酶或者復合酶。工藝可選擇一步法,即利用酶液直接提??;二步法,即先用酸或者堿進行初步提取,然后再用酶提取。Langmaier等[6]用MgO預處理革屑,然后用堿性蛋白酶提取膠原的水解產(chǎn)物。CabezaL.F.T等[7]先用胃蛋白酶,再用堿性蛋白酶提取了2種不同的膠原水解產(chǎn)物。趙蒼碧等[2]采用胃蛋白酶和無花果蛋白酶消化法從牛腱中提取膠原蛋白,探討了酶和酶的加入量對提取結果的影響,給出了酶對膠原提取較佳工藝配比,酶與牛腱的質量比為0.1時效果較佳,而使用無花果蛋白酶時,0.01的配比較佳??芍苯踊蜷g接參與細胞的附著。杭州鼠尾膠原價格

鼠尾膠原,是一種天然培養(yǎng)基,它具有促進體外培養(yǎng)細胞(特別是上皮細胞)貼壁的作用。長沙鼠尾膠原單價

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:三維膠原的制備鼠尾膠原蛋白型在濃度1mg/ml以上,pH左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,在成膠過程中需要加入0.06體積的0.1mol/LNaOH來中和。需要的溶液(均需要無菌、預冷)10mg/L酚紅用于pH指示)0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),雙蒸水200ul鼠尾膠原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結)立即混勻。再加入100ul10PBS10培養(yǎng)液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,初次使用時需要用pH試紙測試)。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,并且制作簡便,成本低廉。長沙鼠尾膠原單價