貴州熒光染料熒光素酶

來源: 發(fā)布時間:2024-10-29

管可用于實驗室的熒光團數量眾多,但這些染料通常屬于以下三組之一:熒光染料:這些是用于在體外標記生物相關分子的小型有機天然或合成熒光分子。該組中的一些熒光染料包括熒光素、溴化乙錠和花青。熒光蛋白:這些是較大的、生物制造的蛋白質,由于它們的大分子結構而發(fā)出熒光。GFP、RFP和YFP是屬于該組的一些染料。量子點:這些高熒光合成納米晶體由半導體材料制成。隨著熒光基本特性的廣泛應用和該領域的顯著進步,已經針對特定應用和儀器開發(fā)和優(yōu)化了數百種活性熒光染料。同樣,多年來,大量復雜的熒光技術(例如,FRET、TRF、FP、FRAP、FACS、FCS)也在不斷發(fā)展。羅丹明具有出色的光穩(wěn)定性以及許多光物理特性,使其非常適合用作激光染料、熒光探針和顏料。貴州熒光染料熒光素酶

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二、***成像分析:D-熒光素,鉀鹽,D-PBS,不含鈣、鎂1、配制溶液使用無菌D-PBS(w/oCa2+;Mg2+)配制D-熒光素鉀鹽溶液(15mg/ml),0.22μm濾膜過濾除菌(避光),分裝后于-20℃或-80℃冷凍保存,避免反復凍融。使用時4℃融化,實驗前平衡至室溫(避光)2、注射量取決于注射方式,具體如下:注射方式劑量靜脈注射(25-27gauge針頭)按10μl/g體重濃度,加入相應體積的15mg/ml熒光素工作液腹腔注射(25-27gauge針頭)按10μl/g體重濃度,加入相應體積的15mg/ml熒光素工作液肌肉注射(27gauge針頭)50μl,濃度為1-2mg/ml熒光素工作液鼻內注射(pipette)50μl,濃度為3mg/ml熒光素工作液3、注射入體內10-20min(待光信號達到**強穩(wěn)定平臺期),再進行成像分析中國澳門熒光染料高分子羰花青染料用作 Di 來標記細胞、細胞器、脂質體、病毒和脂蛋白。

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Cy5:激發(fā)波長633/635nm,比較大發(fā)射波長670nm。1)其標記的抗體適用于所有配備633nm氟離子激光器的流式細胞儀;2)在流式細胞儀的FL4通道檢測;3)適用于熒光顯微鏡技術;4)同樣為小分子染料,非常適合需小分子染料的流式細胞術,熒光強度低于APC。5)與單核和粒細胞非特異性結合多,易出現假陽性結果。

5、PE:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長575nm。1)其標記的抗體適用于所有配備488nm氯離子激光器的流式細胞儀:2)在流式細胞儀的FL2通道檢測;3)其熒光泯滅性強,不適用于傳統(tǒng)的熒光顯微鏡技術,但適用于激光共聚焦顯微鏡技術。

6、PE-TR:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長615nm。1)在BeckmanCoulter流式細胞儀的FL3通道檢測;2)可適用于小功率激光器的流式細胞儀,也可使用于大功率激光器的大流式細胞儀。

7、PE-AlexaFluor610:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長628nm。1)在BeckmanCoulter流式細胞儀的FL3通道檢測;2)熒光強度高;3)可適用于小功率激光器的流式細胞儀,也可使用于大功率激光器的大流式細胞儀。

異硫氰酸熒光素(FITC)是一種有機熒光染料,目前,這種熒光染料仍用于免疫熒光和流式細胞術中。在495/517nm處,該染料會產生激發(fā)/發(fā)射峰值,并可借助異硫氰酸鹽反應基團與不同抗體結合,該基團可以和蛋白質上的氨基、巰基、咪唑、酪氨酰、羰基等基團相結合。而它的基本成分——熒光素,其摩爾質量為332g/mol,常被用作熒光示蹤劑。FITC(389g/mol)是用于熒光顯微鏡技術的首批染料,且其被當成AlexaFluor®488等后續(xù)熒光染料的發(fā)端。該染料的熒光活性取決于它的大共軛芳香電子系統(tǒng),而該系統(tǒng)受藍色光譜中的光所激發(fā)。經常與FITC同時使用的另一種染料是與其相似的TRITC[四甲基羅丹明-5(6)-異硫氰酸]。與FITC相反,TRITC并非熒光素,而是羅丹明家族的衍生物。羅丹明也具有一個大的共軛芳香電子系統(tǒng),正是該系統(tǒng)引發(fā)了它們的熒光行為。還有一點與FITC相反,TRITC(479g/mol)由比較**長為550nm的綠色光譜中的光所激發(fā),它的比較大發(fā)射波長為573nm。與蛋白質(例如,抗體)結合也基于異硫氰酸鹽反應基團。Super Fluor 555(效果同Alexa Fluor 555)琥珀酰亞胺酯熒光染料。

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其他細胞結構常用染料生物染料在細胞結構和組分鑒定中有著廣泛的應用,除細胞膜研究外,我們經常也會對一些其它細胞結構及成分進行探索,例如線粒體、溶酶體、蛋白質、細胞核等,而對于不同的細胞結構有不同的染料進行染色細胞染色神器DAPI+PhalloidinDAPI染色液(DAPIStainingSolution)常用于細胞核染色,可將細胞核染成藍色。鬼筆環(huán)肽(Phalloidin)是細胞骨架的染色神器,羅丹明標記的Phalloidin(TRITC-Phalloidin)可將細胞染成橙紅色,DAPI與Phalloidin染色液是研究細胞形態(tài)變化時經常用到的兩種共染的試劑,染色效果可見A1-E1用TRITC-鬼筆環(huán)肽(橙紅)染色的細胞骨架免疫熒光圖;A2-E2用DAPI(藍色)染色的細胞核免疫熒光圖;A3-E3合并的L929細胞免疫熒光染色圖。是S100A16過表達或下調前后PDAC細胞形態(tài)的變化。DiI(橙色熒光),DiO(綠色熒光),DiD(紅色熒光)和 DiR (深紅色熒光)對活細胞進行多色成像和流式分析。中國澳門熒光染料高分子

CY5熒光染料是一種被廣泛應用于生物分子檢測和熒光成像等領域的高效、穩(wěn)定的熒光標記試劑。貴州熒光染料熒光素酶

常用抗體標記熒光染料的特性及其應用

1、FITC:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長525nm。1)其標記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細胞儀;2)在流式細胞儀的FL1通道檢測;3)可用于熒光顯微鏡技術4)熒光強度易受PH值影響,PH值降低時其熒光強度減弱。2、AlexaFluor488:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長519nm。1)其標記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細胞儀:2)在流式細胞儀的FL1通道檢測;3)具有超乎尋常的光穩(wěn)定性,非常適用于熒光顯微鏡技術;4)在較寬的PH值范圍內保持穩(wěn)定(PH4~10)。5)南京星葉生物科技有限公司SuperFluor系列(效果同AlexaFluor系列)質優(yōu)價廉,歡迎咨詢。3、Cy3:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長570nm。1)其標記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細胞儀;2)在流式細胞儀的FL2通道檢測:3)適用于熒光顯微鏡技術;4)為小分子染料,非常適合需小分子染料的流式細胞術,熒光強度低于PE。 貴州熒光染料熒光素酶