LC3免疫組化

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-07-10

熒光標(biāo)記二抗的選擇普遍;與使用熒光素結(jié)合一抗的檢測(cè)相比,成本較低。間接免疫熒光的缺點(diǎn):由于需要具有兩種不同物種反應(yīng)性的兩種抗體,因此物種交叉反應(yīng)性問(wèn)題增加;與直接免疫熒光相比,時(shí)間更長(zhǎng)(操作步驟更多)。間接免疫熒光的優(yōu)點(diǎn):通過(guò)增加能夠與一抗結(jié)合的二抗數(shù)量進(jìn)行信號(hào)放大;與直接免疫熒光相比,通過(guò)信號(hào)放大提高檢測(cè)靈敏度;熒光標(biāo)記二抗的選擇普遍;與使用熒光素結(jié)合一抗的檢測(cè)相比,成本較低。間接免疫熒光的缺點(diǎn):由于需要具有兩種不同物種反應(yīng)性的兩種抗體,因此物種交叉反應(yīng)性問(wèn)題增加;與直接免疫熒光相比,時(shí)間更長(zhǎng)(操作步驟更多)。免疫熒光是一種常用的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù),用于檢測(cè)和定位特定抗原或抗體。LC3免疫組化

LC3免疫組化,免疫

免疫熒光的原理和類型:免疫熒光利用熒光分子或熒光團(tuán)在一定波長(zhǎng)(分子的吸收光譜)下吸收光子的特性,經(jīng)過(guò)短暫的間隔(發(fā)射光譜)后以較高的波長(zhǎng)發(fā)射光子,并伴隨能量損失。發(fā)射的熒光可通過(guò)顯微鏡觀察到。熒光團(tuán)可以通過(guò)可見(jiàn)光或紫外光激發(fā)。具有高光穩(wěn)定性和熒光量子產(chǎn)率的熒光染料可在市場(chǎng)上購(gòu)買,其激發(fā)較大值跨越從400到>700nm的波長(zhǎng)范圍。它們不會(huì)損傷活細(xì)胞,可安全用于生物制劑。在進(jìn)行免疫熒光檢測(cè)時(shí),首先對(duì)細(xì)胞或組織進(jìn)行固定和透化處理。進(jìn)行免疫染色時(shí),熒光團(tuán)與目標(biāo)抗原的抗體結(jié)合,然后使用成像顯微鏡觀察熒光信號(hào)。根據(jù)使用的抗體和所需的信號(hào)擴(kuò)增,免疫熒光可分為直接和間接兩種類型。CD80免疫檢測(cè)熒光抗體法和熒光抗原法都屬于免疫熒光技術(shù)的范疇。

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熒光色素:異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,F(xiàn)ITC)為黃色或橙黃色結(jié)晶粉末,易溶于水或酒精等溶劑。分子量為389.4,較大吸收光波長(zhǎng)為490495nm,較大發(fā)射光波長(zhǎng)520530nm,呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光,結(jié)構(gòu)式如下:有兩種同分異結(jié)構(gòu),其中異構(gòu)體Ⅰ型在效率、穩(wěn)定性、與蛋白質(zhì)結(jié)合能力等方面都更好,在冷暗干燥處可保存多年,是應(yīng)用較普遍的熒光素。其主要優(yōu)點(diǎn)是:①人眼對(duì)黃綠色較為敏感,②通常切片標(biāo)本中的綠色熒光少于紅色。四乙基羅丹明(rhodamine,RIB200)為橘紅色粉末,不溶于水,易溶于酒精。性質(zhì)穩(wěn)定,可長(zhǎng)期保存。結(jié)構(gòu)式如下:較大吸收光波長(zhǎng)為570nm,較大發(fā)射光波長(zhǎng)為595~600nm,呈橘紅色熒光。

免疫熒光通過(guò)抗體與示蹤物質(zhì)結(jié)合,利用抗原-抗體結(jié)合反應(yīng),進(jìn)而對(duì)抗原所在的細(xì)胞或組織進(jìn)行定性或定量。由于熒光素所發(fā)的熒光可在熒光顯微鏡下檢出,熒光素受激發(fā)光的照射而發(fā)出明亮的熒光,可以看見(jiàn)熒光所在的細(xì)胞或組織,利用定量技術(shù)測(cè)定含量,從而可對(duì)抗原進(jìn)行細(xì)胞定性和定位分析。細(xì)胞免疫熒光用途:快速直觀顯示所檢測(cè)蛋白的細(xì)胞定位。材料與儀器:樣品:貼壁細(xì)胞;試劑:4% 組織固定液,PBS,Triton X-100,BSA,熒光二抗,免疫熒光染色二抗稀釋液,抗熒光猝滅封片液,0.25% 胰酶;器材:6/12/24 孔板,細(xì)胞爬片(蓋玻片),載玻片,15 ml 離心管。免疫熒光技術(shù)在生物學(xué)研究、醫(yī)學(xué)診斷和藥物開發(fā)等領(lǐng)域具有普遍應(yīng)用。

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細(xì)胞免疫熒光:細(xì)胞種板與細(xì)胞爬片制備:1) 細(xì)胞密度在90%-95%左右,用預(yù)熱胰酶消化細(xì)胞后重懸細(xì)胞于完全培養(yǎng)基中,充分吹打,使之成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)。2)取細(xì)胞培養(yǎng)12孔板,在每個(gè)孔放爬片的位置根據(jù)爬片的大小,先在每個(gè)孔里準(zhǔn)備放爬片的位置滴幾滴培養(yǎng)基,然后將爬片置于液滴上,壓緊,使爬片與培養(yǎng)皿靠培養(yǎng)基的張力粘合到一起,防止加細(xì)胞懸液時(shí)爬片漂起,造成雙層細(xì)胞貼片。根據(jù)自己的需要選擇合適的細(xì)胞密度種入12孔板培養(yǎng)板內(nèi)。3)24h或者48h后,根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)速度快慢,觀察判斷細(xì)胞密度,約90%時(shí)進(jìn)行細(xì)胞免疫熒光。在1941年,Coons初次成功地使用熒光素作為標(biāo)記物質(zhì)進(jìn)行免疫熒光實(shí)驗(yàn)。CD80免疫檢測(cè)

免疫熒光技術(shù)可以用于研究細(xì)胞內(nèi)分子的相互作用。LC3免疫組化

事實(shí)上,私營(yíng)有限責(zé)任公司發(fā)展的這個(gè)案例,也是整個(gè)行業(yè)打造爆款的縮影。傳統(tǒng)私營(yíng)有限責(zé)任公司企業(yè)家“牽手”社交網(wǎng)絡(luò),從公域流量轉(zhuǎn)變?yōu)樗接蛄髁康淖儸F(xiàn),是今年整個(gè)行業(yè)的主旋律。不忘初心、牢記使命,中國(guó)將持續(xù)增強(qiáng)銷售的市場(chǎng)創(chuàng)新能力,積極尋求內(nèi)外部的合作機(jī)會(huì),持續(xù)發(fā)揮業(yè)務(wù)行家、技術(shù)行家和運(yùn)營(yíng)行家的優(yōu)勢(shì),為全國(guó)乃至全球客戶提供高度專業(yè)的一體化行業(yè)應(yīng)用解決方案,更好的服務(wù)社會(huì)創(chuàng)造價(jià)值,實(shí)現(xiàn)與客戶共贏。私營(yíng)有限責(zé)任公司企業(yè)推出了分布式社交電商模式,將為品牌商提供完善的運(yùn)營(yíng)和流量支持,使其以較低的流量成本和加入成本,即可開展社交業(yè)務(wù)。據(jù)了解,憑借高速發(fā)展的態(tài)勢(shì),業(yè)內(nèi)的私營(yíng)有限責(zé)任公司企業(yè)已經(jīng)擴(kuò)大了多個(gè)領(lǐng)域。作為中國(guó)優(yōu)先的數(shù)字化服務(wù)平臺(tái),私營(yíng)有限責(zé)任公司企業(yè)積極探索勇于實(shí)踐,助力公益扶貧向可持續(xù)的系統(tǒng)性扶貧轉(zhuǎn)變、由建立供應(yīng)鏈向建立生態(tài)圈轉(zhuǎn)變、由消費(fèi)互聯(lián)網(wǎng)向產(chǎn)業(yè)互聯(lián)網(wǎng)轉(zhuǎn)變。LC3免疫組化

上海睿寶和生物科技有限公司目前已成為一家集產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、銷售相結(jié)合的服務(wù)型企業(yè)。公司成立于2018-12-11,自成立以來(lái)一直秉承自我研發(fā)與技術(shù)引進(jìn)相結(jié)合的科技發(fā)展戰(zhàn)略。公司具有病理檢測(cè)服務(wù),免疫組化檢測(cè)服務(wù),分子檢測(cè)服務(wù),全景掃描服務(wù)等多種產(chǎn)品,根據(jù)客戶不同的需求,提供不同類型的產(chǎn)品。公司擁有一批熱情敬業(yè)、經(jīng)驗(yàn)豐富的服務(wù)團(tuán)隊(duì),為客戶提供服務(wù)。依托成熟的產(chǎn)品資源和渠道資源,向全國(guó)生產(chǎn)、銷售病理檢測(cè)服務(wù),免疫組化檢測(cè)服務(wù),分子檢測(cè)服務(wù),全景掃描服務(wù)產(chǎn)品,經(jīng)過(guò)多年的沉淀和發(fā)展已經(jīng)形成了科學(xué)的管理制度、豐富的產(chǎn)品類型。我們本著客戶滿意的原則為客戶提供病理檢測(cè)服務(wù),免疫組化檢測(cè)服務(wù),分子檢測(cè)服務(wù),全景掃描服務(wù)產(chǎn)品售前服務(wù),為客戶提供周到的售后服務(wù)。價(jià)格低廉優(yōu)惠,服務(wù)周到,歡迎您的來(lái)電!