酚紅葡萄糖肉湯(PhenolRedGlucoseBroth)是一種常用的微生物學培養(yǎng)基,主要用于鑒定細菌是否具有發(fā)酵葡萄糖的能力。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:酚紅葡萄糖肉湯的配方包含月示胨(或稱為蛋白胨)、牛肉浸粉、氯化鈉、葡萄糖和酚紅。其中,月示胨和牛肉浸粉提供氮源、維生素和生長因子;葡萄糖作為可發(fā)酵的糖類;氯化鈉維持滲透壓;酚紅作為pH指示劑。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調節(jié)在7.4±0.1(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進行121℃高壓滅菌10-15分鐘。4.**使用方法**:稱取培養(yǎng)基粉末,溶解于蒸餾水中,分裝試管,每管3ml。5.**質量控制**:接種蠟樣芽孢桿菌后,在厭氧條件下35℃培養(yǎng)24小時,培養(yǎng)基由紅色變?yōu)辄S色,表明細菌發(fā)酵葡萄糖產酸。6.**用途**:酚紅葡萄糖肉湯用于蠟樣芽孢桿菌葡萄糖分解試驗(SN標準),也用于檢測大腸菌群。7.**結果觀察**:如果培養(yǎng)基顏色由紅色變?yōu)辄S色,說明細菌發(fā)酵葡萄糖產酸;如果培養(yǎng)基顏色不變或紅色加深,說明該微生物葡萄糖發(fā)酵陰性。8.**儲存條件**:避光,密封,陰涼干燥處保存。巴氏芽孢桿菌的芽孢具有多層保護結構,包括芽孢外殼和芽孢皮層,這些結構由多種蛋白質組成。ISP Medium 5預裝培養(yǎng)皿
蠟狀芽孢桿菌瓊脂基礎(TSSB)是一種用于分離和培養(yǎng)蠟樣芽孢桿菌(Bacilluscereus)的培養(yǎng)基。以下是它的一些主要特點:1.**成分**:蠟狀芽孢桿菌瓊脂基礎的配方包含胰酪蛋白胨、牛肉浸粉、D-甘露醇、氯化鈉、苯酚紅和瓊脂等成分。其中,胰酪蛋白胨和牛肉浸粉提供碳源和氮源,D-甘露醇作為可發(fā)酵的糖,氯化鈉維持滲透壓,苯酚紅作為pH指示劑,瓊脂作為凝固劑。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調節(jié)在7.2±0.2(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進行121℃高壓滅菌15分鐘。4.**添加劑**:每瓶需配套添加多粘菌素B和50%卵黃乳液使用,每100ml蠟樣芽孢桿菌選擇性瓊脂培養(yǎng)基基礎中添加1支多粘菌素B和2支50%卵黃乳液。5.**用法**:稱取本品43.0g加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝每瓶100ml,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至50℃左右時,每瓶加入10ml50%的無菌卵黃乳液和多粘菌素B10000IU混勻,傾入無菌平皿,備用。6.**菌落特征**:蠟樣芽孢桿菌在TSSB上生長時,菌落通常為微粉紅色,周圍有淡粉紅色沉淀環(huán),這有助于識別蠟樣芽孢桿菌。7.**質量控制**:進行微生物靈敏度試驗時,按標簽用法制備培養(yǎng)基,接種質控菌株,放置36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時。ISP Medium 5預裝培養(yǎng)皿哥倫比亞肉湯為非選擇性培養(yǎng)基,大多數微生物都能在其上生長良好,因此常用于微生物的初步分離和培養(yǎng)。
尿素培養(yǎng)基是一種用于檢測和分離細菌的生化培養(yǎng)基,特別是那些能夠產生脲酶的細菌,如某些變形桿菌和幽門螺旋桿菌。以下是尿素培養(yǎng)基的一些特點和配制方法:1.**配方組成**:-蛋白胨:1.0g-氯化鈉:5.0g-葡萄糖:1.0g-磷酸二氫鉀:2.0g-酚紅:0.012g-瓊脂:20.0g-蒸餾水:1000ml-40%尿素水:5ml2.**配制方法**:-將上述成分(除葡萄糖和尿素外)溶解在蒸餾水中,加熱煮沸,調節(jié)pH至7.2,過濾。-121℃高壓滅菌15分鐘。-冷卻至50-55℃,加入無菌的40%尿素水5ml,混勻。-分裝試管,制成斜面?zhèn)溆谩?.**用途**:-主要用于細菌的脲酶檢測。-用于鑒定變形桿菌屬和其他能夠分解尿素的細菌。4.**培養(yǎng)條件**:-通常在36℃±1℃的條件下培養(yǎng)24-48小時。5.**觀察指標**:-培養(yǎng)基中的酚紅作為pH指示劑,當細菌產生的脲酶分解尿素產生氨時,培養(yǎng)基顏色由黃色變?yōu)榧t色,表示細菌具有脲酶活性。6.**保存條件**:-通常在2-8°C下保存,保質期三年。7.**注意事項**:-避免攝入、吸入、皮膚接觸。-配制過程中應在無菌條件下操作。尿素培養(yǎng)基在微生物學研究和醫(yī)學診斷中有著廣泛的應用,尤其是在檢測和研究能夠分解尿素的細菌方面。
氧化三甲胺(TMAO)培養(yǎng)基是一種專門用于培養(yǎng)和研究某些特定微生物的培養(yǎng)基,尤其是在厭氧菌和一些具有特定代謝途徑的細菌的研究中。以下是TMAO培養(yǎng)基的一些特點:1.**促進特定微生物生長**:TMAO培養(yǎng)基含有氧化三甲胺作為關鍵成分,能夠刺激某些厭氧菌的生長速率和產量,如在胰蛋白胨/酵母提取物培養(yǎng)基中加入TMAO,可以促進葡萄糖的摩爾生長產量翻倍。2.**作為末端電子受體**:TMAO在厭氧菌的代謝過程中充當末端電子受體,促進非氧化菌在無氧條件下的生長。3.**微生物代謝研究**:TMAO培養(yǎng)基用于研究微生物如何將TMAO分解為三甲胺(TMA),這一過程對理解微生物的代謝途徑至關重要。4.**影響培養(yǎng)基理化性質**:微生物在TMAO培養(yǎng)基中的生長可以影響培養(yǎng)基的電導率和pH值,這些變化可以用于監(jiān)測微生物的代謝活動。5.**與心血管疾病相關**:TMAO和其前體物質TMA在心血管疾病中的作用引起了關注,TMAO培養(yǎng)基有助于研究這些代謝物在疾病發(fā)展中的作用。6.**微生物群落影響**:TMAO的代謝與腸道微生物群落的組成和功能密切相關,TMAO培養(yǎng)基可以用于研究腸道微生物如何影響宿主的代謝和健康。巴氏芽孢桿菌的芽孢因其高抵抗力和在惡劣條件下存活的能力,在生物技術領域具有重要的應用潛力。
輕唾瓊脂培養(yǎng)基(MSA)基礎是一種用于分離培養(yǎng)輕型唾液鏈球菌的選擇性培養(yǎng)基。以下是使用輕唾瓊脂培養(yǎng)基(MSA)進行細菌分離和鑒定的步驟:1.**制備培養(yǎng)基**:-稱取90gMSA粉末,加入1000mL蒸餾水或去離子水。-加熱煮沸至完全溶解。-121℃高壓滅菌15分鐘。-冷卻至50-55℃,加入1mL無菌1%亞碲酸鉀溶液,混勻后倒入無菌培養(yǎng)皿中。2.**接種樣本**:-將待測樣本如咽拭子、尿液或其他臨床樣本進行適當的稀釋。-將稀釋后的樣本均勻地涂布在MSA平板上。3.**培養(yǎng)**:-將接種后的培養(yǎng)皿置于35-37°C的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-48小時。4.**觀察菌落生長**:-觀察培養(yǎng)基上生長的菌落,注意菌落的顏色、形態(tài)和大小。-腸球菌在MSA上通常形成藍色-黑色的菌落。5.**挑選可疑菌落**:-挑取可疑的菌落進行純化培養(yǎng)。6.**進行生化試驗**:-對純化后的菌株進行一系列的生化試驗,如糖發(fā)酵試驗、CAMP試驗、膽汁七葉苷試驗等,以進一步鑒定菌種。7.**結果分析**:-根據菌落特征和生化試驗結果,結合菌株的形態(tài)學特征,進行菌種的鑒定。8.**報告結果**:-將鑒定結果整理成報告,包括菌株的名稱、數量和相關的生化特性。普通肉湯培養(yǎng)基通常由蛋白胨、牛肉浸粉(或牛肉膏粉)、氯化鈉和水組成,這些成分為細菌提供必需的碳源等。沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)皿
SLB培養(yǎng)基主要由大豆蛋白胨和酪蛋白消化物組成,提供豐富的氮源和碳源,同時含有必需的維生素和生長因子。ISP Medium 5預裝培養(yǎng)皿
DTA培養(yǎng)基(葡萄糖胰蛋白胨瓊脂)是一種用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,其特點和使用方法如下:1.**用途**:DTA培養(yǎng)基主要用于嗜熱菌芽孢(包括需氧芽孢總數、平酸芽孢和厭氧芽孢)的分離培養(yǎng)。2.**成分**:該培養(yǎng)基的成分通常包括胰酪蛋白胨、葡萄糖、瓊脂和溴甲酚紫。具體成分比例為胰酪蛋白胨10.0g/L、葡萄糖5.0g/L、瓊脂15.0g/L以及溴甲酚紫0.04g/L。3.**pH值**:pH值控制在6.7±0.1(25℃)。4.**檢驗原理**:胰酪蛋白胨提供碳氮源、維生素和生長因子;葡萄糖作為可發(fā)酵的糖,溴甲酚紫作為酸堿指示劑;瓊脂作為凝固劑。5.**配制方法**:稱取30.0gDTA培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,然后在121℃下高壓滅菌15分鐘,備用。6.**使用方法**:在加熱滅菌前,培養(yǎng)基成分應邊攪拌邊溶解于水中。滅菌時間通常要在121℃下保持15~20分鐘,這個時間從中心溫度達到121℃開始計算。7.**結果觀察**:嗜熱脂肪芽孢桿菌在DTA培養(yǎng)基上的生長特征為黃色菌落。8.**微生物靈敏度試驗**:按標簽用法制備培養(yǎng)基,接種質控菌株,放置于55℃需氧培養(yǎng)48小時,以驗證培養(yǎng)基的性能。ISP Medium 5預裝培養(yǎng)皿