亞硫酸鉍(BS)瓊脂培養(yǎng)基是一種用于微生物學(xué)檢驗(yàn)的選擇性培養(yǎng)基,特別適用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng)。它遵循GB/SN/USP標(biāo)準(zhǔn),包括中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(GB)、中國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(SN)和美國(guó)藥典(USP)。**成分**:亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基的配方通常包含蛋白胨、牛肉浸粉、葡萄糖、硫酸亞鐵、磷酸氫二鈉、檸檬酸鉍銨、亞硫酸鈉、煌綠和瓊脂等。pH值一般調(diào)節(jié)至7.5±0.2(25℃)。**檢驗(yàn)原理**:蛋白胨和牛肉浸粉提供碳源、氮源、維生素和礦物質(zhì);葡萄糖提供能源;亞硫酸鉍指示劑抑制革蘭氏陽(yáng)性菌和大腸菌群,但不影響沙門氏菌的生長(zhǎng);磷酸氫二鈉作為緩沖劑;硫酸亞鐵用于產(chǎn)生硫化氫,并與鐵產(chǎn)生沉淀,使陽(yáng)性培養(yǎng)物為具有金屬光澤的棕色到黑色菌落;瓊脂作為凝固劑。**使用方法**:稱取適量的培養(yǎng)基粉末,加入指定量的蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸至完全溶解,冷卻至適宜溫度后傾注平板或試管中,用于接種樣品。**培養(yǎng)特征**:沙門氏菌在亞硫酸鉍瓊脂上生長(zhǎng)時(shí),由于其代謝特性,能夠?qū)喠蛩猁}還原成硫化物并與硫酸亞鐵反應(yīng),使得菌落呈黑色,并可能表現(xiàn)出金屬光澤。當(dāng)大腸桿菌等革蘭氏陰性菌在培養(yǎng)皿上形成典型的紅色或粉紅色菌落時(shí),這表明它們具有葡萄糖發(fā)酵的能力。NAC預(yù)裝培養(yǎng)皿
乳糖蛋白胨培養(yǎng)液(LactosePeptoneBroth)是一種用于微生物學(xué)檢驗(yàn)的培養(yǎng)基,主要用于水中大腸菌群的測(cè)定,符合GB(中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn))的要求。以下是其主要特點(diǎn)和相關(guān)信息:1.**成分**:通常包含蛋白胨、牛肉膏粉、乳糖、氯化鈉和溴甲酚紫等。蛋白胨和牛肉膏粉提供碳氮源及礦物質(zhì);乳糖作為可發(fā)酵的糖類;氯化鈉維持均衡的滲透壓;溴甲酚紫作為pH指示劑,酸性時(shí)呈黃色,堿性時(shí)呈紫色。2.**檢驗(yàn)原理**:乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中的乳糖是大腸菌群可發(fā)酵的糖類,發(fā)酵后產(chǎn)生酸性物質(zhì),導(dǎo)致溴甲酚紫顏色變化,從而可以觀察到產(chǎn)酸現(xiàn)象。同時(shí),某些菌種如大腸桿菌還能產(chǎn)生氣體。3.**使用方法**:稱取適量的培養(yǎng)基粉末,加入蒸餾水或去離子水,加熱煮沸至完全溶解,分裝后進(jìn)行高壓滅菌。然后,將處理好的水樣接種到培養(yǎng)基中,進(jìn)行培養(yǎng)并觀察結(jié)果。4.**質(zhì)量控制**:通過接種特定的質(zhì)控菌株,如大腸埃希氏菌ATCC25922和鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028,進(jìn)行培養(yǎng)并觀察結(jié)果。大腸埃希氏菌應(yīng)表現(xiàn)出良好的生長(zhǎng),產(chǎn)酸產(chǎn)氣;而鼠傷寒沙門氏菌則不產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。5.**儲(chǔ)存條件**:應(yīng)貯存于避光、陰涼干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期通常為三年。改良TJA平板VRBA培養(yǎng)基提供了一種簡(jiǎn)便而有效的方法,用于選擇性地富集和分離腸道細(xì)菌。
溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養(yǎng)基(CetrimideAgarMedium)是一種專門用于分離和培養(yǎng)銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)的選擇性培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**選擇性培養(yǎng)原理**:培養(yǎng)基中的溴化十六烷基三甲銨(Cetrimide)作為一種季銨鹽陽(yáng)離子表面活性劑,對(duì)多種革蘭氏陽(yáng)性菌和部分革蘭氏陰性菌具有抑制作用,而銅綠假單胞菌對(duì)其具有一定耐受性,因此能夠在這種培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。2.**營(yíng)養(yǎng)成分**:明膠胰酶水解物和甘油為銅綠假單胞菌的生長(zhǎng)提供所需的碳、氮源、維生素和生長(zhǎng)因子。3.**無(wú)機(jī)鹽作用**:氯化鎂和硫酸鉀的添加可以促進(jìn)綠膿菌素的產(chǎn)生,并幫助維持培養(yǎng)基的滲透壓。4.**色素生成**:銅綠假單胞菌在該培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí),會(huì)產(chǎn)生兩種水溶性色素——黃色的熒光素和綠色的綠膿菌素,使菌落呈現(xiàn)特征性的黃綠色。5.**應(yīng)用范圍**:廣泛應(yīng)用于藥品、化妝品、食品、飲用水和醫(yī)院環(huán)境樣品中銅綠假單胞菌的檢測(cè)和分離。6.**使用方法**:通常按照培養(yǎng)基包裝上的說明進(jìn)行配制,121℃高壓滅菌后,冷卻至適當(dāng)溫度倒平板使用。7.**質(zhì)量控制**:使用標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行靈敏度測(cè)試,確保培養(yǎng)基的選擇性和培養(yǎng)效果,如銅綠假單胞菌ATCC9027在培養(yǎng)基上應(yīng)表現(xiàn)為灰白色,扁平,濕潤(rùn)菌落。
品紅亞硫酸鈉液體培養(yǎng)基(EndoAgar),也稱為遠(yuǎn)藤瓊脂培養(yǎng)基,是一種用于微生物學(xué)檢驗(yàn)的選擇性培養(yǎng)基,主要用于飲用水和水源中總大腸菌群的選擇性分離和確證,符合GB(中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn))的要求。**主要成分**:-蛋白胨:10.0g-牛肉粉:5.0g-酵母粉:5.0g-磷酸氫二鉀:3.5g-乳糖:10.0g-瓊脂:13.0g-堿性品紅:1.0g-亞硫酸鈉:5.0g-pH值:7.2-7.4(25℃)**檢驗(yàn)原理**:-蛋白胨、牛肉粉、酵母粉提供微生物生長(zhǎng)所需的碳氮源、維生素和礦物質(zhì)。-乳糖作為可發(fā)酵的糖類,用于檢測(cè)細(xì)菌的乳糖發(fā)酵能力。-亞硫酸鈉能將堿性品紅還原,使其褪色。-發(fā)酵乳糖的細(xì)菌產(chǎn)生乙醛,在存在堿性品紅的情況下乙醛與亞硫酸鈉結(jié)合形成紅色菌落。-快速發(fā)酵乳糖的細(xì)菌產(chǎn)生金屬光澤,不發(fā)酵乳糖的細(xì)菌形成無(wú)色透明菌落。**使用方法**:-稱取本品52.5g,加入20mL無(wú)水乙醇和980mL蒸餾水(可根據(jù)培養(yǎng)需要擴(kuò)大或縮小產(chǎn)品用量),加熱攪拌溶解。-按需分裝,116℃高壓滅菌20分鐘,備用。-質(zhì)控菌液按國(guó)標(biāo)等標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備而成。-取相應(yīng)菌液按涂布或劃線方式接種于培養(yǎng)基中。-將接好菌的平板倒置放入恒溫培養(yǎng)箱,于36±1℃需氧培養(yǎng)24±2小時(shí),觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。VRBA也被用于監(jiān)測(cè)食品和水的衛(wèi)生質(zhì)量,以及在臨床微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行一些腸道細(xì)菌的鑒定工作。
亞硒酸鹽胱氨酸(SC)培養(yǎng)基是一種選擇性增菌培養(yǎng)基,主要用于沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)。以下是其特點(diǎn)介紹:1.**成分**:SC培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、乳糖、亞硒酸氫鈉、磷酸氫二鈉和L-胱氨酸。蛋白胨提供碳源和氮源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,亞硒酸氫鈉用于抑制革蘭氏陽(yáng)性菌和非沙門氏菌的大多數(shù)革蘭氏陰性腸道菌,磷酸氫二鈉作為緩沖劑,L-胱氨酸作為還原劑。2.**檢驗(yàn)原理**:SC培養(yǎng)基的設(shè)計(jì)原理在于其成分能夠滿足沙門氏菌生長(zhǎng)的需求,同時(shí)抑制其他非目標(biāo)細(xì)菌的生長(zhǎng)。3.**配制方法**:SC培養(yǎng)基的配制方法是稱取23g干粉,加入1升蒸餾水或去離子水,攪拌加熱至完全溶解。配制過程中應(yīng)避免高壓滅菌,以免影響培養(yǎng)基的有效成分。4.**使用注意事項(xiàng)**:SC培養(yǎng)基比較好現(xiàn)配現(xiàn)用,或在4℃下短期保存。在室溫下,尤其是夏季,培養(yǎng)基容易出現(xiàn)顏色變化,導(dǎo)致增菌效果減退。5.**顏色變化**:過分加熱或反復(fù)加熱會(huì)使培養(yǎng)基顏色變深,影響使用效果。因此,配制過程中只能輕微煮沸,并且要迅速用涼水冷卻。6.**保存**:開封后的SC培養(yǎng)基比較好存放于2℃-8℃環(huán)境下,以延長(zhǎng)使用時(shí)間。EMB培養(yǎng)基的特點(diǎn)是它對(duì)大腸桿菌等產(chǎn)酸革蘭氏陰性菌的選擇性較強(qiáng)。Dubos油酸瓊脂培養(yǎng)皿
接種: 使用無(wú)菌的技術(shù)在瓊脂培養(yǎng)基表面接種待測(cè)樣品,可以是從食品、水樣或其他來源收集的微生物樣品。NAC預(yù)裝培養(yǎng)皿
結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(又稱為紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂,Kovac'sAgar)是一種選擇性培養(yǎng)基,用于分離和鑒定腸道細(xì)菌,尤其是大腸桿菌和其他發(fā)酵乳糖的革蘭氏陰性桿菌。以下是這種培養(yǎng)基的一些特點(diǎn):1.**選擇性**:膽鹽成分具有抑制某些細(xì)菌生長(zhǎng)的作用,特別是對(duì)革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌。2.**指示劑**:結(jié)晶紫和中性紅作為pH指示劑,可以反映細(xì)菌發(fā)酵糖類產(chǎn)生的酸性代謝產(chǎn)物。3.**成分**:包含葡萄糖作為可發(fā)酵的碳源,乳糖可能作為次要碳源,膽鹽作為選擇性抑制劑,結(jié)晶紫和中性紅作為顏色指示劑,以及瓊脂作為凝固劑。4.**pH敏感性**:在細(xì)菌代謝過程中,如果產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物,會(huì)使培養(yǎng)基的pH下降,導(dǎo)致顏色變化。5.**菌落特征**:發(fā)酵乳糖的細(xì)菌會(huì)產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物,導(dǎo)致菌落周圍出現(xiàn)紫色環(huán),而不發(fā)酵乳糖的細(xì)菌則不會(huì)產(chǎn)生這種顏色變化。6.**應(yīng)用**:用于臨床樣本、食品樣本和其他環(huán)境樣本中的大腸桿菌和其他發(fā)酵乳糖的革蘭氏陰性桿菌的分離和鑒定。7.**制備方法**:通常按照制造商提供的配方稱取培養(yǎng)基粉末,溶解在蒸餾水中,加熱至沸騰以確保瓊脂完全溶解,然后分裝、滅菌,并在冷卻至適當(dāng)溫度后倒板。NAC預(yù)裝培養(yǎng)皿