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Kovacs氏靛基質(zhì)試劑是一種用于吲哚(靛基質(zhì))試驗的試劑,其特點如下:1.**應(yīng)用領(lǐng)域**:主要用于鑒定腸系細菌,如大腸桿菌等,通過檢測細菌分解色氨酸生成的吲哚來進行鑒定。2.**反應(yīng)原理**:某些細菌能夠分解蛋白胨中的色氨酸,生成吲哚。吲哚與試劑中的對二甲氨基苯甲醛結(jié)合,形成玫瑰吲哚,產(chǎn)生紅色化合物,從而進行顯色反應(yīng)。3.**操作步驟**:首先將純培養(yǎng)物接種于適宜的培養(yǎng)基中,如色氨酸肉湯或胰蛋白水培養(yǎng)基,然后在36±1℃下培養(yǎng)24±2小時。之后加入2-4滴Kovacs試劑,混勻后立即觀察或放置室溫5-10分鐘觀察結(jié)果。4.**結(jié)果判斷**:陽性反應(yīng)表現(xiàn)為培養(yǎng)基上部有一紅色環(huán),而陰性反應(yīng)則為黃色、桔黃色或棕色。5.**試劑盒組成**:Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒包含溶液A,配制依據(jù)是將5g對二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中,然后緩慢加入25mL濃鹽酸。6.**產(chǎn)品規(guī)格與價格**:以青島海博生物提供的產(chǎn)品為例,產(chǎn)品規(guī)格為5ml*2,價格為35元,保質(zhì)期為一年。7.**應(yīng)用范圍**:除了用于病原細菌的鑒定,還可用于食品衛(wèi)生檢測、環(huán)境控制、食品毒性檢測、水中大腸桿菌檢測、食品過敏性檢測、食品生產(chǎn)環(huán)境的清潔檢測、菌落計數(shù)及控制系統(tǒng)。去氧膽酸鹽瓊脂含有去氧膽酸鹽,可以選擇性地抑制一些腸道細菌的生長,從而使一些其他的細菌能容易地生長。DCA平板
煌綠乳糖膽鹽肉湯(BrilliantGreenLactoseBileBroth,簡稱BGLB)是一種用于微生物學(xué)檢驗的選擇性培養(yǎng)基,主要用于大腸菌群的確證試驗。以下是其主要特點和相關(guān)信息:1.**成分**:BGLB培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、乳糖、牛膽粉和煌綠。蛋白胨提供碳氮源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,牛膽粉和煌綠則用于抑制非腸桿菌科細菌的生長。2.**配方**:每升培養(yǎng)基中通常包含10.0g蛋白胨、10.0g乳糖、20.0g牛膽粉和0.0133g煌綠,pH值調(diào)節(jié)至7.2±0.1(25℃)。3.**檢驗原理**:蛋白胨提供微生物生長所需的碳氮源;乳糖作為可發(fā)酵的糖類;煌綠是一種具有抑菌能力的染料,牛膽粉和煌綠抑制非腸桿菌科細菌。4.**使用方法**:稱取40.0gBGLB培養(yǎng)基,加入1000ml蒸餾水中,煮沸溶解,分裝到有玻璃小倒管的試管中,每管10ml,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。5.**質(zhì)量控制**:通過接種特定的質(zhì)控菌株,如大腸埃希氏菌ATCC25922、弗氏檸檬酸桿菌ATCC43864、糞腸球菌ATCC29212等,進行培養(yǎng)并觀察結(jié)果。大腸埃希氏菌和弗氏檸檬酸桿菌在BGLB培養(yǎng)基中應(yīng)表現(xiàn)出生長,而糞腸球菌則應(yīng)不生長或生長微弱。馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)皿大腸桿菌在DC培養(yǎng)基上產(chǎn)生典型的反應(yīng),表現(xiàn)為產(chǎn)生黑色素沉淀。
大豆酪蛋白肉湯培養(yǎng)基(胰酪胨大豆肉湯)是一種廣泛應(yīng)用于微生物培養(yǎng)的通用培養(yǎng)基,它具備以下特點:1.**成分**:該培養(yǎng)基主要由胰蛋白胨、大豆蛋白胨、氯化鈉、磷酸氫二鉀、葡萄糖和亞硫酸鐵組成,其中胰蛋白胨和大豆蛋白胨提供氮源、維生素和生長因子,氯化鈉維持滲透壓平衡,磷酸氫二鉀作為緩沖劑,葡萄糖提供碳源,亞硫酸鐵則用于抑制非目標(biāo)細菌的生長。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值控制在7.3±0.2,以適應(yīng)微生物生長的需要。3.**應(yīng)用**:大豆酪蛋白肉湯培養(yǎng)基特別適用于沙門氏菌的前增菌培養(yǎng),也適用于其他多種微生物的培養(yǎng),包括需氧菌和厭氧菌。4.**使用方法**:通常按照一定的比例稱取培養(yǎng)基粉末,溶解在蒸餾水中,經(jīng)過高溫滅菌后使用。例如,可以稱取30.0g培養(yǎng)基粉末,溶解在1000mL蒸餾水中,分裝后進行高壓滅菌。5.**質(zhì)控**:該培養(yǎng)基可用于微生物質(zhì)控,例如接種傷寒沙門氏菌和鼠傷寒沙門氏菌,觀察其生長情況和特征性反應(yīng),如渾濁度等。6.**儲存與保質(zhì)期**:培養(yǎng)基應(yīng)儲存在干燥、避光的環(huán)境中,并在開封后立即封閉以保持其穩(wěn)定性,通常保質(zhì)期為三年。
亞硒酸鹽胱氨酸(SC)培養(yǎng)基是一種選擇性增菌培養(yǎng)基,主要用于沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)。以下是其特點介紹:1.**成分**:SC培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、乳糖、亞硒酸氫鈉、磷酸氫二鈉和L-胱氨酸。蛋白胨提供碳源和氮源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,亞硒酸氫鈉用于抑制革蘭氏陽性菌和非沙門氏菌的大多數(shù)革蘭氏陰性腸道菌,磷酸氫二鈉作為緩沖劑,L-胱氨酸作為還原劑。2.**檢驗原理**:SC培養(yǎng)基的設(shè)計原理在于其成分能夠滿足沙門氏菌生長的需求,同時抑制其他非目標(biāo)細菌的生長。3.**配制方法**:SC培養(yǎng)基的配制方法是稱取23g干粉,加入1升蒸餾水或去離子水,攪拌加熱至完全溶解。配制過程中應(yīng)避免高壓滅菌,以免影響培養(yǎng)基的有效成分。4.**使用注意事項**:SC培養(yǎng)基比較好現(xiàn)配現(xiàn)用,或在4℃下短期保存。在室溫下,尤其是夏季,培養(yǎng)基容易出現(xiàn)顏色變化,導(dǎo)致增菌效果減退。5.**顏色變化**:過分加熱或反復(fù)加熱會使培養(yǎng)基顏色變深,影響使用效果。因此,配制過程中只能輕微煮沸,并且要迅速用涼水冷卻。6.**保存**:開封后的SC培養(yǎng)基比較好存放于2℃-8℃環(huán)境下,以延長使用時間。乙酰胺瓊脂培養(yǎng)皿由對乙酰胺、大豆胨、瓊脂等成分組成,為微生物的生長提供了營養(yǎng)和適宜的生長環(huán)境。
pH7.4磷酸鹽緩沖液(Phosphate-BufferedSaline,PBS)是一種廣而使用的生物化學(xué)和分子生物學(xué)實驗中的緩沖溶液,具有以下特點:1.**pH穩(wěn)定性**:pH值穩(wěn)定在7.4左右,接近人體血液的pH值,適合細胞和生物分子的生理條件。2.**成分**:主要由磷酸二氫鈉(NaH2PO4)和磷酸氫二鈉(Na2HPO4)組成,這兩種鹽在溶液中可以形成緩沖體系,維持pH值的穩(wěn)定。3.**離子強度**:PBS具有一定的離子強度,可以模擬細胞外液的離子環(huán)境,有助于保持細胞和蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性。4.**滲透壓**:PBS的滲透壓接近人體生理鹽水的滲透壓,適合用于細胞懸浮和洗滌,不會引起細胞的滲透壓變化。5.**清潔性**:PBS通常使用去離子水或蒸餾水配制,減少雜質(zhì)和離子對實驗的干擾。6.**兼容性**:PBS與多種生物分子和細胞培養(yǎng)基兼容,常用于細胞培養(yǎng)、免疫學(xué)實驗、蛋白質(zhì)提取和分析等。7.**無菌性**:實驗用的PBS通常需要經(jīng)過高壓滅菌或過濾除菌處理,以保證實驗的無菌條件。8.**多功能性**:除了作為緩沖溶液外,PBS還可以用于稀釋試劑、洗滌實驗器材和樣品等。9.**易于配制**:PBS的配制相對簡單,可以根據(jù)需要調(diào)整磷酸鹽的濃度來改變緩沖能力。去氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基中含有去氧膽酸鹽,這是一種天然的膽酸鹽,能夠抑制大多數(shù)革蘭氏陽性菌的生長。R2A平板
改良Letheen瓊脂培養(yǎng)基的配方進行了調(diào)整,以適應(yīng)更多的微生物生長需求。DCA平板
溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養(yǎng)基(CetrimideAgarMedium)是一種專門用于分離和培養(yǎng)銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)的選擇性培養(yǎng)基,具有以下特點:1.**選擇性培養(yǎng)原理**:培養(yǎng)基中的溴化十六烷基三甲銨(Cetrimide)作為一種季銨鹽陽離子表面活性劑,對多種革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性菌具有抑制作用,而銅綠假單胞菌對其具有一定耐受性,因此能夠在這種培養(yǎng)基中生長。2.**營養(yǎng)成分**:明膠胰酶水解物和甘油為銅綠假單胞菌的生長提供所需的碳、氮源、維生素和生長因子。3.**無機鹽作用**:氯化鎂和硫酸鉀的添加可以促進綠膿菌素的產(chǎn)生,并幫助維持培養(yǎng)基的滲透壓。4.**色素生成**:銅綠假單胞菌在該培養(yǎng)基中生長時,會產(chǎn)生兩種水溶性色素——黃色的熒光素和綠色的綠膿菌素,使菌落呈現(xiàn)特征性的黃綠色。5.**應(yīng)用范圍**:廣泛應(yīng)用于藥品、化妝品、食品、飲用水和醫(yī)院環(huán)境樣品中銅綠假單胞菌的檢測和分離。6.**使用方法**:通常按照培養(yǎng)基包裝上的說明進行配制,121℃高壓滅菌后,冷卻至適當(dāng)溫度倒平板使用。7.**質(zhì)量控制**:使用標(biāo)準(zhǔn)菌株進行靈敏度測試,確保培養(yǎng)基的選擇性和培養(yǎng)效果,如銅綠假單胞菌ATCC9027在培養(yǎng)基上應(yīng)表現(xiàn)為灰白色,扁平,濕潤菌落。DCA平板