RV沙氏增菌肉湯(RappaportVassiliadisSalmonellaEnrichmentBroth,RVS肉湯)是一種用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)的培養(yǎng)基。它的主要特點如下:1.**成分**:RV沙氏增菌肉湯包含大豆蛋白胨、乳糖、葡萄糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、孔雀石綠、氯化鎂、煌綠等成分,這些成分有助于抑制其他非沙門氏菌的生長,同時促進沙門氏菌的生長。2.**用途**:主要用于沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng),特別是在食品、水和牛奶等樣品中檢測沙門氏菌時。3.**配制方法**:通常需要稱取一定量的干粉培養(yǎng)基,加入指定量的蒸餾水或去離子水,攪拌加熱至完全溶解,然后進行高壓滅菌。4.**培養(yǎng)條件**:RV沙氏增菌肉湯通常在35-37°C的溫度下培養(yǎng),培養(yǎng)時間根據(jù)實驗需求而定。5.**效果**:在RV沙氏增菌肉湯中,沙門氏菌能夠良好生長,而其他一些細菌則受到抑制。6.**質(zhì)量控制**:使用時需要進行質(zhì)量控制,確保培養(yǎng)基的制備和使用符合標準操作程序。7.**儲存**:RV沙氏增菌肉湯的干粉形式應在干燥、避光的條件下儲存,通常在4-10度的環(huán)境中保存,以保持其有效性。8.**有效期**:在適當?shù)膬Υ鏃l件下,RV沙氏增菌肉湯的有效期通常為三年。改良Letheen瓊脂培養(yǎng)基的配方根據(jù)具體的應用需求可能會有所不同。結晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBDA)預裝培養(yǎng)皿
Endo培養(yǎng)基,也稱為遠藤氏瓊脂或EndoAgar,是一種用于微生物學檢驗的選擇性培養(yǎng)基,主要用于大腸菌群的檢測。以下是Endo培養(yǎng)基的一些基本信息:**配方**:Endo培養(yǎng)基的典型配方包含蛋白胨、乳糖、磷酸氫二鉀、亞硫酸鈉和堿性品紅等成分,以及作為凝固劑的瓊脂。具體的配方比例可能根據(jù)不同的供應商有所變化。**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)至7.3±0.1(25℃)。**用途**:Endo培養(yǎng)基用于大腸菌群的檢測,特別是在水質(zhì)檢測中,如生活飲用水及其水源水中的總大腸菌群。**使用方法**:通常稱取適量的培養(yǎng)基粉末,加入指定量的蒸餾水或去離子水中,并添加無水乙醇,然后進行高壓滅菌。滅菌結束后,將培養(yǎng)基搖勻以防瓊脂沉積,備用。**培養(yǎng)基特性**:Endo培養(yǎng)基中的亞硫酸鈉和品紅對革蘭氏陽性菌有弱抑制作用。乳糖發(fā)酵型大腸桿菌和大腸菌群在該培養(yǎng)基上產(chǎn)生乙醛和酸,乙醛與亞硫酸品紅化合物反應,釋放出品紅,使菌落和周圍培養(yǎng)基變紅色。對于大腸桿菌,該反應可能過于強烈,使得品紅結晶析出,給予菌落長久性的金色金屬光澤。**儲存條件**:Endo培養(yǎng)基通常需要在密封、陰涼干燥處保存,避免攝入、呼入和皮膚接觸。馬丁瓊脂預裝培養(yǎng)皿在臨床實驗室中,BHI Agar常用于從患者樣本(如血液、尿液、腦脊液等)中分離和培養(yǎng)病原微生物。
亞硒酸鹽胱氨酸(SC)培養(yǎng)基是一種選擇性增菌培養(yǎng)基,主要用于沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)。以下是其特點介紹:1.**成分**:SC培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、乳糖、亞硒酸氫鈉、磷酸氫二鈉和L-胱氨酸。蛋白胨提供碳源和氮源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,亞硒酸氫鈉用于抑制革蘭氏陽性菌和非沙門氏菌的大多數(shù)革蘭氏陰性腸道菌,磷酸氫二鈉作為緩沖劑,L-胱氨酸作為還原劑。2.**檢驗原理**:SC培養(yǎng)基的設計原理在于其成分能夠滿足沙門氏菌生長的需求,同時抑制其他非目標細菌的生長。3.**配制方法**:SC培養(yǎng)基的配制方法是稱取23g干粉,加入1升蒸餾水或去離子水,攪拌加熱至完全溶解。配制過程中應避免高壓滅菌,以免影響培養(yǎng)基的有效成分。4.**使用注意事項**:SC培養(yǎng)基比較好現(xiàn)配現(xiàn)用,或在4℃下短期保存。在室溫下,尤其是夏季,培養(yǎng)基容易出現(xiàn)顏色變化,導致增菌效果減退。5.**顏色變化**:過分加熱或反復加熱會使培養(yǎng)基顏色變深,影響使用效果。因此,配制過程中只能輕微煮沸,并且要迅速用涼水冷卻。6.**保存**:開封后的SC培養(yǎng)基比較好存放于2℃-8℃環(huán)境下,以延長使用時間。
木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂(XLD)是一種選擇性培養(yǎng)基,用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng),以下是其特點:1.**用途**:專門用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng),也適用于其他腸道菌的選擇性分離。2.**成分**:包含酵母浸粉、L-賴氨酸、乳糖、蔗糖、木糖、氯化鈉、硫代硫酸鈉、檸檬酸鐵銨、去氧膽酸鹽、苯酚紅和瓊脂,pH值控制在7.4±0.2(25℃)。3.**檢驗原理**:酵母浸粉提供維生素和輔助因子,木糖、乳糖和蔗糖作為可發(fā)酵碳源。賴氨酸的加入有助于鑒別沙門氏菌。沙門氏菌發(fā)酵木糖產(chǎn)酸,產(chǎn)生的脫羧酶使賴氨酸脫羧,導致pH升高。硫代硫酸鈉及檸檬酸鐵銨與硫化氫反應,產(chǎn)生黑色硫化鐵,苯酚紅作為pH指示劑,去氧膽酸鹽抑制革蘭氏陽性菌的生長。4.**用法**:稱取57g培養(yǎng)基,溶解在1000ml蒸餾水中,不要過分加熱,冷至50-55℃時傾入無菌平皿,部分開蓋干燥2小時,然后蓋上備用。無需高壓滅菌,在24小時內(nèi)使用。5.**微生物質(zhì)控**:使用質(zhì)控菌株進行微生物靈敏度試驗,如腸炎沙門氏菌CMCC50760、大腸埃希氏菌ATCC25922、福氏志賀氏菌CMCC51572等,觀察其在XLD培養(yǎng)基上的生長特征。通過進一步的生化測試,如氧化/發(fā)酵葡萄糖測試、花青素鑒定等,來進一步確認分離的菌株是否為目標腸道菌。
pH7.4磷酸鹽緩沖液(Phosphate-BufferedSaline,PBS)是一種廣而使用的生物化學和分子生物學實驗中的緩沖溶液,具有以下特點:1.**pH穩(wěn)定性**:pH值穩(wěn)定在7.4左右,接近人體血液的pH值,適合細胞和生物分子的生理條件。2.**成分**:主要由磷酸二氫鈉(NaH2PO4)和磷酸氫二鈉(Na2HPO4)組成,這兩種鹽在溶液中可以形成緩沖體系,維持pH值的穩(wěn)定。3.**離子強度**:PBS具有一定的離子強度,可以模擬細胞外液的離子環(huán)境,有助于保持細胞和蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性。4.**滲透壓**:PBS的滲透壓接近人體生理鹽水的滲透壓,適合用于細胞懸浮和洗滌,不會引起細胞的滲透壓變化。5.**清潔性**:PBS通常使用去離子水或蒸餾水配制,減少雜質(zhì)和離子對實驗的干擾。6.**兼容性**:PBS與多種生物分子和細胞培養(yǎng)基兼容,常用于細胞培養(yǎng)、免疫學實驗、蛋白質(zhì)提取和分析等。7.**無菌性**:實驗用的PBS通常需要經(jīng)過高壓滅菌或過濾除菌處理,以保證實驗的無菌條件。8.**多功能性**:除了作為緩沖溶液外,PBS還可以用于稀釋試劑、洗滌實驗器材和樣品等。9.**易于配制**:PBS的配制相對簡單,可以根據(jù)需要調(diào)整磷酸鹽的濃度來改變緩沖能力。通過添加適量的血液,BHI Agar能夠滿足一些苛養(yǎng)菌的生長需求,常用于酵母和霉菌的培養(yǎng)。TSA+卵磷脂+吐溫80預裝培養(yǎng)皿
胰蛋白胨瓊脂培養(yǎng)皿可以根據(jù)微生物的形態(tài)、生長速率、菌落顏色等特征進行初步鑒定。結晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBDA)預裝培養(yǎng)皿
膽鹽乳糖培養(yǎng)基(BL)是一種專門用于增菌培養(yǎng)的微生物培養(yǎng)基,它具有以下特點:1.**用途**:主要用于藥品和生物制品中大腸桿菌、沙門氏菌和綠膿桿菌的增菌培養(yǎng)。2.**成分**:包括蛋白胨、乳糖、牛膽鹽、氯化鈉、磷酸氫二鉀和磷酸二氫鉀。蛋白胨提供碳氮源,乳糖作為可發(fā)酵的糖類,氯化鈉維持滲透壓,磷酸氫二鈉和磷酸二氫鉀作為緩沖劑,牛膽鹽和去氧膽酸鈉作為選擇性抑菌劑。3.**pH值**:通常調(diào)節(jié)至7.4±0.2(25℃)。4.**使用方法**:首先將培養(yǎng)基粉末加入蒸餾水或去離子水,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝后進行高壓滅菌。然后,將樣品處理后加入培養(yǎng)基中,放入恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18至24小時,必要時可延長至48小時,觀察結果。5.**應用**:膽鹽乳糖培養(yǎng)基也用于乳品中大腸菌群的快速檢測研究,通過構建檢測片法和細胞培養(yǎng)瓶劑法,可以快速檢測乳品中的大腸菌群。6.**選擇性**:膽鹽的存在使得培養(yǎng)基能夠選擇性地促進革蘭氏陰性菌的生長,抑制革蘭氏陽性菌的生長,這使得BL培養(yǎng)基在分離和鑒定腸道細菌中非常有用。7.**檢測乳糖發(fā)酵能力**:由于含有乳糖,該培養(yǎng)基能夠用于檢測細菌的乳糖發(fā)酵能力,革蘭氏陰性細菌如大腸桿菌等通常能夠?qū)⑷樘前l(fā)酵產(chǎn)生酸或氣體。結晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBDA)預裝培養(yǎng)皿