CD81外泌體慢病毒包裝

雖然外泌體在疾病的診斷上有天然優(yōu)勢，但在臨床應用上仍有一些限制：外泌體的提取方法金標準仍然是差速離心法，但這種方法費時費力且提取效率較低，難以進行臨床推廣和應用；而商業(yè)化的試劑盒質(zhì)量參差不齊，往往導致提取物雜質(zhì)過多，且其售價較高。外泌體的定量是采用顆粒濃度定量，蛋白濃度定量，亦或是核酸濃度定量，目前仍存有爭議。由于傳統(tǒng)的內(nèi)參并不適用于外泌體，在實時熒光定量PCR檢測靶分子含量時內(nèi)參的選擇尚沒有統(tǒng)一的標準。外泌體分子標志物的研究還處于初級階段。目前外泌體研究的整個流程中成本都很高。外泌體本身的惰性相當高，但它們與細胞膜融合可將所攜帶的物質(zhì)和信號傳遞到受體細胞并改變其生物學功能。CD81外泌體慢病毒包裝

外泌體（Exosome），是細胞外囊泡（EV）的一種主要類型，是直徑為30至150nm的納米大小的膜結構，大多數(shù)細胞都會分泌外泌體。外泌體存在于各種生物體液中，通過其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂質(zhì)和代謝物等來發(fā)揮細胞間通訊功能，參與免疫應答、代謝和心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病以及病癥進展等多種生理和病理過程。在內(nèi)體轉變?yōu)槌墒於嗄遗輧?nèi)體（MVE）的過程中，內(nèi)體膜向腔內(nèi)出芽形成腔內(nèi)囊泡（ILV），MVE與細胞膜融合釋放ILV到細胞外，即形成外泌體。牛奶 外泌體外泌體就像是生物界的郵差，可以在細胞間運輸和轉移生物活性分子，是細胞間通訊交流的載體。

外泌體是新型治理劑，瘤轉移是一個包括病細胞侵入、血管中存活和殖民化等多步驟的復雜過程。外泌體能夠影響這個級聯(lián)反應的每一步，因此可作為瘤治理的靶點。瘤細胞在轉移到其他組織時需要在間質(zhì)細胞間移動并到達血管中，在這個過程中，瘤細胞外泌體通過纖維連接蛋白促進瘤細胞的運動性，再通過蛋白酶促進細胞外基質(zhì)的分解、血管生成，進而促進瘤轉移。多數(shù)瘤細胞對轉移的組織具有指向性，而外泌體表面的整合素就是決定其指向性的因子，如外泌體αvβ5整合素決定了對肝臟的指向性，而外泌體α6β4?α6β1整合素決定了對肺部的指向性。

由于特殊的結構和循環(huán)方式，外泌體作為藥物運輸?shù)妮d體具有獨特的優(yōu)勢。例如外泌體的尺寸分布能夠增強滲透滯留效應，從而有選擇性地深入中流組織;其外層磷脂雙分子層可以保護內(nèi)容物不受各種生物酶的影響，維持各種生物分子的活性;外泌體普遍存在于各種體液和組織中，其體積小，結構、組成與細胞膜類似，導致外泌體可以在避開免疫系統(tǒng)監(jiān)督的同時深入組織內(nèi)部，有較好的生物相容性;當采用內(nèi)源外泌體時，能明顯降低其他藥物載體可能引起的有害免疫反應;除此之外，某些細胞來源或經(jīng)特殊修飾過的外泌體具有良好的特異性，可以與特定的qi官或組織結合。細胞外囊泡（EVs）表示了細胞間通訊的一個重要模式。

流式細胞技術針對外泌體的表面抗原標記物進行檢測，能夠實現(xiàn)外泌體的高通量、多通道分析。但是由于外泌體的粒徑小、折射率低，所以采用常規(guī)的流式細胞儀進行檢測時往往需要將外泌體與beads連接以增大表面積、增強反射，操作耗時又費力。Tian等搭建了一種高靈敏度的流式細胞儀(HSFCM)，將可檢測的外泌體粒徑降至40nm，能夠在不連接beads的情況下實現(xiàn)每分鐘10000個外泌體的檢測，并且能夠結合免疫熒光的方法進行外泌體標志蛋白質(zhì)的定量檢測，目前該儀器已商品化。不同肝臟疾病中，細胞分泌的外泌體所攜帶的核酸和蛋白組分之間存在差異。外泌體提取 方法

外泌體的復雜性，為疾病檢測和監(jiān)測提供了一個多指標的診斷窗口。CD81外泌體慢病毒包裝

外泌體介導中流耐藥性:中流細胞來源的外泌體中某些miRNAs和non-codingRNAs(lncRNA)的變化在中流化療抗藥性的發(fā)生中起重要作用。Qu等研究發(fā)現(xiàn)lncRNA可以通過競爭性結合miR-34/miR-449，促進晚期腎細胞ai細胞中的跨膜受體酪氨酸激酶anexelekto(AXL)和tyrosine[1]proteinkinaseMet(c-MET)表達，引發(fā)舒尼替尼耐藥。而外泌體能夠將這一lncRNA運輸至舒尼替尼敏感的ai細胞，從而傳播舒尼替尼的抗性。外泌體中的miR21能夠抑制卵巢ai細胞凋亡，并通過結合肌動蛋白絲相關蛋白凋亡酶激huo因子(apoptoticproteaseactivatingfactor1，APAF1)使得卵巢ai細胞產(chǎn)生對紫杉醇的抗藥性。CD81外泌體慢病毒包裝