與PC-3細胞相比,PC-3細胞外泌體中含有較高豐度的鞘糖脂、鞘磷脂、膽固醇和磷脂酰絲氨酸。外泌體常見的表面蛋白質(zhì)包括四跨膜蛋白(如CD63、CD9、CD81)、黏附蛋白(如L1CAM、LAMP2)、整合素和糖蛋白(如纖連蛋白)等,而外泌體囊泡內(nèi)蛋白質(zhì)則與來源細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)密切相關(guān),包含例如熱休克蛋白(HSP70、HSP90)和細胞骨架蛋白(actin、tubulin、cofilin)等。除此之外,外泌體中還攜帶有來源細胞的miRNAs、mRNAs、non-codingRNAs、circularRNAs和DNA等遺傳物質(zhì)。外泌體的完整囊泡結(jié)構(gòu)能夠保護其內(nèi)部生物分子不受體液中各種酶的影響從而保持其完整性和生物活性。外泌體具有良好的生物兼容性、穩(wěn)定性和內(nèi)在靶向性,使其在藥物遞送方向大有潛力。外泌體的組成成分有哪些
在運輸DOX的研究中,Wei等選擇了已經(jīng)在臨床上使用的未成熟的樹突細胞作為母代細胞,通過化學轉(zhuǎn)染使其分泌的外泌體表面含有Lamp2b,這種蛋白可以與αv整合蛋白特異性iRGD肽結(jié)合,使外泌體對DOX的運輸具有靶向性。將對iRGD肽靶向的外泌體和未經(jīng)靶向性處理的外泌體用DiR染料標記,并分別靜脈注射入移植了人乳腺ai細胞的小鼠體內(nèi),觀察到靶向的外泌體在注射30min后已經(jīng)出現(xiàn)在中流組織處,在注射2h后外泌體的含量高,而未經(jīng)靶向性處理的外泌體在注射后主要集中在肝臟,幾乎很少到達中流組織處,說明對iRGD肽靶向的外泌體具有很好的靶向性。上海鼻腔灌洗液外泌體所有培養(yǎng)的細胞類型均可分泌外泌體。
外泌體在心臟修復中起著關(guān)鍵作用。外泌體通過內(nèi)含的miRNA直接調(diào)控基因表達,將信息傳遞給靶細胞。盡管干細胞移植治理是一種很有前景的修復損傷心臟組織并使其再生的輔助手段,但由于缺血心臟中移植細胞的存活狀況不佳,一般只能觀察到心臟功能的輕度改善。近期的研究表明,干細胞釋放的外泌體可以作為心臟修復潛在的無細胞治理劑。干細胞分泌的外泌體相比干細胞有如下優(yōu)點:(1)旁分泌效應,外泌體作為干細胞旁分泌作用的一種媒介;(2)組合起效,外泌體可與現(xiàn)有的組合物或方法進行組合;(3)個性化,外泌體可改造特定活性成分;(4)靶向特異性,外泌體被工程化改造后,具有靶向特定細胞類型或組織的功能;(5)安全性高,外泌體治理屬于無細胞療法。
外泌體的形成始于細胞內(nèi)陷,成熟于多囊泡胞內(nèi)體,終于膜融合。細胞通過內(nèi)吞作用產(chǎn)生小囊泡,小囊泡融合形成早期胞內(nèi)體(earlyendosome),在多個蛋白的協(xié)同調(diào)控下,早期胞內(nèi)體出芽形成含有多個腔內(nèi)小囊泡的多泡體(multivesicularbodies,MVB),這個過程中這些腔內(nèi)小囊泡(intraluminalvesicles,ILVs)會裝載各種核酸和蛋白質(zhì)等分子,泡內(nèi)體較后在GTPase家族中RAB酶的調(diào)節(jié)下與細胞膜融合。隨后,這些小囊泡會被釋放到細胞外,稱為外泌體。外泌體是通過細胞內(nèi)吞細胞膜融合主動排除的物質(zhì),大小均勻,而微泡是由細胞直接出芽脫落生成,大小不均一。類風濕關(guān)節(jié)炎患者的滑膜成纖維細胞所釋放的外泌體。
所有培養(yǎng)的細胞類型均可分泌外泌體,且外泌體天然存在于體液中,包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應功能的精確分子機制剛剛開始研究。外泌體被視為特異性分泌的膜泡,參與細胞間通訊,對外泌體的研究興趣日益增長,無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā)。外泌體富含膽固醇和鞘磷脂。研究發(fā)現(xiàn)鼠的肥大細胞分泌的exosome可以被人的肥大細胞捕獲,并且其攜帶的mRNA成分可以進入細胞漿中可以被翻譯成蛋白質(zhì),不只是mRNA,exosomes所轉(zhuǎn)移的microRNA同樣具有生物活性,在進入靶細胞后可以靶向調(diào)節(jié)細胞中mRNA的水平。外泌體的異質(zhì)性決定了外泌體藥物遞送系統(tǒng)要根據(jù)所傳遞治理物質(zhì)的類型、目標組織的特點等進行針對性的調(diào)整。上海鼻腔灌洗液外泌體
外泌體觀察到它們可以在體內(nèi)刺激免疫應答。外泌體的組成成分有哪些
Knepper等通過對透射電鏡得到的200個囊泡進行粒徑分析,結(jié)果表明尿液中外泌體的粒徑分布約為35~40nm,磷脂雙分子層厚度約為直徑的1/5~1/10。透射電鏡結(jié)合免疫金標記法能夠得到外泌體表面特征分子的信息,有助于揭示外泌體的產(chǎn)生機制與來源。動態(tài)光散射(dynamiclightscattering,DLS)和納米顆粒跟蹤分析(nanoparticletrackinganaly[1]sis,NTA)都是利用光學手段獲得囊泡粒徑分布的方法。兩者的不同之處在于動態(tài)光散射通過檢測散射光的強度計算得到顆粒粒徑,而納米顆粒跟蹤分析通過追蹤單個粒子的運動軌跡計算得到樣品濃度、粒徑分布等信息。外泌體的組成成分有哪些