江西專業(yè)的HE染色

HE染色樣本組織固定與切片：首先將組織樣本進行常規(guī)的石蠟包埋。在模具中加入液態(tài)石蠟，將待包埋的組織樣本放入石蠟中，確保組織位置規(guī)整。補充少許液態(tài)的石蠟后，進行降溫冷凍，使石蠟變?yōu)楣虘B(tài)達到組織固定的效果，然后使用石蠟切片機進行切片，厚度在４-８um左右。將切完后的組織切片放入載玻片上使用40℃溫水浸泡使組織充分伸展。組織樣本脫蠟：將待測組織樣本切片放于二甲苯中，充分浸泡10min，浸泡完后更換二甲苯繼續(xù)浸泡10min，目的是使用二甲苯將切片中的石蠟溶解，這樣可以在進行染液染色的時候，染液可以充分進入組織種，同時，二甲苯還可以起到透明的作用，使切片更容易觀察。冰凍組織切片的HE染色。江西專業(yè)的HE染色

HE染色就是用蘇木精和伊紅對細胞內(nèi)的核糖體和細胞質(zhì)染色的方法。H:Hematoxylin，蘇木精E:Eosin，伊紅蘇木精（Hematoxylin,H）是一種堿染料，可將細胞核和細胞內(nèi)核糖體染成藍紫色，被堿染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜堿。伊紅（，E）是一種酸染料，能將細胞質(zhì)染成紅色或淡紅色，被酸染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜酸。染色前，須用二甲苯脫去切片中的石蠟，再經(jīng)由高濃度到低濃度酒精，***入蒸餾水，就可染色。 很多細胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿，當(dāng)其衰老時或發(fā)生退行變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。 膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變時，伊紅著色由淺變深。江西專業(yè)的HE染色HE染色，一站式實驗外包服務(wù)平臺。

HE染色顯微鏡下見切片內(nèi)有大量水珠分析以及應(yīng)對原因：切片經(jīng)梯度乙醇處理后沒有完全脫水，導(dǎo)致二甲苯透明中性樹膠封固后殘留大量水分。對策：移去蓋玻片，用二甲苯溶解封固劑如中性樹膠。將切片置入新鮮的無水乙醇中，待切片重新脫水完全后，用新二甲苯透明，中性樹膠封固。所有用于脫水和透明的液體，在使用一定時間以后，應(yīng)即時更換。光鏡下切片某些區(qū)域難以聚焦分析以及應(yīng)對原因：蓋玻片上可能有封固切片的封固劑。對策：移去蓋玻片，重新用干凈的蓋玻片封片

HE染色不管怎么操作，始終無法染色或淡染答：這種情況一般因為組織固定時采用了酸性甲醛;或者組織在甲醛中浸泡時間太長;或者久置的甲醛變性分解為甲酸。補救：防患于未然，要么使用新鮮的中性甲醛固定，要么在存放的甲醛中加一點碳酸鈉中和甲酸。對于已經(jīng)固定的組織可考慮再次固定；對于已經(jīng)制出的片子，染色前采用5%重鉻酸鉀溶液浸泡半小時以上，然后自來水漂洗5min，可改善染色。也可以將切片放入3%硫酸鐵銨溶液中，補充染色媒介，增強蘇木素與組織的親和力(蘇木素染色必須要媒介才能染上，單純的蘇木素與組織的親和力很弱)。心臟組織HE染色如何觀察。

HE染色等常規(guī)染色，組化或是熒光優(yōu)先推薦做石蠟切片。原因：石蠟切片對組織的形態(tài)保存比冰凍切片好，并且對抗原基本無影響。脂質(zhì)染色（油紅O染**odipy染色，尼羅紅染色）必須做冰凍切片，不能做石蠟切片。以下染色必須要新鮮或冷凍組織冰凍切片：ROS染**-半乳糖甘酶染色，ATP染色，膽固醇染色。如果標(biāo)本已經(jīng)放在-80°冰箱冷凍了之后又想要做石蠟切片，將標(biāo)本取出來千萬不要解凍直接放于固定液內(nèi)固定（在固定液內(nèi)邊解凍邊固定）。組織形態(tài)結(jié)構(gòu)保存完好順序：新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定石蠟切片＞組織-80°冷凍后投入固定液內(nèi)固定石蠟切片＞新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定冰凍切片＞組織-80°冷凍后直接冰凍切片。關(guān)于HE染色，你不知道的實驗技巧。江蘇專業(yè)的HE染色外包

HE染色中固定液如何配置。江西專業(yè)的HE染色

HE染色全名蘇木精—伊紅染色法，屬于化學(xué)染色法，其主要依靠蘇木精染液為堿性，主要使細胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍色；伊紅為酸性染料，主要使細胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中的成分著紅色。實驗過程：1、石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自來水洗。2、蘇木素染色：切片入蘇木素染液染3-5min，自來水洗，分化液分化，自來水洗，返藍液返藍，流水沖洗。3、伊紅染色：切片依次入85%、95%的梯度酒精脫水各5min，入伊紅染液中染色5min。4、脫水封片：切片依次放入無水乙醇I5min-無水乙醇II5min-無水乙醇Ⅲ5min-二甲Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明，中性樹膠封片。5、顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。結(jié)果判讀：細胞核呈藍色，細胞質(zhì)呈紅色江西專業(yè)的HE染色