外泌體是胞內(nèi)多泡體與細胞膜融合后,釋放到細胞外的膜性小囊泡,是細胞間信號傳輸?shù)妮d體。2013年,諾貝爾生理學或醫(yī)學獎授予了三位科學家,表彰其在細胞間囊泡運輸調(diào)控機制領域作出突出貢獻,將外泌體研究的熱度推向高潮。由于在臨床上的巨大應用價值,近幾年外泌體成為科研熱點,相關論文發(fā)表數(shù)量呈式增長,2018年外泌體相關SCI論文近2500篇,2019年截止到目前,外泌體相關文獻已將近1000篇。英瀚斯生物,一站式實驗平臺,專業(yè)做外泌體提取檢測。南京實驗醫(yī)學平臺一站式外泌體檢測服務平臺。西藏專業(yè)的外泌體
外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細胞中被發(fā)現(xiàn), 1987年Johnstone將其命名為“exosome”?,F(xiàn)今,其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中 。外泌體富含膽固醇和鞘磷脂。2007年, Valadi等發(fā)現(xiàn)鼠的肥大細胞分泌 的 exosome可以被人的肥大細胞捕獲,并且其攜帶的mRNA成分可以進入細胞漿中可以被翻譯成蛋白質(zhì),不僅只是mRNA,exosomes所轉(zhuǎn)移的microRNA同樣具有生物活性,在進入靶細胞后可以靶向調(diào)節(jié)細胞中mRNA的水平。這一發(fā)現(xiàn)使得研究人員對exosome的研究熱情激增,截止已經(jīng)通過286項研究發(fā)現(xiàn)了41860種蛋白質(zhì)、2838種microRNA、3408種mRNA。山東比較好的外泌體電鏡靠譜的外泌體檢測服務平臺,南京英瀚斯。
外泌體鑒定透射電鏡觀察能夠確認外泌體的形態(tài)學特征,但無法體現(xiàn)樣本中所有外泌體顆粒的粒徑分布情況及整體濃度;流式細胞儀可測定的粒徑大小為150nm以上,并不適合檢測游離的外泌體顆粒。英瀚斯生物采用基于馬爾文Nanosight平臺的納米顆粒追蹤分析 (Nanoparticle Tracking Analysis, NTA) 技術,快速、精細地分析外泌體粒徑分布濃度,為外泌體存在提供有力證據(jù)。目前外泌體的提取方法主要可歸納為以下六種:一是超速離心法;二是過濾離心;三是密度梯度離心法;四是免疫磁珠法;五是PS親和法;六是色譜法。
外泌體鑒定,可以用和表面抗原對應的抗體進行免疫印跡(WB)、透射電子顯微鏡(TEM)、納米粒徑分析(如NanoSight LM10)等來驗證。前面也說了,ISEV建議用表面蛋白來界定所提取的細胞外囊泡,所以用CD63來做WB或ELISA是必不可少的了。使用Wako的PS Capture? Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP)(產(chǎn)品編號298-80601),既能鑒定外泌體的CD63信號,又能進行定量、定性分析,一舉兩得!南京英瀚斯可以做外泌體鑒定。外泌體作為內(nèi)源性的天然藥物載體有著獨特的優(yōu)勢,表面由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成,使其可以穿透許多生物膜,外泌體在分泌細胞和受體細胞間的穿梭介導了細胞間的生物分子傳遞。
外泌體中常見的細胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,是鳥苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細胞的融合,有文獻報道稱RAB4, RAB5和 RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內(nèi)體中,RAB7 和 RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內(nèi)體?,F(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白,外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白(包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等)。外泌體膜上富含參與外泌體運輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63, CD81 和CD9))、熱休克蛋白家族((HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90以及一些細胞特異性的蛋白包括A33(結(jié)腸上皮細胞來源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈細胞來源)、CD86(抗原提呈細胞來源)以及乳凝集素(不成熟的樹突狀細胞)。外泌體檢測服務,一站式生物外泌體檢測服務平臺??孔V的外泌體價格
外泌體存在于人類或動物的各種體液中。西藏專業(yè)的外泌體
外泌體與疾病的研究表明:1.外泌體可能在代謝性疾病的出現(xiàn)以及心血管健康中發(fā)揮作用。2.外泌體生物發(fā)生和神經(jīng)元細胞中分泌小泡的調(diào)節(jié)之間的交集為外泌體和神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機制之間假定的聯(lián)系提供了新的見解。3.與研究外泌體在其他疾病中的作用相比,外泌體在**中的研究進展迅速,而且外泌體與**的幾個主要特征有關。外泌體影響**、**生長和轉(zhuǎn)移、副**綜合征和***耐藥性。外泌體在**進展中的作用可能是動態(tài)的,并且與**的類型、遺傳學和分期有關。西藏專業(yè)的外泌體
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