默克4ml超濾濃縮管代理價(jià)格

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-05-04

7次低速離心,總耗時(shí)~100分鐘(含60分鐘孵育時(shí)間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂(50%懸濁液)和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h,其間可溫和攪動(dòng)促進(jìn)結(jié)合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結(jié)合雜質(zhì)。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液,1,000×g離心1 min。 5. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(可選用50k MWCO型號(hào))。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹脂混勻。4,000×g離心5 min。 7. 加入200μL 中和緩沖液。4,000×g離心15 min。 8. 加上**終需要的緩沖液1.5 mL。4,000×g離心15 min,置換緩沖液的同時(shí)進(jìn)行濃縮。 9. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。超濾濃縮管咨詢服務(wù)電話多少呢。默克4ml超濾濃縮管代理價(jià)格

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外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體:300μg樣品(相當(dāng)于300μg總蛋白)用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋,與protein A/G磁珠共孵育1hr,漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯(lián)在磁珠上(以避免抗體洗脫下來對(duì)外泌體的干擾),請(qǐng)參考默克磁珠操作說明書。(Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3))。推薦使用試劑目錄號(hào)信息:cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經(jīng)建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備操作標(biāo)準(zhǔn),相較于需要昂貴的設(shè)備及繁瑣操作的超速密度梯度離心,用實(shí)驗(yàn)室常見的工具解決外泌體制備的高大上問題,真是惠而不費(fèi),不亦樂乎?徐匯區(qū)Millipore超濾濃縮管代理商超濾濃縮管的好處有很多。

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提供的超濾管是沒有經(jīng)過去內(nèi)***處理的,同時(shí)由于內(nèi)***通常以多聚體的形式存在,大小 在10-1000KD之間不等,在超濾的過程中是無法去除的??稍趯?shí)驗(yàn)前通過先用0.5M NaOH預(yù)清洗,隨后用Milli-Q?水/緩沖液清洗的步驟去除大部分內(nèi)***。關(guān)于針對(duì)Amicon?,Microcon? , Centricon?嘗試過的內(nèi)***去除方案。 Amicon? Ultra超濾管使用的是再生纖維素膜,這種材質(zhì)是蛋白吸附比較低的超濾膜。但是對(duì)于一些疏水性蛋白或非極性蛋白,它們和膜的非特異吸附可能會(huì)增強(qiáng),對(duì)于這種情況,可以嘗試在實(shí)驗(yàn)前對(duì)超濾管進(jìn)行封閉處理。也可以嘗試換成Amicon? Ultra 0.5或2來進(jìn)行實(shí)驗(yàn),通過減小膜面積來降低非特異性吸附。

高通量超濾 MultiScreen?超濾膜板 MultiScreen? 超濾膜板是實(shí)現(xiàn)高通量生物樣品處理的必備工具,能配合自動(dòng)化工作平臺(tái)對(duì)樣品進(jìn)行純化、濃縮、脫鹽或分析前去除蛋白等操作。Millipore 提 供 3 種帶有低吸附超濾膜的 96 孔板,在高通量操作時(shí)樣品吸附損失小而得率高。 優(yōu)點(diǎn)與應(yīng)用: 高通量:96 孔超濾膜板和 384 孔膜板 可靠:低蛋白吸附,蛋白得率高,孔間數(shù)據(jù)均一性好 功能多樣:樣品體積 50-500μL 適用,兼容各種 96/384 孔板標(biāo)準(zhǔn)操作設(shè)備或自動(dòng)化平臺(tái) 用于高通量蛋白鑒定與篩選的濃縮、脫鹽,以及樣品分析前大分子蛋白去除 也可用于核酸(DNA/RNA/PCR 產(chǎn)物 / ***)樣品制備及二代測(cè)序樣品制備超濾濃縮管具體報(bào)價(jià)多少呢。

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加入漂洗緩沖液(體積是樹脂柱床體積的7.5倍)并離心。< 500μL樹脂時(shí)1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時(shí)2,000×g離心4 min。 4. 使用一個(gè)新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液(體積是樹脂柱床體積的5倍)與樹脂混勻并離心。< 500μL樹脂時(shí)1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時(shí)2,000×g離心4 min?;厥展苤屑醇兓玫牡鞍?。 6. 如果是純化抗體,在純化產(chǎn)物中加入中和緩沖液。 * 進(jìn)行較大體積操作時(shí),可以延長(zhǎng)結(jié)合反應(yīng)時(shí)間,并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購(gòu)不帶Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管的Amicon? Pro時(shí)請(qǐng)使用目錄號(hào)ACS500024。上海超濾濃縮管供應(yīng)商。徐匯區(qū)Millipore超濾濃縮管代理商

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Amicon? Ultra超濾管的膜材質(zhì)為默克密理博特有的 Ultracel? 再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴(yán)格,截留分子量明確而精細(xì),蛋白吸附損失基本上大概小。 如果要用超濾的方法分離兩種蛋白,那么這兩個(gè)蛋白的大小需要相差多少? 按照經(jīng)驗(yàn),建議兩個(gè)蛋白的分子量要相差一個(gè)數(shù)量級(jí)(10倍)。 Amicon? Ultra與70%乙醇是兼容的,但是對(duì)滅菌處理的具體方法沒有做相關(guān)的測(cè)試,所以無法提供更進(jìn)一步的參考信息。 Amicon? Ultra都是采用熱封設(shè)計(jì),不可以用高壓高溫滅菌。 不保證超濾管不包含RNA酶,建議用0.1% DEPC在37度浸泡2小時(shí),以完全滅活RNA酶;殘留的DEPC可以用Milli-Q?超純水洗滌除去。默克4ml超濾濃縮管代理價(jià)格