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來源: 發(fā)布時間:2020-01-22

P i.d.o 2.0SNAP i.d. @ 2.0多印跡框架迷你相框中框阻塞溶液量每孔15毫升30毫升30毫升抗體量每孔2.5 mL5毫升10毫升洗滌緩沖液*量每孔4x 15 mL每個4x 30 mL每個4x 30 mL●Tris或磷酸鹽緩沖鹽溶液,補充有0.1%Tweene 20表面活性劑在計算免疫檢測所需的抗體量時,三個要素對于成功檢測出蛋白質(zhì)并獲得了高質(zhì)量的印跡(低背景,高信號):●樣品類型和凝膠上樣濃度●一級和二級抗體濃度●檢測試劑的種類和靈敏度下表中的所有抗體均使用LuminataTM Forte化學發(fā)光檢測試劑進行了測試。對于SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng),抗體濃度高于標準免疫檢測中的濃度,但濃度較低體積。 表3.標準免疫檢測中一抗稀釋的實例 SNAPi.d.?2.0免疫檢細胞跨膜電阻儀零售多少錢呢?青浦區(qū)Merck細胞跨膜電阻儀Merck儀器代理價格

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關閉真空。同樣,溶液將被吸收到印跡架中,并且表面可能看起來干燥。重要提示:孵育10分鐘后,再抽真空。11.向下壓框架并施加真空。等待5至8秒鐘,直到框架完全空了。真空運行連續(xù)添加30 mL洗滌緩沖液(對于MultiBlot為15 mL)。重復洗滌步驟3次(共3次)4次洗滌)。12.關閉真空,然后從框架上取下吸墨架。從污點固定器中取出污點,并與適當?shù)臋z測試劑。如果使用了MultiBlot孔空白,則卸下并清洗。 擴展一級抗體孵育:一小時至過夜1.執(zhí)行《通用議定書》的步驟1至5。2.加入2.5 mL(對于MultiBlot),5 mL(對于Mini blot)或10 mL(對于Midi blot)1X一抗(濃縮液)通常在標準免疫檢測過程中使用)。3.用蓋子蓋住吸墨紙固定架。如果需要的話,將其從底座

15分鐘。圖4.擴展孵化(過夜):SNAP i.d.8 2.0系統(tǒng)與標準免疫檢測一種。 SNAP id.o 2.0蛋白檢測b。標準系統(tǒng)Midi印跡免疫檢測將A431細胞裂解液和大鼠肝裂解液(12至3 ug)轉移至Immobilon9-P膜。兩種印跡均用在TBST中制備的0.5%NFDM封閉。這SNAP i.d.c 2.0 Midi印跡被阻斷20秒,標準印跡為分鎖了1個小時。兩種印跡均與相同稀釋度的MAP激酶1/2(ErK1 / 2),但是,對于HRP偶聯(lián)的二抗山羊抗兔(AP132P),將SNAP i.d.2.0印跡孵育10分鐘在TBST中洗滌3次后,將標準印跡孵育1小時。 圖5.擴展孵化(1小時):,SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng)1小時協(xié)議與SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)標準協(xié)議與標準免上海益啟生物細胞跨膜電阻儀訂購方便。

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