Amicon? Ultra超濾管的膜材質(zhì)為默克密理博特有的 Ultracel? 再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴格,截留分子量明確而精細,蛋白吸附損失基本上大概小。 如果要用超濾的方法分離兩種蛋白,那么這兩個蛋白的大小需要相差多少? 按照經(jīng)驗,建議兩個蛋白的分子量要相差一個數(shù)量級(10倍)。 Amicon? Ultra與70%乙醇是兼容的,但是對滅菌處理的具體方法沒有做相關(guān)的測試,所以無法提供更進一步的參考信息。 Amicon? Ultra都是采用熱封設(shè)計,不可以用高壓高溫滅菌。 不保證超濾管不包含RNA酶,建議用0.1% DEPC在37度浸泡2小時,以完全滅活RNA酶;殘留的DEPC可以用Milli-Q?超純水洗滌除去。益啟生物公司專業(yè)致力于超濾濃縮管代理銷售。奉賢區(qū)Merck超濾濃縮管聯(lián)系方式
特點與優(yōu)點: 高產(chǎn):沒有樣品轉(zhuǎn)移,損失更少 溫和:特別的滲濾設(shè)計使換液過程更溫和 快速:從細胞裂解到純化、優(yōu)化一共需要5次低速離心 靈活:一種離心方法,***支持各種樣品制備所需 蛋白緩沖液置換、脫鹽和透析 每一種蛋白的制備都是***的,常常需要摸索和優(yōu)化。應(yīng)該考慮為特定蛋白選擇相應(yīng)的工具進行換液和透析。您可以從操作較快 Amicon? Pro 的滲濾法或更溫和的 D-Tube?透析法中選擇更適合樣品的操作方法。 選擇更直接而有效的方法! Amicon? Pro能做到一步離心完成脫鹽換液青浦區(qū)Millipore超濾濃縮管代理價上海超濾濃縮管供應(yīng)商。
外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體:300μg樣品(相當于300μg總蛋白)用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋,與protein A/G磁珠共孵育1hr,漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯(lián)在磁珠上(以避免抗體洗脫下來對外泌體的干擾),請參考默克磁珠操作說明書。(Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3))。推薦使用試劑目錄號信息:cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經(jīng)建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備操作標準,相較于需要昂貴的設(shè)備及繁瑣操作的超速密度梯度離心,用實驗室常見的工具解決外泌體制備的高大上問題,真是惠而不費,不亦樂乎?
脫鹽/緩沖液置換并濃縮 5次低速離心,總耗時~35分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預(yù)濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 優(yōu)化選做:加入1.5 mL用于置換的緩沖液,1,000×g離心1 min。 3. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(有5種截留分子量規(guī)格可選)。 4. 加入1.5 mL樣品,4,000×g離心15 min進行濃縮。 5. 加入1.5 mL需要置換的緩沖液,4,000×g離心15 min,換液的同時進行濃縮。 6. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,1,000×g離心回收處理好的蛋白。 * 進行較大體積操作時,可以適當延長離心時間,也可參考Amicon? Pro完整操作說明書 查看詳細信息。超濾濃縮管具體報價多少呢。
離心方式的超濾方法進行溶液置換也被稱為“滲濾”,操作時樣品首先被濃縮,繼而加入新的溶液,再次濃縮時,原溶液已經(jīng)被換成選定的溶液。 化學相容性與溶出 樣品的化學背景有時很多樣而復(fù)雜,過濾的過程中很重要的一點是操作過程不應(yīng)給樣品帶來新的污染。所以濾膜和裝置與樣品接觸的其它部分都不能與樣品中的化學成分發(fā)生反應(yīng)而產(chǎn)生溶出污染。關(guān)于默克密理博各種微濾、超濾產(chǎn)品的化學相容性請參考產(chǎn)品使用說明書或垂詢技術(shù)支持專線 ?;厥章始捌渲匾猿瑸V的**終目的常常是很大程度地回收目標溶質(zhì),但膜的很多特性會對這一目的產(chǎn)生影響。影響回收的因素包括:? 標稱分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)? 截留 ? 濃差極化 ? 通量超濾濃縮管的優(yōu)勢您了解多少呢?常州默克離心濃縮管咨詢問價
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微濾中膜的孔徑大小通常以微米計,表示大于這一規(guī)格的顆粒將被膜截留。超濾膜根據(jù) NMWL分級,有時也用截留分子量(MWCO)。NMWL表示大多數(shù)大于這個值的分子將在超濾時截留。一個確定NMWL的超濾膜應(yīng)該截留至少90%以上的這個大小的球形分子。但為了保險起見,實踐中選擇的膜孔徑要小于目的分子。緩沖液置換時膜截留分子量應(yīng)該充分大于流過的溶質(zhì)。當膜材料相同時,孔徑減小 會增加排阻而減小濾過率。截留及產(chǎn)物回收的影響因素包括分子的形狀、帶電性質(zhì)、樣品濃度及組成成分、操作條件、使用的設(shè)備構(gòu)造等。因此常常發(fā)生同樣 NMWL 的膜對一定范圍內(nèi)的不同分子截留效果有一定差異的情況。使用超濾方法進行樣品濃縮或除鹽時,需要謹慎地選擇合適的NMWL膜和設(shè)備。奉賢區(qū)Merck超濾濃縮管聯(lián)系方式