單個(gè)核細(xì)胞分離液：反復(fù)著床失敗(recurrent implantation failure, RIF)已成為阻礙妊娠率進(jìn)一步提高的瓶頸問題。PBMCs (peripheral blood mononuclear cells)是指外周血單個(gè)核細(xì)胞包括T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞等,研究發(fā)現(xiàn)皮下注射丈夫或第三者外周血淋巴細(xì)胞主動(dòng)免疫治好能提高IVF-ET反復(fù)著床失敗患者的妊娠率和活產(chǎn)率。在著床前宮腔灌注自體單個(gè)核細(xì)胞（PBMCs）（部分文獻(xiàn)寫為單核細(xì)胞）聯(lián)合HCG用于反復(fù)著床障礙的患者其具有操作簡(jiǎn)單、一次完成、安全簡(jiǎn)便、無(wú)反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn)。對(duì)于反復(fù)著床失敗患者在胚胎移植前給予宮腔灌注HCG處理過的PBMCs免疫治好能明顯提高患者的胚胎著床率和妊娠率。BMC原代分離步驟：吸取稀釋血液，在離分層液上方1cm處，沿試管壁徐徐加入。5′-核苷酸酶(5′-NT)檢測(cè)試劑盒(鉬藍(lán)比色法)
方便快捷的LSMTM淋巴細(xì)胞分離液：早期分離白細(xì)胞的方法，會(huì)用一種化合物混合血液。此化合物能夠聚集紅細(xì)胞，只輕微影響白細(xì)胞。通過離心，紅細(xì)胞由于密度增加而聚集沉淀，同時(shí)從離心管內(nèi)上層收集白細(xì)胞。后來，B?yum提出的以Ficoll?-甲泛影鈉溶液為介質(zhì)進(jìn)行離心。稀釋的血液在Ficoll?-甲泛影鈉溶液中分層，之后低速短時(shí)離心。紅細(xì)胞和多形核粒細(xì)胞沉降到管底，單個(gè)淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和血小板可以從兩個(gè)分層間的分界面處收集。而MP Biomedicals出品的淋巴細(xì)胞分離液，不同于B?yum的配方，由于LSM中含有聚蔗糖和泛影酸鹽，能夠形成特定的密度梯度1.077 g/mL（20℃）。只需要將血液樣品輕置于淋巴細(xì)胞分離液上層，經(jīng)過簡(jiǎn)單的一步離心(400 xg，30分鐘)，就能夠分離獲得淋巴細(xì)胞。羧甲基纖維素溶液(CMC,4%)利福平溶液怎么配制：配制時(shí)每毫升可加入～5滴 10 N NaOH以助溶。
緩沖溶液的緩沖能力：在緩沖溶液中加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿，其溶液pH值變化不大，但若加入酸，堿的量多時(shí)，緩沖溶液就失去了它的緩沖作用。這說明它的緩沖能力是有一定限度的。緩沖溶液的緩沖能力與組成緩沖溶液的組分濃度有關(guān)。0.1mol·L-1HAc和0.1mol· L-1NaAc組成的緩沖溶液，比0.01mol·L-1HAc和0.01mol·L-1NaAc的緩沖溶液緩沖能力大。關(guān)于這一點(diǎn)通過計(jì)算便可證實(shí)。但緩沖溶液組分的濃度不能太大，否則，不能忽視離子間的作用。組成緩沖溶液的兩組分的比值不為1∶1時(shí)，緩沖作用減小，緩沖能力降低，當(dāng)c（鹽）/c（酸）為1∶1時(shí)△pH較小，緩沖能力大。不論對(duì)于酸或堿都有較大的緩沖作用。緩沖溶液的pH值可用下式計(jì)算：此時(shí)緩沖能力大。緩沖組分的比值離1∶1愈遠(yuǎn)，緩沖能力愈小，甚至不能起緩沖作用。對(duì)于任何緩沖體系，存在有效緩沖范圍，這個(gè)范圍大致在pKaφ（或pKbφ）兩側(cè)各一個(gè)pH單位之內(nèi)。
淋巴細(xì)胞亞群及其功能：T淋巴細(xì)胞及其分類主要應(yīng)用抗T細(xì)胞表面抗原McAb.根據(jù)T淋巴細(xì)胞表面分化抗原將成熟T細(xì)胞分為CD4+、CD8-和CD4-、CD8+兩大亞群，T淋巴細(xì)胞的功能與表現(xiàn)型之間的對(duì)應(yīng)關(guān)系是相對(duì)的，其免疫活性可能受“微環(huán)境”的影響，并受MHC抗原的制約，許多研究證明，CD4+T細(xì)胞具有殺傷活性，介導(dǎo)Ι類抗原不相容時(shí)的靶細(xì)胞溶解。TU等研究表明，CD4+的細(xì)胞毒活性存在兩種完全不同的機(jī)理，并證明TH1和TH2的細(xì)胞毒活性不同。前者強(qiáng)，后者弱或無(wú)活性。Dennert等發(fā)現(xiàn)，克隆化的T淋巴細(xì)胞具有輔助，細(xì)胞毒活性和遲發(fā)型超敏反應(yīng)作用，這種功能的多樣性有賴于所采用的分析方法。CD4+細(xì)胞識(shí)別Ι類MHC抗原，其效應(yīng)的發(fā)揮也受Ι類抗原的制約；CD3+細(xì)胞識(shí)別Ι類MHC抗原，發(fā)揮免疫效應(yīng)也受其控制。固體試劑的取用:倒完液體后，要立即蓋緊瓶塞，并把瓶子放回原處。
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選：1、轉(zhuǎn)染48 h后，用含適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)的殺傷效果較好。但細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低，較好將細(xì)胞稀釋至豐度低于25%。2、每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。3、篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間（取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果）。4、挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。5、后續(xù)更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。丁胺卡那霉素給藥說明：配制靜脈用藥時(shí)，每500mg加入氯化鈉注射液。羧甲基纖維素溶液(CMC,4%)
固體試劑的取用:一支藥匙不能同時(shí)取用兩種或兩種以上的試劑。5′-核苷酸酶(5′-NT)檢測(cè)試劑盒(鉬藍(lán)比色法)
人外周血單核細(xì)胞（PBMC）分離：PBMC（peripheral blood mononuclear cell），外周血單個(gè)核細(xì)胞，顧名思義，其主要細(xì)胞類型為血液里邊具有單個(gè)核的細(xì)胞，主要包括淋巴細(xì)胞（Ｔ/Ｂ），單核細(xì)胞，吞噬細(xì)胞，樹突狀細(xì)胞和其他少量細(xì)胞類型。其中淋巴細(xì)胞占很大一部分。分離ＰＢＭＣ的主要目的是為了將多核細(xì)胞和紅細(xì)胞去除，收集單個(gè)核細(xì)胞，從而能夠很方便地模擬體外的血液免疫環(huán)境。臍帶血單個(gè)核細(xì)胞（MNC）分離臍血是指胎兒出生時(shí)臍帶內(nèi)及胎盤近胎兒一側(cè)血管內(nèi)的血液，含有豐富的干細(xì)胞和祖細(xì)胞，主要包含造血干細(xì)胞和間充質(zhì)干細(xì)胞。臍血MNC能治好多種病種，包括：神經(jīng)系統(tǒng)疾病，呼吸系統(tǒng)疾病，消化系統(tǒng)疾病，心臟疾病，內(nèi)分泌疾病以及小兒腦癱等。用于簡(jiǎn)便、高效地提取臍血單個(gè)核細(xì)胞。5′-核苷酸酶(5′-NT)檢測(cè)試劑盒(鉬藍(lán)比色法)