怎樣減少檢測試劑盒誤差？檢驗技師應(yīng)具備從事實驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗。能熟練操作實驗儀器、器械，具有一定總結(jié)和分析問題的能力，對實驗中出現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決。使用校對過的微量移液器，排除自然誤差。移液器準(zhǔn)確與否對定量檢測尤為重要。仔細(xì)閱讀說明書，嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。不同批號的試劑不可混用。值得改進(jìn)的地方，反復(fù)試驗確定成立后才能改進(jìn)。洗滌徹底，如若洗板不徹底，酶結(jié)合物本底顯色會呈現(xiàn)假陽性。洗滌液要新鮮，現(xiàn)用現(xiàn)配，陳舊的洗滌液會出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象，也可能出現(xiàn)假陽性。磷酸緩沖鹽溶液具有鹽平衡。淀粉樣物質(zhì)染色液(改良Stores剛果紅法)
甘油三酯檢測試劑盒的操作注意事項：試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存；實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)；不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用；使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器；使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻檢測試劑盒里的各種成份及樣品；洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。亮抑酶肽溶液(leupeptin,1mg/ml)檢測試劑盒在沒有促凝劑和抗凝劑存在的狀況下，正常血液搜集后1/2~2h初步凝聚。
我們在檢測試劑盒實驗中，有時會遇到樣品濃度挨近檢測試劑盒的靈敏度就容易發(fā)生樣本OD450值低于空白值的現(xiàn)象，特別是在血清和血漿樣本中。這就有可能是基質(zhì)效應(yīng)導(dǎo)致的結(jié)果。首先我們要知道什么是基質(zhì)，基質(zhì)是指樣品中目標(biāo)分析物以外的部分。由于基質(zhì)成分會對分析過程有明顯干擾，影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。業(yè)內(nèi)把這些影響統(tǒng)稱為基質(zhì)效應(yīng)。這是檢測試劑盒開發(fā)和使用中需要避開的雷。如何判斷是否是基質(zhì)效應(yīng)呢？當(dāng)單個樣本或少量樣本值低于空白值時，可能是實驗操作出現(xiàn)問題，這時應(yīng)增加重復(fù)，進(jìn)步操作技術(shù)。當(dāng)許多樣本都低于空白值時，應(yīng)思考基質(zhì)效應(yīng)的影響，建立校正曲線予以修改?；|(zhì)效應(yīng)的原因錯綜復(fù)雜，有可能是樣品中存在的基質(zhì)導(dǎo)致原抗體的聯(lián)絡(luò)結(jié)合能力下降，便產(chǎn)生了樣本值低于空白值的現(xiàn)象。導(dǎo)致樣本值無法計算出數(shù)值，或許數(shù)值為負(fù)。
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在計量學(xué)中的作用：標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)所提供特性量值的不確定度必須已知且滿足測量需求。因此，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可以按不確定度等級（越小越好，但評定必須合理）和依據(jù)不確定度報告的可靠性和驗證結(jié)果進(jìn)行分級分類。在物理計量中，測量標(biāo)準(zhǔn)一般按層級水平劃分。測量基準(zhǔn)的不確定度小且處于計量溯源層級的高大上，次級標(biāo)準(zhǔn)通過與一個或多個基準(zhǔn)直接比較導(dǎo)出或驗證，依此類推。這個層級體系用來建立測量系統(tǒng)的準(zhǔn)確度。這些測量系統(tǒng)用工作標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)，而工作標(biāo)準(zhǔn)則用參考標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)，依此類推。理想情況下，所有這些溯源鏈止于基準(zhǔn)。通過這個過程，就可校正測量系統(tǒng)的重要偏差，同時，測量不確定度追溯至基準(zhǔn)的不確定度和相關(guān)比較測量的不確定度?？蒲袑嶒炛性噭┤∮脩?yīng)注意事項：讀數(shù)時量筒必須放平穩(wěn)。
殺滅曲線的建立：通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線），確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的較低濃度，從而篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株。建立殺滅曲線至少選擇5個濃度。1、按照20-25%的細(xì)胞密度將未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2過夜培養(yǎng)（需要更高密度，可增加接種量）。2、根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。3、第2天換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基，每個濃度做三個平行孔。4、接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。5、按照每2天進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)，來確定殺滅未轉(zhuǎn)染細(xì)胞的恰當(dāng)濃度。通常7-10天內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的較低濃度為篩選用的工作濃度。檢測試劑盒洗刷次數(shù)越多，布景越低。奧氏試劑(Offner's Reagent)
試劑的穩(wěn)定性對準(zhǔn)確度非常重要。淀粉樣物質(zhì)染色液(改良Stores剛果紅法)
G418又稱遺傳霉素,新霉素,對細(xì)菌、酵母、高等植物、原生生物、哺乳動物細(xì)胞具有氨基苷類毒性,對真核細(xì)胞進(jìn)行篩選。G418(G418,G 418,G-418,Geneticin)是一種氨基糖苷類 ,這種氨基糖類的結(jié)構(gòu)和新霉素、慶大霉素、卡那霉素相似，在分子遺傳試驗中,是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染常用的抗性篩選試劑。它通過克制轉(zhuǎn)座子Tn601，Tn5的基因,干擾核糖體功能而阻斷蛋白質(zhì)合成,對原核和真核等細(xì)胞產(chǎn)生東西,包括細(xì)菌、酵母、植物和哺乳動物細(xì)胞 ,也包括原生動物和蠕蟲。當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞DNA后 ,則能啟動neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為ｍＲＮＡ ,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的表達(dá) ,使細(xì)胞獲得抗性而能在含有Ｇ418的選擇性培養(yǎng)基中生長。Ｇ418的這一選擇特性 ,已在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動物等方面得以普遍應(yīng)用。淀粉樣物質(zhì)染色液(改良Stores剛果紅法)