在體光纖成像記錄人類大量的復(fù)雜行為主要取決于上千億個神經(jīng)元組成的精確神經(jīng)環(huán)路,而神經(jīng)環(huán)路的建立依賴于神經(jīng)元之間突觸連接的形成。突觸是神經(jīng)元交流的關(guān)鍵結(jié)構(gòu),只有通過突觸連接,神經(jīng)元之間以及神經(jīng)元和靶向細胞(包括肌肉,腺體分析的細胞)才能有效的傳遞信號,因此突觸連接是神經(jīng)信息傳遞的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)。當(dāng)突觸的發(fā)育或者形成后維持發(fā)生異常,將會導(dǎo)致某些神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生,比如精神分裂癥和自閉癥。類似于線蟲的模式生物在體光纖成像記錄,成像系統(tǒng)需要具備以下幾個方面的功能: 線蟲對光非常敏感,在進行共聚焦成像時,需要盡量使用低的激發(fā)光強度,低激發(fā)光帶來的熒光信號的降低,獲得更高信噪比的圖像,要求共聚焦系統(tǒng)具有較高的靈敏度。在體光纖成像記錄成像系統(tǒng)是典型的在體熒光成像系統(tǒng)。連云港在體實時監(jiān)測成像光纖網(wǎng)站
在體光纖成像記錄熒光素酶的每個催化反應(yīng)只產(chǎn)生一個光 子 , 通常肉眼無法直接觀察到, 而且光子在強散射性的生物組織中傳輸時, 將會發(fā)生吸收、 散射、 反射、 透射等大量光學(xué)行為 。 因此,必須采用高 靈敏度的光學(xué)檢測儀器( 如CCD camera)采集并定量檢測生物體內(nèi)所發(fā)射的光子數(shù)量, 然后將其轉(zhuǎn)換成圖像, 在體生物發(fā)光成像中的發(fā)光光譜范圍通常為可見光到 近紅外光波段, 哺乳動物體內(nèi)血紅蛋白主要吸收可見光, 水和脂質(zhì)主要吸收紅外線, 但對波長為 590~1500nm的紅光至近紅外線吸收能力則較差, 因此, 大部分波長超過600nm的紅光, 經(jīng)過散射、吸收后能夠穿透哺乳動物組織, 被生物體外的高靈敏光學(xué)檢測儀器探測到, 這是在體生物發(fā)光成像的理論基礎(chǔ)。上海在體光纖成像記錄原理在體光纖成像記錄光源的發(fā)光強度隨深度增加而衰減。
動物體內(nèi)很多物質(zhì)在受到激發(fā)光激發(fā)后,會發(fā)出熒光,產(chǎn)生的非特異性熒光會影響到檢測靈敏度。背景熒光主要是來源于皮毛和血液的自發(fā)熒光,皮毛中的黑色素是皮毛中主要的自發(fā)熒光源,其發(fā)光光線波長峰值在 500 一 520 nm 左右,在利用綠色熒光作為成像對象時,影響較為嚴重,產(chǎn)生的非特異性熒光會影響到檢測靈敏度和特異性。動物尿液或其他雜質(zhì)如沒有及時打掃,成像中也會出現(xiàn)非特異性信號。由于各廠商的圖像分析軟件不同,實驗數(shù)據(jù)分析方法也有區(qū)別?;畹奈矬w成像系統(tǒng)使用時,實驗者考慮到非特異性雜信號,以及成像圖片美觀等方面,可能會調(diào)節(jié)信號的閾值,因此在在體光纖成像記錄分析信號光子數(shù)或信號面積時,應(yīng)考慮閾值的改變對實驗結(jié)果的影響。正確選擇 ROI 區(qū)域,可提高分析實驗數(shù)據(jù)的準確性。
在體光纖成像記錄科研人員從光源掃描方式、光束偏轉(zhuǎn)方式和重建算法等方面開展研究。采用一個點陣光源,用電控的方法掃描不同方向的光束。與現(xiàn)有的振鏡掃描系統(tǒng)相比,該方法結(jié)構(gòu)緊湊,掃描速度快,可以實現(xiàn)系統(tǒng)集成。利用聲光偏轉(zhuǎn)器件可實現(xiàn)光束偏轉(zhuǎn),并結(jié)合波導(dǎo)器件實現(xiàn)多模光纖成像。對于單光纖成像系統(tǒng),盡管實際測量時只需拍攝一次圖像,但在傳輸矩陣的構(gòu)建、相位場的計算以及圖像重建過程中,計算量大、計算時間長,因此新的算法也在不斷被研究。目前單光纖成像技術(shù)水平與實際應(yīng)用需求之間還有較大距離,但成像方法和關(guān)鍵部件技術(shù)的快速進步為將來實現(xiàn)小型化、全固態(tài)和算法嵌入提供了有力支持。有關(guān)生命活動的小分子在體光纖成像記錄等都可以被標記。
根據(jù)在體光纖成像記錄成像方式的不同, 在體生物發(fā)光成像主要有生物發(fā)光成像,和生物發(fā)光斷層成像兩種。其中,輸出是二維圖像, 即生物體外探測器上采集的光學(xué)信號,其原理簡單、 使用方便快捷, 適用于 定性分析及簡單的定量計算, 但無法獲得生物體內(nèi)發(fā)光光源的深度信息, 難以實現(xiàn)光源的準確定位。 而成像系統(tǒng)則利用 多個生物體外探測器上采集的光學(xué)信號, 根據(jù)斷層成像的原理, 采用特定的 反演算法 ,得到活的物體小動物體 內(nèi)發(fā)光光源的精確位置信息。目前, BLT的光源定位和生物組織光學(xué)特性參數(shù)的反演問題 已經(jīng)成為國內(nèi)外在體生物光學(xué)成像研究的重點和難點之一, 但還限于于實驗室研究階段, 沒有達到臨床實驗的階段, 所 以尚未有成熟的成像系統(tǒng)?;谠隗w光纖成像記錄在使用中必須彎曲和移動。連云港在體實時監(jiān)測成像光纖網(wǎng)站
在體光纖成像記錄能夠?qū)λ幬锖Y選及療效進行評價。連云港在體實時監(jiān)測成像光纖網(wǎng)站
在體光纖成像記錄的優(yōu)點可以非侵入性,實時連續(xù)動態(tài)監(jiān)測體內(nèi)的各種生物學(xué)過程,從而可以減少實驗動物數(shù)量,及降低個體間差異的影響;由于背景噪聲低,所以具有較高的敏感性;不需要外源性激發(fā)光,避免對體內(nèi)正常細胞造成損傷,有利于長期觀察;此外還有無放射性等其他優(yōu)點。然而生物發(fā)光也有自身的不足之處:例如波長依賴性的組織穿透能力,光在哺乳動物組織內(nèi)傳播時會被散射和吸收,光子遇到細胞膜和細胞質(zhì)時會發(fā)生折射,而且不同類型的細胞和組織吸收光子的特性也不盡相同,其中血紅蛋白是吸收光子的主要物質(zhì);由于是在體外檢測體內(nèi)發(fā)出的信號,因而受到體內(nèi)發(fā)光源位置及深度影響;另外還需要外源性提供各種熒光素酶的底物,且底物在體內(nèi)的分布與藥動力學(xué)也會影響信號的產(chǎn)生;由于熒光素酶催化的生化反應(yīng)需要氧氣、鎂離子及 ATP 等物質(zhì)的參與,受到體內(nèi)環(huán)境狀態(tài)的影響。連云港在體實時監(jiān)測成像光纖網(wǎng)站