胎牛血清如何采取?在牛屠宰過程中,如發(fā)現(xiàn)母牛懷孕,就應立即將生殖系統(tǒng)從尸體中分離出來,在無菌條件下從子宮中取出小牛,進行臍帶打結處理,清理羊水并消毒。在胎兒兩肋之間直接插入一根針頭到心臟,在真空的條件下,血液通過導管被抽入無菌的血液收集袋內。在沒有真空泵時,也可將血液收集袋放在胎牛身體下面,通過重力作用或按摩方式進行收集。血液收集后,放在低溫條件下凝集,經過離心去掉凝集物而獲得血清。胎牛血清的獲得量取決于胎兒的大小和年齡。胎兒至少3個月,否則會因心臟太小而不便于操作。一個3月齡的胎兒可產生150mL的血清;6月齡和9月齡的胎兒可分別產生350mL和550mL血清。胎牛血清的無菌檢驗:陰性;支原體檢驗: 陰性;細菌內有毒的 ≤5(EU/ml)。深圳賽業(yè)胎牛血清品牌
胎牛血清:胎牛血清用于細胞培養(yǎng)已經超過半個世紀了,20世紀50年代末TheodorePuck在細胞和組織培養(yǎng)中初次加入胎牛血清(FBS)來刺激細胞生長。后來人們發(fā)現(xiàn),由于胎牛未進食過母乳,所以IgG的含量極低,不會阻礙細胞生長,而且胎牛血清中含有豐富的促進細胞生長的成分,如維生素、運輸?shù)鞍?、微量元素、生長因子等,胎牛血清生產的一切環(huán)節(jié)均有嚴格的質量把控。出廠的血清無細菌、支原體和病毒等微生物的威脅,且內的毒性含量低,滿足絕大多數(shù)細胞培養(yǎng)需求。深圳賽業(yè)胎牛血清品牌透析胎牛血清主要用于可能需要關注小分子濃度的特殊研究。
胎牛血清有必要做熱滅活嗎?實驗證明,經過正確處理的熱滅活胎牛血清,對于大多數(shù)的細胞而言都是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或完全沒有任何作用,甚至可能因為高溫處理影響了血清的質量,從而造成細胞生長速率的降低。經過熱處理的血清,沉淀物的形成會明顯的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會使此類沉淀物增加得更多,這常常會使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。因此我們建議客戶,若非必須,可以不需要做熱處理這一步。如此一來,不但節(jié)省客戶寶貴的時間,更確保血清的質量。
胎牛血清制備:離心,將準備好的瓶放入離心套筒調好平衡后,對稱放入離心機,按1800轉/分鐘離心50分鐘后,放入4℃冷庫備用。抽血清,取出4℃冷庫離心好的瓶,注意輕抬輕放,以免將下層血塊和血清混層。將經過高壓滅菌裝有兩孔瓶塞的5000ml大瓶的抽氣孔一端的管子接好空氣濾器,再接到壓縮機抽氣口上。打開壓縮機,用抽血清孔的管子輕輕抽取采的血瓶內的上清液,注意控制好抽管,避免抽到下層血塊。將抽好的血清分裝,即為粗制胎牛血清,放入-20℃冷庫冷藏備用。血清提供和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質、類固醇(雌二醇、睪酮、孕酮)等。
胎牛血清要求:1、性狀、外觀:淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。2、蛋白質含量:3.5%~5.0%(w/v)。3、血紅蛋白含量:≤0.02%(w/v)。4、無菌檢驗:陰性。5、支原體檢驗:陰性。6、細菌內的毒性:≤5(EU/ml)。7、牛腹瀉病毒:陰性。8、大腸桿菌噬菌體:陰性。9、支持細胞增殖:(Sp2/0-Ag14)生長曲線(接種濃度)較大增殖濃度≥2.5×106個/ml,細胞倍增時間:≤15h,克隆率:≥85%。血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等。胎牛血清是細胞培養(yǎng)中常用的天然培養(yǎng)基。連云港標準血清銷售公司
人和動物的血清常用以進行各種血清學試驗,幫助診斷疾病。深圳賽業(yè)胎牛血清品牌
活性炭處理胎牛血清的應用:活性炭處理胎牛血清主要用于受體研究和雌Hormone相關的細胞研究實驗。同時活性炭處理胎牛血清極大的降低了多種Hormone和生長因子,減少了影響細胞生化分析的干擾因子。性炭處理胎牛血清減少了血清中的類固醇類化合物,3x100nm無菌過濾內的毒性≤10EU/mL,血紅素≤20mg/dL。胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質較高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分較少。深圳賽業(yè)胎牛血清品牌
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