山東IdeS蛋白酶蛋白組學

來源: 發(fā)布時間:2024-05-08

與IdeS不同,Genovis的IgASAP是IgA消化酶家族。IgASAPSub1是一種IgA1特異性酶,可在鉸鏈上方的一個特定位點消化人IgA1,而IgASAPSub1+2特異性消化鉸鏈上方的IgA1和IgA2m1。兩種酶都產生完整且均質的Fab和Fc片段。IgASAP酶能夠生成完整的單價Fab片段以及IgA的中級分析,從而促進IgA的表征,例如,在疫苗、zhiliao和診斷的開發(fā)過程中。獨特的酶促工具,可實現(xiàn)IgA的中級表征和質量控制;生成均相的Fab和Fc片段,并保留免疫反應性;高度特異性–人IgA鉸鏈上方的一個消化位點。可在重鏈中 CH2 結構域下方的一個特定位點消化人 IgM,產生均質的 F(ab')2 和 Fc 片段。山東IdeS蛋白酶蛋白組學

山東IdeS蛋白酶蛋白組學,IdeS蛋白酶

Genovis提供色譜柱形式的FabRICATOR(IdeS)酶,是在鉸鏈下方對IgG進行柱上消化的固定化酶。Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個氨基酸位點的抗體,產生均質的F(ab')2和Fc片段。酶解后,可以使用反相HPLC、質譜或其他分析方法分析片段??贵w消化和亞基生成的自動化使生物反應器的在線監(jiān)測應用成為可能,例如,作為2D-LC-MS設置的一部分,將反應器直接耦合到MS。這種自動化的抗體亞基分析方法減少了操作人員的時間、樣品處理時間并提高了通量。黑龍江GingisREXIdeS蛋白酶抗體酶切Genovis的FabRICATOR (IdeS)HPLC酶色譜柱,可快速進行單克隆抗體的柱上酶切,并產生一致的亞基。

山東IdeS蛋白酶蛋白組學,IdeS蛋白酶

如果您想分析單克隆抗體或單克隆抗體分子,現(xiàn)在有了Genovis的一些新產品(IgA酶,IgM酶),其他的模式和分子形式(IdeS高通量的產品形式)來測定和監(jiān)測許多不同的CQA,Genovis可以緩解使用不同分析方法時可能出現(xiàn)的瓶頸。 生產大量的樣品當然很好,但如果分析團隊不能足夠快地處理它們,那就沒有什么意義了。 高通量分析需要一致的、易于使用的方法,當然這些方法要快速,而且可能易于自動化。 這正是我們所能提供的,這使Genovis能夠支持更多不同功能的客戶。

對于攜帶突變鉸鏈的 Fc 融合蛋白或抗體來說,F(xiàn)ab 和 Fc 片段的生成可能具有挑戰(zhàn)性。Genovis的GingisKHAN酶在鉸鏈上方一個可觸及的賴氨酸位點消化人IgG1,在足夠溫和的還原條件下保留鏈內和鏈間二硫鍵,從而產生完整的Fab和Fc片段。對于融合蛋白,消化通常在鉸鏈上方獲得,但融合伴侶的結構和氨基酸序列可能導致其他暴露的消化位點。如果去除保守的 Fc N-聚糖,F(xiàn)c 中的第二個切割位點也可能被GingisKHAN酶切。將精選的單克隆人 IgG1 抗體和 Fc 融合蛋白與 GingisKHAN 在 37°C 下孵育 1 小時,并通過 HPLC 進行分析。幾乎完全消化了Fc結構域中的連接子,留下了接近均質的Fc/2產物。

山東IdeS蛋白酶蛋白組學,IdeS蛋白酶

Genovis是一家瑞典生物技術公司,自2010年起,為生物制藥公司提供SmartEnzymes工具酶。Genovis提供一系列獨特、快速且易于使用的酶學工具,主要用于生物制藥行業(yè)和學術界。我們在全球范圍內提供創(chuàng)新的智能酶SmartEnzymes?,用于單克隆抗體、ADC、生物仿制藥和雙特異性生物藥物的開發(fā)、生產和質量控制。您可以在我們的網(wǎng)站上“Application頁面”獲得更多應用信息,如果您有興趣,可以和我們一起做一個“SmartStories”,也可以聯(lián)系我們。IgASAP Sub1 的消化位點位于該擴展區(qū)域,使IgASAP酶具有 IgA1 特異性。黑龍江GingisREXIdeS蛋白酶抗體酶切

Genovis的FabRICATOR MagIC酶解mAb,使用LC-MS進行中級分析。山東IdeS蛋白酶蛋白組學

Genovis的FabDELLO在鉸鏈上方的單個位點消化人IgG1,并在兩小時內生成均質的Fab和Fc片段(Genovis的IdeS在鉸鏈區(qū)下方的單個位點進行消化)。生成的片段可用于結晶和高階結構(HOS)的NMR研究、結合研究等。突變的鉸鏈區(qū)域是zhiliao性候選抗體的常見修飾,以降低效應器功能。這些突變可能會影響具有高底物特異性的酶的抗體消化效率。例如,高度特異性的FabRICATOR(IdeS)消化效率對含有常見LALA突變的抗體產生負面影響。FabDELLO作用于人IgG1鉸鏈上方的單個暴露賴氨酸殘基,能夠對具有突變鉸鏈區(qū)域的抗體進行流行的中級LC-MS分析。例如,用FabDELLO消化市售的IgG1risankizumab,在下鉸鏈區(qū)域具有LALA突變,并通過反相LC-MS進行分析。消化產生均勻的Fab和Fc片段。用20mMDTT還原片段,用于中級LC-MS分析,發(fā)現(xiàn)產生了均相的Fc/2、輕鏈(LC)和Fd片段。用FabDELLO消化后觀察到的定義峰顯示出均勻的片段生成和酶的穩(wěn)健性能。山東IdeS蛋白酶蛋白組學