傳統(tǒng)的微生物檢測方法都有哪些? 1、直接顯微鏡觀察,正常情況,在一定的培養(yǎng)條件下(相同的培養(yǎng)基、溫度以及培養(yǎng)時間),同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征??梢酝ㄟ^顯微鏡觀察菌落特征對微生物種類進行判斷。2、選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物或人為提供有利于目的菌株生長的條件,選擇培養(yǎng)基,其作用是允許特定種類的微生物生長,同時控制或阻止其他微生物生長。選擇培養(yǎng)一般是通過觀察微生物的同化作用類型或某一特征進行間接判斷,得到的微生物往往并不只有一種,但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特征從而對其分類。3、鑒別培養(yǎng)基,根據(jù)微生物的代謝特點,在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品。與選擇培養(yǎng)相比,鑒別培養(yǎng)基的鑒別所得結果的范圍比較小,一般可直接測定某微生物的種類。知病原鑒定測序實驗基于二代測序技術。浙江DNA病原篩查哪家好
微生物檢測方法中比濁法是根據(jù)菌懸液的透光量間接地測定細菌的數(shù)量。細菌懸浮液的濃度在一定范圍內與透光度成反比,與光密度成正比,所以,可用光電比色計測定菌液,用光密度(OD值)表示樣品菌液濃度。此法簡便快捷,但只能檢測含有大量細菌的懸浮液,得出相對的細菌數(shù)目,對顏色太深的樣品,不能用此法測定。測定細胞重量法此法分為濕重法和干重法。濕重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后將濕菌體進行稱重;干重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后,以清水洗凈放人干燥器加熱烘干,使之失去水分然后稱重。此法適于菌體濃度較高的樣品,是微生物檢測的一種常用方法。上海隨機PCR未知病原鑒定公司起初應用于微生物檢測的分子生物學技術是基因探針方法。
未知病原鑒定測序實驗基于二代測序技術。樣本經(jīng)過核酸純化-文庫構建-生物信息學分析這3大基本流程后轉換成了病原體的序列數(shù)據(jù)。首先,在核酸純化環(huán)節(jié),探普提供專門針對病原的核酸純化樣本指南,以提高病原純度和得率,與此同時探普生物也提供核酸純化服務。第二,文庫構建環(huán)節(jié),探普生物專門針對病原樣本的核酸低濃度/超微總量特點開發(fā)了超微量核酸文庫構建,可以將0.01ng/μl甚至更低濃度的核酸構建成測序文庫。第三,生物信息學分析環(huán)節(jié)。因為病原一般是在復雜環(huán)境或背景中獲得的,因此下機數(shù)據(jù)一般都伴隨大量的宿主和其他非致病微生物的數(shù)據(jù),探普生物基于該特點,優(yōu)化了自有數(shù)據(jù)庫,專門針對病原數(shù)據(jù)搭載了生物信息學分析流程,可處理復雜背景下的病原序列。
在我們食品微生物檢測過程中,除了我們知道要檢測的目標微生物之外,往往會出現(xiàn)一些和目標微生物表現(xiàn)不一,但你又想知道它是什么菌屬的情況,特別是對于一些生產企業(yè),有時候往往會懷疑是否是因為這個 “非目標菌”的存在,從而影響到了產品質量。那怎么去鑒定那些“非目標”微生物呢?又有哪些方法和手段可以采用呢?傳統(tǒng)的細菌系統(tǒng)分類,也就是常說的鑒定,通常是通過純培養(yǎng)分離后從形態(tài)學、生理生化反應特征以及免疫學特性(血清學分析)進行鑒定。這也是我們目前國標中常用的鑒定手段,這種方法的優(yōu)點就是所用試劑簡單易得,常規(guī)實驗室即可展開,經(jīng)濟實用,缺點呢,就是鑒定所需時間較長,且容易判斷不準確。用這種方法,要先進行革蘭氏染色,從鏡檢分析其可能的微生物種屬,再根據(jù)判斷結果,按照《伯杰氏手冊》上的生化項目進行實驗,確定其可能的微生物種屬。比如,鏡檢是革蘭氏陽性桿菌,且周圍或菌體頂端有芽孢產生,這時候我們就要往芽孢桿菌的方向去進行生理生化鑒定。高通量測序技術可以提供一條新的病原微生物鑒定途徑。
微生物鑒定方法:首先呢,就是從觀察顯微鏡下甚至光鏡下的微生物的的那個細胞的形態(tài),比如說,是球菌,還是桿菌,還是弧菌,還是螺旋菌,這都是可以從微生物的單個細胞形態(tài)上區(qū)分的。還有就是細胞的形態(tài),比如說是否有鞭毛、芽孢之類的東西,都是微生物鑒別的特征性特征。其次呢就是觀察細菌的菌落形態(tài),因為細菌生長繁殖到一定階段大多都是以菌群的形態(tài)存在的,不同的細菌菌落在不同的培養(yǎng)基上的生長情況不同,部分細菌對培養(yǎng)基要求較高,部分培養(yǎng)基能在特定的培養(yǎng)基上生存,通過微生物對不同類型培養(yǎng)基的適應性,可以起到對菌種的有效區(qū)分。生存環(huán)境和狀態(tài)決定了對病毒的全基因組進行測序的下機數(shù)據(jù)一般都伴隨大量的宿主和其他微生物的數(shù)據(jù)。上海隨機PCR未知病原鑒定公司
對人和動物具有致病性的微生物稱為病原微生物,又稱病原體。浙江DNA病原篩查哪家好
微生物鑒定的傳統(tǒng)的鑒定方法雖然仍被普遍使用,但存在兩大缺點。它們只適用于可以體外培養(yǎng)的生物體,而且一些菌株表現(xiàn)出不符合已知種屬模式的獨特的生化特性。許多現(xiàn)代方法并不依賴于活的培養(yǎng)物,它們常常能揭示通過傳統(tǒng)方法檢測不到的有機體之間的細微差別。PCR,包括實時熒光定量PCR,可能是普遍應用于微生物鑒定的分子技術。利用PCR技術,可以快速檢測和鑒定臨床標本的微生物種類,從而加快診斷程序。大多數(shù)基于PCR的方法涉及一組通用的PCR引物,通過測序PCR擴增的序列來鑒定細菌/樣品。16S rRNA基因是PCR細菌鑒定的金標準序列,而內部轉錄間隔區(qū)(ITS)區(qū)域是種類的主要條碼標記。浙江DNA病原篩查哪家好
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