廣東病毒二代測(cè)序突變分析哪家好

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-07-03

病毒全基因組測(cè)序,基因測(cè)序技術(shù)能鎖定個(gè)人病變基因,提前預(yù)防和調(diào)整。自上世紀(jì)90年代初,學(xué)界開始涉足“人類基因組計(jì)劃”。而傳統(tǒng)的測(cè)序方式是利用光學(xué)測(cè)序技術(shù)。用不同顏色的熒光標(biāo)記四種不同的堿基,然后用激光光源去捕捉熒光信號(hào)從而獲得待測(cè)基因的序列信息。雖然這種方法檢測(cè)可靠,但是價(jià)格不菲也是有目共睹的,一臺(tái)儀器的價(jià)格大約在50萬到75萬美元,而檢測(cè)一次的費(fèi)用也高達(dá)5千到1萬美元。新的基因測(cè)序儀中,芯片代替了傳統(tǒng)激光鏡頭、熒光染色劑等,芯片就是測(cè)序儀。二代測(cè)序單次運(yùn)行可以獲得海量的數(shù)據(jù)量,因此也稱為高通量測(cè)序。廣東病毒二代測(cè)序突變分析哪家好

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病毒全基因組測(cè)序,高通量測(cè)序技術(shù)的發(fā)展在生物信息學(xué)分析方面,通過新的分析軟件的研發(fā)和原有分析軟件的升級(jí),對(duì)測(cè)序所得數(shù)據(jù)的分析也變得更加可靠;除此之外,伴隨著BasSpace等服務(wù)的出現(xiàn),進(jìn)行數(shù)據(jù)分析工作所需的設(shè)備成本也在逐步降低。將來,伴隨著高通量測(cè)序技術(shù)與數(shù)據(jù)分析技術(shù)的不斷進(jìn)步,測(cè)序精度與可靠性的上升,測(cè)序與數(shù)據(jù)分析成本的下降,高通量測(cè)序技術(shù)會(huì)在各個(gè)領(lǐng)域得到應(yīng)用。在病原微生物檢測(cè)和鑒定應(yīng)用中,高通量測(cè)序技術(shù)勢(shì)必會(huì)成為不可或缺的技術(shù)并發(fā)揮越來越重要的作用。高通量測(cè)序?qū)嶒?yàn)足夠靈敏和完善,方能獲得準(zhǔn)確、可信任的結(jié)果。國(guó)內(nèi)病毒二代測(cè)序突變分析上哪找病毒全基因組測(cè)序具有的特點(diǎn):獨(dú)有的一定定量技術(shù),實(shí)現(xiàn)病原定量分析。

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高通量基因組測(cè)序中,什么是測(cè)序深度和覆蓋度?測(cè)序深度是指測(cè)序得到的總堿基數(shù)與待測(cè)基因組大小的比值。假設(shè)一個(gè)基因大小為2M,測(cè)序深度為10X,那么獲得的總數(shù)據(jù)量為20M。覆蓋度是指測(cè)序獲得的序列占整個(gè)基因組的比例。由于基因組中的高GC、重復(fù)序列等復(fù)雜結(jié)構(gòu)的存在,測(cè)序終拼接組裝獲得的序列往往無法覆蓋有所的區(qū)域,這部分沒有獲得的區(qū)域就稱為Gap。例如一個(gè)細(xì)菌基因組測(cè)序,覆蓋度是98%,那么還有2%的序列區(qū)域是沒有通過測(cè)序獲得的。

哪些應(yīng)用場(chǎng)景需要對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序?在探普生物長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)行過程中,我們接觸到的對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序項(xiàng)目有比較豐富的應(yīng)用場(chǎng)景。先,從事基因進(jìn)化/疫苗/藥品/抗體研制方向的研究的研究者一定會(huì)用到測(cè)序。這種場(chǎng)景一般是用密集的sanger測(cè)序監(jiān)測(cè)某幾個(gè)關(guān)鍵基因,搭載一定頻率的全基因組測(cè)序。這樣的組合省時(shí)省力省經(jīng)費(fèi),同時(shí)能達(dá)到研究目的。此外,有的單位需要對(duì)傳染病的病原進(jìn)行流行病學(xué)監(jiān)測(cè)和研究,如疾控/疫控中心、醫(yī)院的傳染病科室以及一些高校和研究所的相應(yīng)課題組,可能需要對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序以后,結(jié)合其他上下游的研究數(shù)據(jù),達(dá)到研究或者監(jiān)測(cè)疫病的目的。病毒全基因測(cè)序不僅需要精密的儀器設(shè)備,也需要檢測(cè)人員具有豐富的經(jīng)驗(yàn)和過硬的技術(shù)。

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    能實(shí)現(xiàn)對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序的技術(shù)手段有哪些呢:早期在高通量測(cè)序技術(shù)普及之前,對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序是通過非特異性擴(kuò)增+克隆結(jié)合sanger測(cè)序來完成的。當(dāng)物種有了參考的序列之后,可以通過特異性擴(kuò)增+sanger測(cè)序獲得全基因組序列。Sanger測(cè)序準(zhǔn)確度高,讀長(zhǎng)很長(zhǎng),但與此同時(shí),擴(kuò)增和克隆工作費(fèi)時(shí)費(fèi)力,由于流程繁瑣,加上快速變異導(dǎo)致引物無法通用,該方法對(duì)于大量基因組的測(cè)序工作而言,可操作性不強(qiáng),這對(duì)于研究者一直是一個(gè)困擾。高通量測(cè)序技術(shù)正式啟用之后,研究者可以將樣品處理至標(biāo)準(zhǔn)濃度和體積后進(jìn)行測(cè)序和分析,減少了工作量,增加了成功率。探普生物進(jìn)行了大量有針對(duì)性的研發(fā)和測(cè)試,開發(fā)了全套的實(shí)驗(yàn)和分析流程用于對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序,該流程自運(yùn)行以來廣受研究者們好評(píng)。 病毒全基因組測(cè)序平臺(tái),鍛煉出—批精通測(cè)序的檢測(cè)隊(duì)伍。浙江病毒二代測(cè)序分析方法

病毒全基因測(cè)序技術(shù)對(duì)疾病的致病原進(jìn)行全基因組測(cè)序研究,能發(fā)現(xiàn)其中的變異與遺傳情況。廣東病毒二代測(cè)序突變分析哪家好

為了便于新發(fā)或罕見病毒性傳染病的篩查檢測(cè),利用多重置換擴(kuò)增技術(shù),以負(fù)鏈RNA病毒—發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒和正鏈RNA病毒—登革病毒為模擬樣本探索臨床樣本中RNA病毒基因組非特異性擴(kuò)增方法。研究中通過梯度稀釋的RNA病毒模擬樣本中可能存在的不同豐度的病原體,樣本核酸依次加工成單鏈cDNA,雙鏈cDNA,T4DNA連接酶處理后的雙鏈cDNA以及添加外源輔助RNA后合成并連接的雙鏈cDNA形式,然后進(jìn)行Phi29DNA聚合酶等溫?cái)U(kuò)增,使用熒光定量PCR方法比較各種方法對(duì)RNA病毒核酸擴(kuò)增的影響。廣東病毒二代測(cè)序突變分析哪家好