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微生物鑒定的用途:醫(yī)療保?。簻?zhǔn)確、快速地鑒定細(xì)菌和寄生蟲(chóng),以進(jìn)行正確和及時(shí)的疾病診斷,并進(jìn)行適當(dāng)?shù)脑\療。流行病學(xué):為了追蹤病原體和追蹤疾病的傳播和暴發(fā),以及鑒定新的隔離物,例如耐藥隔離。制藥工業(yè):由于微生物是對(duì)無(wú)菌性的重大威脅,對(duì)環(huán)境微生物的準(zhǔn)確鑒定通常是制藥行業(yè)良好的生產(chǎn)實(shí)踐(GMP)要求。其他用途:包括刑事調(diào)查、微生物取證和環(huán)境研究等。傳統(tǒng)的微生物鑒定方法依賴于表型鑒定,主要是用染色法、培養(yǎng)法和簡(jiǎn)單的生化檢驗(yàn)。宏觀特征包括微生物的整體外觀,其形狀、大小、顏色和氣味等,可以用肉眼看到。通過(guò)在瓊脂培養(yǎng)基檢查其形態(tài)學(xué)/宏觀特征來(lái)確定微生物的類(lèi)型。同一物種在不同的培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)不同的表現(xiàn)。
病原微生物檢測(cè)的不可知性,使高通量測(cè)序成為研究這類(lèi)病原微生物的有用工具.未知病原篩查
微生物快速檢測(cè)技術(shù)相對(duì)于傳統(tǒng)檢測(cè)方法,快速檢測(cè)方法是指從樣品制備到出具檢測(cè)結(jié)果的整個(gè)檢測(cè)過(guò)程能夠在短時(shí)間內(nèi)完成的檢測(cè)方法,包括在樣品制備、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備、操作過(guò)程中和自動(dòng)化上加以簡(jiǎn)化的方法。目前,國(guó)際上對(duì)“短時(shí)間”的共識(shí)主要在于三個(gè)方面:1)理化指標(biāo)的檢測(cè)分析在2h內(nèi)完成。2)應(yīng)用于現(xiàn)場(chǎng)檢查的能夠在30min內(nèi)完成。3)與傳統(tǒng)方法相比,能夠縮短1/2或1/3的時(shí)間。微生物快速檢測(cè)設(shè)備方法主要有以下幾種:微生物快速測(cè)試片技術(shù);免疫檢測(cè)技術(shù);分子生物檢測(cè)技術(shù);傳感器快速檢測(cè)技術(shù)。
山東未知病原檢測(cè)排行微生物檢測(cè)涉及多行業(yè)和領(lǐng)域。
微生物怎么進(jìn)行檢測(cè)?通過(guò)顯微鏡直接觀察。一般來(lái)說(shuō),在一定的培養(yǎng)條件下(相同的培養(yǎng)基、溫度以及培養(yǎng)時(shí)間),同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。這些特征包括菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等方面。因此可以通過(guò)顯微鏡觀察菌落特征對(duì)微生物種類(lèi)進(jìn)行判斷。使用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物或人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件。選擇培養(yǎng)基,顧名思義其作用是允許特定種類(lèi)的微生物生長(zhǎng),同時(shí)控制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。例如,使用以尿素作為氮源的培養(yǎng)基能夠培養(yǎng)出可合成脲酶的微生物;在培養(yǎng)基中ph調(diào)至酸性有利于霉菌的生長(zhǎng)繁殖(控制細(xì)菌的生命活動(dòng))等。選擇培養(yǎng)一般是通過(guò)觀察微生物的同化作用類(lèi)型或某一特征進(jìn)行間接判斷,得到的微生物往往并不只有一種,但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特征從而對(duì)其分類(lèi)。
病毒鑒定常用方法:病原學(xué)檢測(cè)主要適用于急性期血液標(biāo)本,一般認(rèn)為發(fā)病7天內(nèi)檢測(cè)陽(yáng)性率高。(1)核酸檢測(cè):采用熒光定量RT-PCR方法,是目前早期診斷寨卡病毒病的主要檢測(cè)手段。(2)病毒分離:將標(biāo)本接種于蚊源細(xì)胞(C6/36)或哺乳動(dòng)物細(xì)胞(BHK21、Vero)進(jìn)行分離培養(yǎng),出現(xiàn)病變以后,用檢測(cè)核酸的方法鑒定病毒。也可使用乳鼠腦內(nèi)接種進(jìn)行病毒分離。血清學(xué)檢測(cè):(1)血清特異性IgM抗體:發(fā)病3天后可檢出病毒特異IgM抗體,但發(fā)病7天后檢出率高。可采用ELISA、免疫熒光等方法檢測(cè)。IgM抗體陽(yáng)性,提示患者可能新近寨卡病毒,但寨卡病毒IgM抗體與登革病毒、黃熱病毒和西尼羅病毒等黃病毒有較強(qiáng)的交叉反應(yīng),易于產(chǎn)生假陽(yáng)性。(2)中和抗體:采用空斑減少中和試驗(yàn)方法檢測(cè)?;颊呋謴?fù)期血清中和抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)或滴度較急性期呈4倍及以上升高,且排除登革、乙腦等其他常見(jiàn)黃病毒,可以確診。病毒的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,只含一種核酸,必須在活細(xì)胞內(nèi)寄生并以復(fù)制方式增殖的生物.
基因芯片技術(shù)是通過(guò)微電子技術(shù)和微加工技術(shù),將海量的基因寡核苷酸進(jìn)行高密度且有序排列,使其排列在纖維膜和硅片等載體上,從而形成信息檢測(cè)芯片。采用基因芯片技術(shù)對(duì)檢測(cè)樣品DNA經(jīng)過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增后制備的探針點(diǎn)樣在基因芯片的表面,經(jīng)過(guò)熒光標(biāo)記的寡核苷酸點(diǎn)和芯片表面的探針進(jìn)行雜交,然后使用掃描儀對(duì)芯片上的熒光分布進(jìn)行分析,從而確定樣品微生物DNA中是否有某些特定的微生物?;蛐酒瑱z測(cè)技術(shù)還可在寡核苷酸的探針中添加相應(yīng)探針,借此在一定程度上擴(kuò)大檢測(cè)范圍,同時(shí)通過(guò)添加并調(diào)整探針使基因芯片檢測(cè)的準(zhǔn)確性得以提升。從理論上來(lái)說(shuō),利用基因芯片技術(shù)可在一次試驗(yàn)中有限檢測(cè)出全部潛在致病原,或者在一張基因芯片中檢出一種治病原的遺傳學(xué)指標(biāo),使基因芯片技術(shù)檢測(cè)的速度、靈敏度以及便捷性等得到提升,解決傳統(tǒng)操作的自動(dòng)化程度低、效率低以及操作復(fù)雜等問(wèn)題。病毒由核酸長(zhǎng)鏈和蛋白質(zhì)外殼構(gòu)成。杭州未知病原鑒定上哪找
一般來(lái)說(shuō),在一定的培養(yǎng)條件下,同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。未知病原篩查
病毒研究的發(fā)展:病毒研究的發(fā)展常常與病毒培養(yǎng)和檢測(cè)方法的進(jìn)步有密切的關(guān)系,特別在脊椎動(dòng)物病毒方面,小鼠和雞胚接種、組織培養(yǎng)、超速離心、凝膠電泳、電子顯微鏡和免疫測(cè)定等技術(shù),對(duì)病毒學(xué)的發(fā)展具有深刻的影響。噬菌體的培養(yǎng)和檢測(cè)方法簡(jiǎn)單。將噬菌體接種到易感細(xì)菌的肉湯培養(yǎng)物中,經(jīng)18~24小時(shí)后,混濁的培養(yǎng)物重新透明,此時(shí)細(xì)菌被裂解,大量噬菌體被釋放到肉湯中,再經(jīng)除菌過(guò)濾,即為粗制噬菌體。為了測(cè)定其中噬菌體的數(shù)量,將粗制噬菌體稀釋到每一接種量含100個(gè)左右,與過(guò)量的細(xì)菌混合,然后鋪種于瓊脂平皿上,在溫箱中培養(yǎng)過(guò)夜醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理,細(xì)菌繁殖成乳白色襯底,被噬菌體裂解的區(qū)域則在此襯底上表現(xiàn)為圓形的透明斑,稱為噬斑。未知病原篩查