河北病毒全序列測序分析原理

病毒全基因組測序定在探普生物長時間運(yùn)行過程中，我們接觸到的對病毒的全基因組進(jìn)行測序項目有比較豐富的應(yīng)用場景。先，從事基因進(jìn)化/疫苗/藥品/抗體研制方向的研究的研究者一定會用到測序。這種場景一般是用密集的sanger測序監(jiān)測某幾個關(guān)鍵基因，搭載一定頻率的全基因組測序。這樣的組合省時省力省經(jīng)費(fèi)，同時能達(dá)到研究目的。此外，有的單位需要對傳染病的病原進(jìn)行流行病學(xué)監(jiān)測和研究，如疾控/疫控中心、醫(yī)院的傳染病科室以及一些高校和研究所的相應(yīng)課題組，可能需要對病毒的全基因組進(jìn)行測序以后，結(jié)合其他上下游的研究數(shù)據(jù)，達(dá)到研究或者監(jiān)測疫病的目的。

病毒全基因測序不僅需要精密的儀器設(shè)備，也需要檢測人員具有豐富的經(jīng)驗(yàn)和過硬的技術(shù)。河北病毒全序列測序分析原理

病毒的蛋白組成的特點(diǎn)是什么？ （1）結(jié)構(gòu)蛋白由病毒的基因組編碼，結(jié)構(gòu)蛋白組成病毒體的蛋白成分如病毒體的衣殼蛋白、基質(zhì)蛋白和包膜蛋白。?? （2）非結(jié)構(gòu)蛋白由病毒的基因組編碼，但非結(jié)構(gòu)蛋白不參與病毒體構(gòu)成的蛋白成分。非結(jié)構(gòu)蛋白可存在于病毒體內(nèi)，如病毒的酶就屬于非結(jié)構(gòu)蛋白，也可存在于侵染細(xì)胞。?? 病毒結(jié)構(gòu)蛋白有以下幾種功能：①病毒結(jié)構(gòu)蛋白可保護(hù)病毒核酸，避免環(huán)境中的核酸酶和其他理化因素對病毒核酸造成破壞；②病毒結(jié)構(gòu)蛋白可參與病毒的侵染過程，衣殼蛋白和包膜上的蛋白突起能吸附至易感細(xì)胞受體，引起侵染；③具有抗原***毒基因編碼的衣殼蛋白和包膜蛋白具有良好的抗原性，能刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)。河北病毒全序列測序分析原理想要通過高通量測序獲得病毒全序列，需要經(jīng)歷:核酸純化-文庫構(gòu)建-生物信息學(xué)分析這三大基本流程。

病毒是由一種核酸分子（DNA或RNA）與蛋白質(zhì)（Protein）構(gòu)成或只由蛋白質(zhì)構(gòu)成（如朊病毒）。根據(jù)遺傳物質(zhì)的組成，可分為單鏈DNA病毒（ssDNA）、雙鏈DNA病毒（dsDNA）、單鏈RNA病毒（ssRNA）、雙鏈RNA病毒（dsRNA）和蛋白質(zhì)病毒（如朊病毒）。根據(jù)宿主類型的不同，可以分為噬菌體（細(xì)菌病毒）、植物病毒（煙花葉病毒）和動物病毒（如禽流感病毒、天花病毒和HIV等）。病毒全基因組測序（VirusWholeGenomeSequencing，VWGS），是指基于第二代高通量測序技術(shù)，對病毒全基因組進(jìn)行測序，利用生物信息分析手段，得到病毒的全基因組序列，解析編碼信息，并獲得相應(yīng)的變異信息。

DNA病毒基因組測序：動物、人、植物被特定病毒株侵染、分離到病毒株、連續(xù)傳代的病毒株往往都需要獲得盡量完整的基因組序列來指導(dǎo)下一步的研究，傳統(tǒng)的sanger測序需要了解序列、設(shè)計引物、做很多PCR，往往效率很低，而NGS作為一種無需特異性引物擴(kuò)增的測序方式，可以直接從DNA中獲得序列。DNA病毒基因組測序：如果，1，您的目的是：獲得一種指定DNA病毒盡量完整的序列；2，您可以提供該病毒的中英文名稱；3，您了解樣本中病毒的載量情況、培養(yǎng)狀況、ct值等任一信息。那么，探普為你準(zhǔn)備了完整的下單、樣本準(zhǔn)備方法，經(jīng)過探普的實(shí)驗(yàn)，測序、分析，你將獲得：1，1-5Gb測序數(shù)據(jù)量rawdata；2，一般可獲得95%以上的拼接序列，100kb以上大基因組病毒除外；其他特殊要求如：突變分析、進(jìn)化分析都可直接與技術(shù)支持聯(lián)系。

測序覆蓋度是反映測序隨機(jī)性的指標(biāo)之一。

未培養(yǎng)病毒基因組的信息標(biāo)準(zhǔn)：①關(guān)于未培養(yǎng)病毒基因組標(biāo)準(zhǔn)的信息是在基因組標(biāo)準(zhǔn)框架內(nèi)制定的，包括病毒起源、基因組質(zhì)量、基因組注釋、分類信息、生物地理分布和宿主預(yù)測；②UViGs有助于提高我們對病毒進(jìn)化歷史和病毒-宿主之間相互作用的理解；③病毒基因組組成和內(nèi)容、復(fù)制策略和宿主的異常多樣性意味著UViGs的完整性、質(zhì)量、分類學(xué)和生態(tài)學(xué)需要通過病毒特異性指標(biāo)來評估；④分析不同大小和不同樣品類型的UViGs對于探索病毒基因組序列空白是有價值的。

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病毒全基因組測序具有的特點(diǎn):獨(dú)有的一定定量技術(shù),實(shí)現(xiàn)病原定量分析!河北病毒全序列測序分析原理

高通量測序在病毒準(zhǔn)種研究中如何應(yīng)用 在采用高通量測序技術(shù)研究準(zhǔn)種耐藥性方面，人類免疫缺陷病毒(HIV)較為突出。人類免疫缺陷病毒的逆轉(zhuǎn)錄酶有非常大的錯配傾向，造成幾乎每復(fù)制1輪出現(xiàn)1個堿基對替換突變。被侵染的個體中存在非常巨大的病毒群，每天有1010個病毒粒子產(chǎn)生和死亡，在侵染后這種行為導(dǎo)致病毒快速形成一個多樣性的群，即準(zhǔn)種。高通量測序是研究大群體中序列突變體特征的先進(jìn)方法，它的一種應(yīng)用是對個體抗病毒治療失敗時產(chǎn)生的數(shù)量很少的耐藥突變的定量研究。河北病毒全序列測序分析原理