重慶病毒全基因組測(cè)序分析排行

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-10-12

病毒全基因組測(cè)序定:上海探普生物科技有限公司的對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序有什么優(yōu)勢(shì)?全國(guó)開(kāi)設(shè)病毒相關(guān)測(cè)序的公司不超過(guò)5家,只有探普生物是專門(mén)為病毒研究者服務(wù)的,探普生物的研發(fā)團(tuán)隊(duì)和實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)都來(lái)自全國(guó)各地病毒學(xué)、微生物學(xué)專業(yè)的高校,碩士及以上學(xué)歷成員超過(guò)60%,團(tuán)隊(duì)具備普通測(cè)序?qū)嶒?yàn)和分析基礎(chǔ)之外,同時(shí)具備病毒學(xué)及微生物學(xué)的學(xué)術(shù)背景,相當(dāng)了解病毒相關(guān)樣本情況、研究方向等。研究者在項(xiàng)目咨詢的時(shí)候就可以明顯感覺(jué)到探普生物的專業(yè)性,溝通順暢,省時(shí)省力。


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全基因組測(cè)序要注意的事項(xiàng):全基因組測(cè)序是對(duì)未知基因組序列的物種進(jìn)行個(gè)體的基因組測(cè)序。技術(shù)路線:提取基因組DNA,然后隨機(jī)打斷,電泳回收所需長(zhǎng)度的DNA的片段(0.2~5Kb),加上接頭,進(jìn)行DNA簇(Cluster)制備,后利用Paired-End(Solexa)或者M(jìn)ate-Pair(SOLiD)的方法對(duì)插入片段進(jìn)行測(cè)序。然后對(duì)測(cè)得的序列組裝成Contig,通過(guò)Paired-End的距離可進(jìn)一步組裝成Scaffold,進(jìn)而可組裝成染色體等。組裝效果與測(cè)序深度與覆蓋度、測(cè)序質(zhì)量等有關(guān)。常用的組裝有:SOAPdenovo、Trimity、Abyss等。測(cè)序深度(Sequencingdepth)是指測(cè)序得到的堿基總量(bp)與基因組大小的比值,它是評(píng)價(jià)測(cè)序量的指標(biāo)之一。測(cè)序深度與基因組覆蓋度之間是一個(gè)正相關(guān)的關(guān)系,測(cè)序帶來(lái)的錯(cuò)誤率或假陽(yáng)性結(jié)果會(huì)隨著測(cè)序深度的提升而下降。測(cè)序的個(gè)體,如果采用的是雙末端或Mate-Pair方案,當(dāng)測(cè)序深度在50X~100X以上時(shí),基因組覆蓋度和測(cè)序錯(cuò)誤率控制均得以保證,后續(xù)序列組裝成染色體才能變得更容易與準(zhǔn)確。


重慶深度測(cè)序分析上哪找想要通過(guò)高通量測(cè)序獲得病毒全序列,需要經(jīng)歷:核酸純化-文庫(kù)構(gòu)建-生物信息學(xué)分析這三大基本流程.

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新一代測(cè)序中基因從頭測(cè)序和重測(cè)序有什么區(qū)別?從頭測(cè)序的原理是生成互相分離的若干組帶放射性標(biāo)記的寡核苷酸,每組寡核苷酸都有固定的起點(diǎn),但卻隨機(jī)終止于特定的一種或者多種殘基上??梢詤^(qū)分長(zhǎng)度只差一個(gè)核苷酸的不同DNA分子的條件下,對(duì)各組寡核苷酸進(jìn)行電泳分析,只要把幾組寡核苷酸加樣于測(cè)序凝膠中若干個(gè)相鄰的泳道上。全基因組重測(cè)序是對(duì)已知基因組序列的物種進(jìn)行不同個(gè)體的基因組測(cè)序,并在此基礎(chǔ)上對(duì)個(gè)體或群體進(jìn)行差異性分析。SBC將不同梯度插入片段的測(cè)序文庫(kù)結(jié)合短序列、雙末端進(jìn)行測(cè)序,幫助客戶在全基因組水平上掃描并檢測(cè)與重要性狀相關(guān)的基因序列差異和結(jié)構(gòu)變異,實(shí)現(xiàn)遺傳進(jìn)化分析及重要性狀候選基因預(yù)測(cè)。


病毒全基因組測(cè)序定中利用病毒傳播過(guò)程中核酸序列上特定位置的變化來(lái)進(jìn)行分型,著重于區(qū)分不同型別病毒的來(lái)源,是我國(guó)調(diào)整防控策略的重要依據(jù)之一。傳統(tǒng)的病原微生物檢測(cè)手段包括形態(tài)學(xué)檢測(cè)、培養(yǎng)分離、生化檢測(cè)和免疫學(xué)檢測(cè)。這些方法檢測(cè)周期長(zhǎng)、靈敏度低,對(duì)操作人員的技術(shù)水平要求比較高等因素;熒光定量PCR技術(shù)和等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)等分子生物學(xué)的檢測(cè)方法部分解決了上述問(wèn)題,簡(jiǎn)單快速,通過(guò)對(duì)核酸特異性序列的檢測(cè),可在短時(shí)間內(nèi)快速判斷病原體的種類,但是這些方法無(wú)法進(jìn)行混合傳染鑒定和病毒溯源,隨著基因組學(xué)技術(shù)的發(fā)展,高通量測(cè)序技術(shù)已經(jīng)能夠做到不依賴于傳統(tǒng)的微生物培養(yǎng),可直接對(duì)臨床樣本中的核酸進(jìn)行高通量測(cè)序,然后與數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì),實(shí)現(xiàn)傳染性疾病的溯源、檢測(cè)、分型和耐藥評(píng)估等多個(gè)方面,受到越來(lái)越多臨床和科研工作者的關(guān)注。探普生物病毒測(cè)序具備樣本準(zhǔn)備簡(jiǎn)單的優(yōu)點(diǎn)。

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病毒全基因組測(cè)序定:探普生物對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序的實(shí)驗(yàn)基于二代測(cè)序技術(shù)。樣本經(jīng)過(guò)核酸純化-文庫(kù)構(gòu)建-生物信息學(xué)分析這3大基本流程后轉(zhuǎn)換成了序列數(shù)據(jù)。先,在核酸純化環(huán)節(jié),探普提供專門(mén)針對(duì)性的核酸純化樣本指南,以提高目的物種的核酸純度和得率,與此同時(shí)探普生物也提供核酸純化服務(wù)。第二,文庫(kù)構(gòu)建環(huán)節(jié),樣本的核酸具備濃度低,總量少的特點(diǎn)。探普生物專門(mén)針對(duì)這一點(diǎn)開(kāi)發(fā)了超微量核酸文庫(kù)構(gòu)建,可以將0.01ng/μl甚至更低濃度的核酸構(gòu)建成測(cè)序文庫(kù)。第三,生物信息學(xué)分析環(huán)節(jié)。生存環(huán)境和狀態(tài)決定了對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序的下機(jī)數(shù)據(jù)一般都伴隨大量的宿主和其他微生物的數(shù)據(jù)。探普生物基于該特點(diǎn),優(yōu)化了自有數(shù)據(jù)庫(kù),搭載了專門(mén)用的的生物信息學(xué)分析流程,可處理復(fù)雜背景下的目標(biāo)物種序列。


團(tuán)隊(duì)具備普通測(cè)序?qū)嶒?yàn)和分析基礎(chǔ)。武漢深度測(cè)序分析價(jià)格

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目前對(duì)我國(guó)首例輸入性裂谷熱病例病毒進(jìn)行全基因組測(cè)定,分析其進(jìn)化來(lái)源及潛在變異.方法提取樣本核酸,非特異性反轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增病毒基因組RNA,使用IonTorrent二代測(cè)序儀進(jìn)行病毒全基因組測(cè)定.對(duì)獲得的基因組數(shù)據(jù)進(jìn)行序列拼接、比對(duì)、進(jìn)化樹(shù)構(gòu)建和關(guān)鍵位點(diǎn)分析.結(jié)果通過(guò)測(cè)定獲得了病毒全基因組11979nt,該測(cè)定病毒屬E基因分支,序列與先前南非分離株Kakamas相似度較高(>98%)。病毒Gn蛋白C端信號(hào)肽區(qū)存在1個(gè)氨基酸突變.結(jié)論本研究分析測(cè)定的裂谷熱病毒全基因組與目前非洲流行株高度相似,病毒基因特征未出現(xiàn)明顯變異。


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