鄭州病毒檢測服務(wù)公司

來源: 發(fā)布時間:2023-06-20

實現(xiàn)病原微生物種類鑒定有哪些技術(shù)手段?病原微生物的研究歷史不算長。發(fā)展至今已經(jīng)有了成套的檢測體系。利用不同類別的微生物有其本身不同于其他微生物的特點,如從培養(yǎng)形態(tài)、顯微鏡觀測形態(tài)、生物學(xué)功能、致病性、生物化學(xué)反應(yīng)、抗原抗體反應(yīng)、核酸序列等方面,都可以進(jìn)行相當(dāng)程度的鑒別。即便如此,依然有很多微生物通過傳統(tǒng)技術(shù)無法鑒別。高通量測序技術(shù)問世,給微生物鑒別打開一扇新的大門。它對核酸進(jìn)行測序是非特異的,因此,對一無所知的核酸也可以實現(xiàn)鑒別。


病原微生物檢測的不可知性,使高通量測序成為研究這類病原微生物的有用工具.鄭州病毒檢測服務(wù)公司

微生物快速檢測技術(shù)相對于傳統(tǒng)檢測方法,快速檢測方法是指從樣品制備到出具檢測結(jié)果的整個檢測過程能夠在短時間內(nèi)完成的檢測方法,包括在樣品制備、實驗準(zhǔn)備、操作過程中和自動化上加以簡化的方法。目前,國際上對“短時間”的共識主要在于三個方面:1)理化指標(biāo)的檢測分析在2h內(nèi)完成。2)應(yīng)用于現(xiàn)場檢查的能夠在30min內(nèi)完成。3)與傳統(tǒng)方法相比,能夠縮短1/2或1/3的時間。微生物快速檢測設(shè)備方法主要有以下幾種:微生物快速測試片技術(shù);免疫檢測技術(shù);分子生物檢測技術(shù);傳感器快速檢測技術(shù)。


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微生物檢測中含有一種以上的微生物培養(yǎng)物稱為混和培養(yǎng)物。如果在一個菌落中所有細(xì)胞均來自于一個親代細(xì)胞,那么這個菌落稱為純培養(yǎng)(pureculture)。在進(jìn)行菌種鑒定時,所用的微生物一般均要求為純的培養(yǎng)物。得到純培養(yǎng)的過程稱為分離純化,方法有許多種。先把微生物懸液通過一系列稀釋,取一定量的稀釋液與熔化好的保持在40-50℃左右的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基充分混合,然后把這混合液傾注到無菌的培養(yǎng)皿中,待凝固之后,把這平板倒置在恒箱中培養(yǎng)。單一細(xì)胞經(jīng)過多次增殖后形成一個菌落,取單個菌落制成懸液,重復(fù)上述步驟數(shù)次,便可得到純培養(yǎng)物。


微生物怎么進(jìn)行檢測?通過顯微鏡直接觀察。一般來說,在一定的培養(yǎng)條件下(相同的培養(yǎng)基、溫度以及培養(yǎng)時間),同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。這些特征包括菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等方面。因此可以通過顯微鏡觀察菌落特征對微生物種類進(jìn)行判斷。使用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物或人為提供有利于目的菌株生長的條件。選擇培養(yǎng)基,顧名思義其作用是允許特定種類的微生物生長,同時控制或阻止其他微生物生長。例如,使用以尿素作為氮源的培養(yǎng)基能夠培養(yǎng)出可合成脲酶的微生物;在培養(yǎng)基中ph調(diào)至酸性有利于霉菌的生長繁殖(控制細(xì)菌的生命活動)等。選擇培養(yǎng)一般是通過觀察微生物的同化作用類型或某一特征進(jìn)行間接判斷,得到的微生物往往并不只有一種,但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特征從而對其分類。


大多微生物鑒定系統(tǒng)是采用細(xì)菌分解底物后反應(yīng)液中pH變化的。

未知病原微生物鑒定相關(guān)知識:在實驗室中,為了分離某些厭氧菌,可以利用裝有原培養(yǎng)基的試管作為培養(yǎng)容器,把這支試管放在沸水0浴中加熱數(shù)分鐘,以便逐出培養(yǎng)基中的溶解氧。然后快速冷卻,并進(jìn)行接種。接種后,加入無菌的石蠟于培養(yǎng)基表面,使培養(yǎng)基與空氣隔絕。另一種方法是,在接種后,利用n2或co2取代培養(yǎng)基中的氣體,然后在火焰上把試管口密封。有時為了更有效地分離某些厭氧菌,可以把所分離的樣品接種于培養(yǎng)基上,然后再把培養(yǎng)皿放在完全密封的厭氧培養(yǎng)裝置中。未知病原微生物鑒定要注意什么問題?DNA新病毒篩查價格

傳統(tǒng)的微生物檢測方法:直接顯微鏡觀察。鄭州病毒檢測服務(wù)公司

病毒鑒定常用方法:病原學(xué)檢測主要適用于急性期血液標(biāo)本,一般認(rèn)為發(fā)病7天內(nèi)檢測陽性率高。(1)核酸檢測:采用熒光定量RT-PCR方法,是目前早期診斷寨卡病毒病的主要檢測手段。(2)病毒分離:將標(biāo)本接種于蚊源細(xì)胞(C6/36)或哺乳動物細(xì)胞(BHK21、Vero)進(jìn)行分離培養(yǎng),出現(xiàn)病變以后,用檢測核酸的方法鑒定病毒。也可使用乳鼠腦內(nèi)接種進(jìn)行病毒分離。血清學(xué)檢測:(1)血清特異性IgM抗體:發(fā)病3天后可檢出病毒特異IgM抗體,但發(fā)病7天后檢出率高。可采用ELISA、免疫熒光等方法檢測。IgM抗體陽性,提示患者可能新近寨卡病毒,但寨卡病毒IgM抗體與登革病毒、黃熱病毒和西尼羅病毒等黃病毒有較強(qiáng)的交叉反應(yīng),易于產(chǎn)生假陽性。(2)中和抗體:采用空斑減少中和試驗方法檢測?;颊呋謴?fù)期血清中和抗體陽轉(zhuǎn)或滴度較急性期呈4倍及以上升高,且排除登革、乙腦等其他常見黃病毒,可以確診。鄭州病毒檢測服務(wù)公司

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