河北全基因組病毒二代測(cè)序哪家好

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-06-17

病毒全基因組測(cè)序定中為了便于新發(fā)或罕見(jiàn)病毒性傳染病的篩查檢測(cè),利用多重置換擴(kuò)增技術(shù),以負(fù)鏈RNA病毒—發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒和正鏈RNA病毒—登革病毒為模擬樣本探索臨床樣本中RNA病毒基因組非特異性擴(kuò)增方法。研究中通過(guò)梯度稀釋的RNA病毒模擬樣本中可能存在的不同豐度的病原體,樣本核酸依次加工成單鏈cDNA,雙鏈cDNA,T4DNA連接酶處理后的雙鏈cDNA以及添加外源輔助RNA后合成并連接的雙鏈cDNA形式,然后進(jìn)行Phi29DNA聚合酶等溫?cái)U(kuò)增,使用熒光定量PCR方法比較各種方法對(duì)RNA病毒核酸擴(kuò)增的影響。


測(cè)序的完成程度,決定著基因組的下游應(yīng)用。河北全基因組病毒二代測(cè)序哪家好

病毒準(zhǔn)種的漂變將使毒株的特點(diǎn)及傳播方式發(fā)生改變,給現(xiàn)有的檢測(cè)手段和防治措施帶來(lái)嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。新一代高通量測(cè)序技術(shù)的出現(xiàn)使得檢測(cè)某個(gè)物種的混合PCR產(chǎn)物中低頻率的變異體十分便利它的出現(xiàn)加快了研究準(zhǔn)種的規(guī)律性和影響因素的步伐。新一代測(cè)序儀將以往的測(cè)序費(fèi)用降低了好幾個(gè)數(shù)量級(jí)。鑒于此,以前只有大型測(cè)序中心才能夠開(kāi)展的項(xiàng)目,現(xiàn)在在小型實(shí)驗(yàn)室里也能順利進(jìn)行了,按照目前的發(fā)展速度,新一代高通量測(cè)序技術(shù)有望給生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域帶來(lái)**性的變革。河北全基因組病毒二代測(cè)序哪家好全基因組預(yù)測(cè)的意義揭示了人類(lèi)生、老、病和死的奧秘。

二代測(cè)序應(yīng)用的患者類(lèi)型的推薦:共識(shí)明確指出了二代測(cè)序應(yīng)用的患者類(lèi)型及使用的時(shí)機(jī)的意見(jiàn):對(duì)于神經(jīng)系統(tǒng)急性傳染/血流傳染/呼吸道傳染患者,3天是二代測(cè)序使用的時(shí)機(jī),在傳統(tǒng)方法(常規(guī)的生化檢查和培養(yǎng))3天未報(bào)陽(yáng)性且經(jīng)驗(yàn)性調(diào)整無(wú)效時(shí),強(qiáng)烈推薦二代測(cè)序檢測(cè);對(duì)疑似病毒傳染患者,包括:疑似神經(jīng)系統(tǒng)病毒傳染和病毒性肺炎且病情持續(xù)進(jìn)展的患者,若完善傳統(tǒng)PCR檢測(cè)后依然未獲得明確的病原學(xué)證據(jù)時(shí),強(qiáng)烈推薦二代測(cè)序檢測(cè)。對(duì)于疑似局灶性傳染患者完成常規(guī)的生物化學(xué)、培養(yǎng)或PCR檢測(cè)后,若未能獲取病原學(xué)診斷結(jié)果,推薦將二代測(cè)序作為檢測(cè)方法。而對(duì)于懷疑繼發(fā)性血流傳染患者:在原發(fā)傳染灶的病原學(xué)檢測(cè)為陰性或因各種因素?zé)o法送檢合適標(biāo)本的情況下,可考慮將血標(biāo)本的二代測(cè)序檢測(cè)作為二線檢測(cè)。


深度測(cè)序技術(shù)對(duì)社會(huì)的影響:深度測(cè)序技術(shù)促進(jìn)了基因檢測(cè)的普及,對(duì)社會(huì)的影響第1個(gè)方面反映在商業(yè)模式的變化,即醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)和健康管理方面的平民化、個(gè)性化趨勢(shì)的形成。社會(huì)生活受到深度測(cè)序技術(shù)影響的第二個(gè)方面是基因測(cè)序的普遍應(yīng)用。例如,基因關(guān)聯(lián)將人與人通過(guò)遺傳學(xué)關(guān)聯(lián)起來(lái),人們可以對(duì)基因進(jìn)行分析判定親緣關(guān)系,基因測(cè)定甚至可以幫助判定婚姻(包括遺傳病等方面的)匹配度。公安機(jī)關(guān)可以通過(guò)基因比對(duì),鎖定犯罪嫌疑人、尋找丟散的兒童和親人。甚至有報(bào)道表明,測(cè)定20多個(gè)基因就可以將人臉重構(gòu)?;驒z測(cè)的應(yīng)用將隨著基因-表型的關(guān)聯(lián)得到更普遍的應(yīng)用,對(duì)社會(huì)生活的方方面面起到重要作用。


DNA病毒基因組測(cè)序:一種指定DNA病毒盡量完整的序列。

目前對(duì)我國(guó)首例輸入性裂谷熱病例病毒進(jìn)行全基因組測(cè)定,分析其進(jìn)化來(lái)源及潛在變異.方法提取樣本核酸,非特異性反轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增病毒基因組RNA,使用IonTorrent二代測(cè)序儀進(jìn)行病毒全基因組測(cè)定.對(duì)獲得的基因組數(shù)據(jù)進(jìn)行序列拼接、比對(duì)、進(jìn)化樹(shù)構(gòu)建和關(guān)鍵位點(diǎn)分析.結(jié)果通過(guò)測(cè)定獲得了病毒全基因組11979nt,該測(cè)定病毒屬E基因分支,序列與先前南非分離株Kakamas相似度較高(>98%).病毒Gn蛋白C端信號(hào)肽區(qū)存在1個(gè)氨基酸突變.結(jié)論本研究分析測(cè)定的裂谷熱病毒全基因組與目前非洲流行株高度相似,病毒基因特征未出現(xiàn)明顯變異。


Sanger測(cè)序準(zhǔn)確度高,讀長(zhǎng)很長(zhǎng)。RNA病毒深度測(cè)序分析哪家好

二代測(cè)序可以用于對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序有哪些挑戰(zhàn)?河北全基因組病毒二代測(cè)序哪家好

一直以來(lái),病毒基因組測(cè)序都是疾病診斷、流行病學(xué)調(diào)查和宿主-病原關(guān)系研究的重要手段。病毒的全基因組測(cè)序以及對(duì)應(yīng)的生物信息學(xué)分析方法是研究病毒進(jìn)化、毒力因子變異、疫病爆發(fā)之間的關(guān)系、疫病傳播途徑、不同遺傳變異的分布模式、疫病發(fā)生地理區(qū)域的基礎(chǔ)。與傳統(tǒng)Sanger測(cè)序相比,NGS技術(shù)的發(fā)展使得一個(gè)小的研究小組可以擁有大量病毒株的全基因組序列,測(cè)序成本也在逐步降低。由于NGS產(chǎn)生的數(shù)據(jù)量非常龐大,其序列拼接難度也隨之增加。而且對(duì)于低濃度高復(fù)雜度的樣本,研究者除了PCR外別無(wú)他法。而PCR方法往往具有偏好性,丟失的片段將為序列組裝帶來(lái)非常高的失敗率。對(duì)于完全未知的樣本,無(wú)法通過(guò)PCR進(jìn)行富集,要鑒定其種類(lèi)需要調(diào)用各種方法,逐個(gè)嘗試工作量之大,其效率之低,使得一個(gè)新的研究方法的出現(xiàn)及其必要。


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