鄭州水體微生物多樣性分析

病原體-宏基因組測(cè)序:1.開發(fā)了一種經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的臨床mNGS檢測(cè)方法，用于在許可的微生物實(shí)驗(yàn)室中診斷腦脊髓液（CSF）引起的腦膜炎和腦炎的傳染原因。2.開發(fā)了定制的生物信息學(xué)管道SURPI+，以快速分析mNGS數(shù)據(jù)，生成檢測(cè)到的病原體的自動(dòng)摘要，并提供用于評(píng)估和解釋結(jié)果的圖形用戶界面。3.mNGS提供了一種全方面的方法，通過(guò)該方法可以在一次測(cè)定中準(zhǔn)確鑒定幾乎所有潛在病原體-病毒，細(xì)菌，寄生蟲。4.將mNGS測(cè)試遷移到臨床微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室仍然面臨許多挑戰(zhàn)：1、缺乏用于mNGS臨床驗(yàn)證的既定藍(lán)圖；2、難以將病原體從殖民者或污染物中區(qū)分開；3、缺乏專為臨床診斷使用的生物信息學(xué)軟件；4、注重質(zhì)量和全方面性的可獲得的參考數(shù)據(jù)庫(kù)；5、臨床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)修正案（CLIA）環(huán)境中，患者診斷測(cè)試固有的法規(guī)遵從性要求。由于微生物是對(duì)無(wú)菌性的重大威脅，對(duì)環(huán)境微生物的準(zhǔn)確鑒定通常是制藥行業(yè)良好的生產(chǎn)實(shí)踐(GMP)要求。鄭州水體微生物多樣性分析

優(yōu)化臨床制備病毒宏基因組測(cè)序樣本的方法：①介紹高通量病毒宏基因組測(cè)序的樣本制備步驟，對(duì)臨床樣本的總核酸進(jìn)行隨機(jī)擴(kuò)增；②檢測(cè)了從血漿樣本中富集/擴(kuò)增DNA及RNA病毒的不同方法，一種包括過(guò)濾、核酸酶消化、在不同反應(yīng)中隨機(jī)擴(kuò)增DNA及RNA的步驟是較好的；③隨后在包含了不同病毒科的樣本中驗(yàn)證此方法，可高讀數(shù)地檢測(cè)到大多數(shù)病毒序列，且優(yōu)于現(xiàn)行的其它樣本制備方法；④該方法不僅適用于血漿樣本，還可用于尿液、咽喉拭子等臨床樣本。武漢水體微生物多樣性分析方法病毒全基因組測(cè)序產(chǎn)品特點(diǎn)：獨(dú)特的定量技術(shù)，實(shí)現(xiàn)病原定量分析，使病原診斷更準(zhǔn)確。

病毒宏基因組測(cè)序研究案例：噬菌體是糞便病毒組的主要成員，糞便病毒組移植（FVT）或能有效的調(diào)節(jié)腸道菌群。在該項(xiàng)概念驗(yàn)證試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，接受瘦小鼠的糞便病毒組移植后，飼喂高脂食物的小鼠體重增長(zhǎng)變慢，同時(shí)還能保持正常的血糖指標(biāo)，F(xiàn)VT引起的腸道菌群變化介導(dǎo)了這些保護(hù)性功能代謝作用。這項(xiàng)研究表明，F(xiàn)VT療法或能用來(lái)改善肥胖和糖尿病等腸道菌群相關(guān)代謝類疾病。對(duì)噬菌體不造成損傷，大程度保證了病毒活性，適用于下游FVT研究。宏病毒組學(xué)(ViralMetagenomics)是宏基因組學(xué)的一個(gè)分支，但與傳統(tǒng)的宏基因組學(xué)概念不同，它是在宏基因組學(xué)概念的基礎(chǔ)上，結(jié)合病毒自身的特點(diǎn)，將宏基因組學(xué)方法應(yīng)用到病毒學(xué)領(lǐng)域而形成的。

病毒宏基因組測(cè)序：可直接對(duì)樣本中的核酸進(jìn)行高通量測(cè)序，鑒定樣本中可能存在的病原菌，輔助臨床決策。覆蓋細(xì)菌、病毒、寄生蟲、衣原體、立克次氏體、螺旋體等13396種微生物；同時(shí)進(jìn)行耐藥基因檢測(cè)，涵蓋266種耐藥菌，2984種抗性基因。宏基因組測(cè)序在新發(fā)腹瀉病毒鑒定中的應(yīng)用：發(fā)現(xiàn)和鑒定新病毒以及確定新病毒與疾病的關(guān)系是預(yù)防、診斷和新發(fā)病毒性傳染病的首要任務(wù)。高通量測(cè)序技術(shù)突破了傳統(tǒng)技術(shù)方法的局限，可以直接以標(biāo)本中所有的遺傳物質(zhì)為研究對(duì)象，從而能夠快速地鑒定出標(biāo)本中存在的病毒，形成了一門研究特定環(huán)境中病毒群落的新興學(xué)科：病毒宏基因組學(xué)(宏病毒組)。全基因組測(cè)序通過(guò)運(yùn)用新一代高通量DNA測(cè)序儀，進(jìn)行10到20倍覆蓋率的個(gè)人全基因組測(cè)序。

病原宏基因組測(cè)序（mNGS）可與實(shí)時(shí)熒光定量PCR（RT-PCR）技術(shù)聯(lián)合使用，實(shí)現(xiàn)優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)。“RT-PCR由于其檢測(cè)速度快、操作流程簡(jiǎn)單、成本較低的原因，更適用于大規(guī)模的篩查中，以便快速獲得是否為核酸陽(yáng)性的初步證據(jù)，而對(duì)于RT-PCR檢測(cè)陰性、但臨床表型高度疑似的患者，利用mNGS進(jìn)一步確認(rèn)可有效提高檢測(cè)結(jié)果的可靠性，并獲得是否有其他病原體傳染的信息?！睂?duì)于RT-PCR檢測(cè)陽(yáng)性的樣本，也可以進(jìn)一步利用mNGS進(jìn)行病毒全序列的分析，從而幫助獲得病毒是否發(fā)生變異的信息，為疫苗、藥物研發(fā)等方面提供可靠證據(jù)。傳統(tǒng)Sanger測(cè)序相比，NGS技術(shù)的發(fā)展使得一個(gè)小的研究小組可以擁有大量病毒株的全基因組序列。成都宏病毒學(xué)測(cè)序分析原理

隨著醫(yī)學(xué)微生物學(xué)研究技術(shù)的不斷發(fā)展，病原學(xué)診斷已不再局限于病原體水平。鄭州水體微生物多樣性分析

對(duì)于病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序價(jià)格合理；樣品具備什么條件才可以獲得比較質(zhì)量的組裝效果？其他公司對(duì)用于測(cè)序的樣本的要求較高。探普生物對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序是基于探普的專有流程，樣本要求非常低，不要求粒子純化，不要求總量到達(dá)微克，按探普的專門的收樣標(biāo)準(zhǔn)和送樣流程進(jìn)行即可。簡(jiǎn)言之，經(jīng)過(guò)細(xì)胞或其他方式培養(yǎng)的樣本，若載量較高，不需要復(fù)雜處理，直接破碎細(xì)胞取上清提取核酸都可以獲得非常好的組裝效果；而臨床標(biāo)本，需要看情況，對(duì)于被侵害嚴(yán)重的個(gè)體，釋放較高的部位也可以獲得很好的效果；其他類型的樣本，就需要測(cè)ct值來(lái)確定是否可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以及評(píng)估測(cè)序效果。鄭州水體微生物多樣性分析