病毒基因測序原理

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-04-04

探普生物進(jìn)行病毒基因組測序的流程:在探普生物進(jìn)行病毒基因組測序非常簡單,簡而言之,客戶只需要說清楚樣品情況,準(zhǔn)備樣品即可,其他事宜都由探普來進(jìn)行安排。大致流程如下:1)與銷售人員溝通項(xiàng)目需求和樣本情況;2)探普生物工作人員擬定項(xiàng)目合同,雙方協(xié)商合同內(nèi)容后簽字蓋章;3)按樣本準(zhǔn)備指南準(zhǔn)備好樣本,填寫信息單后通知銷售人員預(yù)訂干冰,安排樣本寄運(yùn)輸;4)客戶支付項(xiàng)目啟動(dòng)款,探普生物啟動(dòng)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)和分析并提供測序報(bào)告;5)客戶支付項(xiàng)目尾款,探普生物提交測序數(shù)據(jù)和分析結(jié)果;6)售后問題處理,項(xiàng)目結(jié)題。病毒全基因組測序要注意什么?病毒基因測序原理

需要對病毒的全基因組進(jìn)行測序的應(yīng)用場景:在探普生物長時(shí)間運(yùn)行過程中,我們接觸到的對病毒的全基因組進(jìn)行測序項(xiàng)目有比較豐富的應(yīng)用場景。先,從事基因進(jìn)化/疫苗/藥品/抗體研制方向的研究的研究者一定會(huì)用到測序。這種場景一般是用密集的sanger測序監(jiān)測某幾個(gè)關(guān)鍵基因,搭載一定頻率的全基因組測序。這樣的組合省時(shí)省力省經(jīng)費(fèi),同時(shí)能達(dá)到研究目的。此外,有的單位需要對傳染病的病原進(jìn)行流行病學(xué)監(jiān)測和研究,如疾控/疫控中心、醫(yī)院的傳染病科室以及一些高校和研究所的相應(yīng)課題組,可能需要對病毒的全基因組進(jìn)行測序以后,結(jié)合其他上下游的研究數(shù)據(jù),達(dá)到研究或者監(jiān)測疫病的目的。病毒基因測序原理對病毒的全基因組進(jìn)行測序主要是通過非特異性擴(kuò)增+克隆結(jié)合sanger測序來完成。

病毒基因組測序的五條標(biāo)準(zhǔn)是:測序的完成程度,決定著基因組的下游應(yīng)用,包括設(shè)計(jì)診斷產(chǎn)品、反向遺傳系統(tǒng)以及開發(fā)調(diào)整對策等?;蚪M是生物體內(nèi)的遺傳物質(zhì),以DNA或RNA的形式編碼。病毒基因組包括基因和一些非編碼的DNA或RNA序列,含有病毒復(fù)制和傳播所必需的信息。因此,確定這些序列可以獲得寶貴的信息,可以應(yīng)用于各種醫(yī)學(xué)和科研領(lǐng)域。高通量測序技術(shù)飛速發(fā)展,現(xiàn)在幾乎所有的病毒研究方向都涉及了測序,包括分子流行病學(xué)、藥物和疫苗開發(fā)、病毒的監(jiān)控與診斷等等。

深度測序技術(shù)對科學(xué)研究范式相關(guān)影響:個(gè)性化醫(yī)學(xué)、P4醫(yī)學(xué)和準(zhǔn)確醫(yī)學(xué)等研究范式都是在近幾年深度測序技術(shù)迅猛發(fā)展的基礎(chǔ)上提出的。個(gè)人基因組測定的可行性,使得大眾有可能測定和分析自己的基因組、尋找到個(gè)人健康相關(guān)的基因風(fēng)險(xiǎn)因素,從而可以在生活習(xí)慣、飲食等方面提早進(jìn)行個(gè)性化預(yù)測和預(yù)防。由于互聯(lián)網(wǎng)的發(fā)展和即時(shí)檢驗(yàn)技術(shù)(point-of-care-testing,POCT)的應(yīng)用,人們可以通過網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行交流和參與到整個(gè)診療過程,這便是P4醫(yī)學(xué)的概念:預(yù)測性(predictive)、預(yù)防性(preventive)、個(gè)性化(personalized)及參與性(participatory)。病毒全基因組測序具有的特點(diǎn):更加貼合需求。

全基因組測序要注意的事項(xiàng):全基因組測序是對未知基因組序列的物種進(jìn)行個(gè)體的基因組測序。技術(shù)路線:提取基因組DNA,然后隨機(jī)打斷,電泳回收所需長度的DNA的片段(0.2~5Kb),加上接頭,進(jìn)行DNA簇(Cluster)制備,后利用Paired-End(Solexa)或者M(jìn)ate-Pair(SOLiD)的方法對插入片段進(jìn)行測序。然后對測得的序列組裝成Contig,通過Paired-End的距離可進(jìn)一步組裝成Scaffold,進(jìn)而可組裝成染色體等。組裝效果與測序深度與覆蓋度、測序質(zhì)量等有關(guān)。常用的組裝有:SOAPdenovo、Trimity、Abyss等。測序深度(Sequencingdepth)是指測序得到的堿基總量(bp)與基因組大小的比值,它是評價(jià)測序量的指標(biāo)之一。測序深度與基因組覆蓋度之間是一個(gè)正相關(guān)的關(guān)系,測序帶來的錯(cuò)誤率或假陽性結(jié)果會(huì)隨著測序深度的提升而下降。測序的個(gè)體,如果采用的是雙末端或Mate-Pair方案,當(dāng)測序深度在50X~100X以上時(shí),基因組覆蓋度和測序錯(cuò)誤率控制均得以保證,后續(xù)序列組裝成染色體才能變得更容易與準(zhǔn)確。深度測序數(shù)據(jù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域數(shù)量增加快、應(yīng)用廣的數(shù)據(jù)。DNA深度測序進(jìn)化分析上哪找

新一代測序中基因從頭測序和重測序有什么區(qū)別?病毒基因測序原理

病原學(xué)的診斷注意事項(xiàng):病原學(xué)的診斷始終是傳染性疾病診斷的重要一環(huán),二代測序作為病原學(xué)診斷的性技術(shù),也在臨床上不斷的探索、落地,“中國宏基因組學(xué)第二代測序技術(shù)檢測傳染病原體的臨床應(yīng)用**共識”是世界開始針對所有傳染性疾病的宏基因組學(xué)第二代測序技術(shù)臨床應(yīng)用**共識,是中國傳染性疾病臨床**對二代測序技術(shù)的臨床應(yīng)用的規(guī)范與質(zhì)量控制達(dá)成的共識。由于二代測序的成本仍然較高,尚不能作為輕癥傳染性疾病的主要選擇(A,Ⅲ),完成一次二代測序需要數(shù)千元人民幣,與之相比,完成1次血培養(yǎng)約40元人民幣,完成1次16SPCR檢測則需約50元人民幣。病毒基因測序原理

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