福建正規(guī)EdU細胞增殖檢測試劑盒評價

來源: 發(fā)布時間:2021-12-14

細胞增殖分析是細胞生長和分化研究的關(guān)鍵,在藥物開發(fā)階段常用來評估化學(xué)藥物的毒性和對細胞生長的控制作用。經(jīng)過之后的細胞分裂階段,各個子代細胞會從母細胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細胞儀對熒光強度進行分析,即可測定出自標(biāo)記結(jié)合起,單個細胞或細胞群所經(jīng)歷的傳代數(shù)目。通常根據(jù)平均DNA含量或細胞代謝參數(shù)進行細胞增殖檢測,此類分析可以報告出總細胞數(shù)目和活細胞數(shù)目,或者測定出單個細胞內(nèi)的DNA合成情況。細胞增殖染料稀釋分析主要基于細胞膜通透性,熒光團分子、染料進入細胞后,將會共價結(jié)合到蛋白質(zhì)上的氨基基團上,從而使染料能夠長時間停留在細胞中。EdU細胞增殖檢測試劑盒常見的用途有哪些?上海東寰告訴您。福建正規(guī)EdU細胞增殖檢測試劑盒評價

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EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,分子量很小,在動物體內(nèi)能夠迅速擴散到各種組織和中,并滲入正在復(fù)制的DNA分子,通過基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應(yīng)即可簡單、快速、準(zhǔn)確地檢測出細胞增殖情況。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法用量小得多,十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測試劑盒相同甚至更好的檢測結(jié)果,而且小分子化學(xué)反應(yīng)檢測方法反應(yīng)快,效率高,反應(yīng)時間需幾分鐘,不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過夜孵育,能夠更好地保護細胞形態(tài),更簡單、更靈敏、更快速、更準(zhǔn)確江蘇品牌EdU細胞增殖檢測試劑盒原理有哪些領(lǐng)域需要使用EdU細胞增殖檢測試劑盒?

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細胞增殖的能力是評價細胞、代謝、生理、病理狀況、細胞活性、基因毒性等的重要指標(biāo)之一,細胞增殖雖然與多種因素有關(guān),比如細胞代謝活性、與細胞增殖相關(guān)的蛋白表達、ATP的濃度等等,但是檢測細胞增殖現(xiàn)象的*直接*準(zhǔn)確的方法就是用熒光探針直接檢測遺傳物質(zhì)DNA的合成,這種方法是研究細胞增殖、信號通路、DNA修復(fù)及分化等等方向常用的方法。目前,基于DNA的合成原理,人們*初開發(fā)了工具是BrdU染色法,但是這種方法操作耗時長,往往需要過夜處理細胞,操作繁雜,比如需要DNA變性、抗原修復(fù)以及抗原抗體反應(yīng)等操作,后來在BrdU的基礎(chǔ)上,人們開發(fā)出了**性的探針--EdU,這種方法不需要繁雜的操作,節(jié)約時間,且反應(yīng)更靈敏和準(zhǔn)確。

建議染色完成后立即進行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請于4°C條件下避光濕潤保存3天之內(nèi)完成拍照。若為細胞爬片或涂片,可使用抗熒光淬滅封片劑進行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細胞內(nèi)抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性EdU細胞增殖檢測試劑盒給社會帶來了什么好處?

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EdU標(biāo)記(a)將細胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細胞2小時,棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)大多數(shù)**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細胞可降低清洗強度上海東寰告訴您EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好?北京提供EdU細胞增殖檢測試劑盒供應(yīng)商

使用EdU細胞增殖檢測試劑盒到底有什么好處?福建正規(guī)EdU細胞增殖檢測試劑盒評價

EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內(nèi)更容易擴散,不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測細胞增殖的真實情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。AdrianSalic特別強調(diào):“與傳統(tǒng)的免疫熒光染色不同,EdU反應(yīng)能在幾分鐘內(nèi)完成,且不需要進行嚴(yán)格的樣品變性處理,使得組織成像更簡單易行?!奔毎鲋硻z測方法基于EdU與Apollo?熒光染料的完美結(jié)合準(zhǔn)確檢測新合成的DNA,簡單,快速,準(zhǔn)確。這種檢測方法非??焖?,且只需簡單的幾個步驟,因此也適用于高通量篩選試驗,如在藥物篩選中檢測加藥后細胞的活力。福建正規(guī)EdU細胞增殖檢測試劑盒評價

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