松江區(qū)非酒肝疾病動(dòng)物模型建模

    建立一種理想的腰椎間盤突出的動(dòng)物模型對(duì)本病的機(jī)制研究和臨床防治具有重要意義。現(xiàn)有模型對(duì)腰椎間盤突出癥的模擬均存在明顯不足，或與臨床實(shí)際病變部位有一定差距，如慢性坐骨神經(jīng)結(jié)扎模型；或操作難度大，對(duì)動(dòng)物損傷重，如自體髓核移植模型，選擇性神經(jīng)根結(jié)扎模型。因此，急需一種新的操作簡(jiǎn)單，重復(fù)率高，穩(wěn)定且能準(zhǔn)確模擬腰椎間盤突出后癥狀的動(dòng)物模型。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為了建立一種操作簡(jiǎn)單，穩(wěn)定好且能準(zhǔn)確模擬腰椎間盤突出后癥狀的動(dòng)物模型，本發(fā)明提供了一種大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型的制備方法。其包括以下步驟：步驟一、麻醉大鼠；步驟二、于大鼠腰4到骶1水平左側(cè)或右側(cè)作縱行切口，切開皮膚，鈍性分離椎旁肌，暴露腰4椎間孔和腰5椎間孔；步驟三、將壓迫元件插入到左側(cè)或右側(cè)腰4椎間孔及腰5椎間孔中，得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。其中，步驟一具體為：腹腔注射1％戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠后，將大鼠背部剃毛，碘伏消毒背部皮膚，俯臥位固定于動(dòng)物手術(shù)臺(tái)上，鋪無菌巾。在一個(gè)具體實(shí)施方式中，壓迫元件為l型棒；步驟三具體為：將2根l型棒的***端分別插入到左側(cè)或右側(cè)腰4椎間孔及腰5椎間孔中，l型棒的第二端置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。小鼠是人類疾病理想的動(dòng)物模型不僅因?yàn)樾∈笤谏砩吓c人類極為相似而且小鼠的遺傳資源非常豐富。松江區(qū)非酒肝疾病動(dòng)物模型建模

1、動(dòng)物模型名稱：卵清蛋白聯(lián)合氫氧化鋁致支氣管***豚鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬：豚鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別：雌雄不限4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡：7~8周齡5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重：250~350g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境：SPF級(jí)。1、實(shí)驗(yàn)方法：卵清蛋白聯(lián)合氫氧化鋁誘導(dǎo)。每只豚鼠腹腔注射100μg卵清蛋白（OVA）+30mg氫氧化鋁（Al(OH)3）致敏。***次致敏后第5天再致敏1次，共2次。***一次致敏后第21d開始采用超聲霧化器噴霧10μgOVA/只，豚鼠置于一直徑約50cm的有蓋大圓盆中，給藥過程中對(duì)盆內(nèi)通O2。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：使用OVA噴霧激發(fā)后癥狀觀察，豚鼠出現(xiàn)不同程度的呼吸急促、咳嗽、抓癢、甚至抽搐等支氣管***癥狀，表明成功構(gòu)建了豚鼠***模型。常州疾病動(dòng)物模型建模供應(yīng)商開展小鼠疾病模型初步研究分析小鼠疾病模型研究初步結(jié)果與生物學(xué)信息資料等相關(guān)知識(shí)間的差距！

1、動(dòng)物模型名稱：膽管結(jié)扎致肝膽管性肝硬化大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬：SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別：雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡：5周5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重：200~220g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境：SPF級(jí) 1、實(shí)驗(yàn)方法：用膽管結(jié)扎法。大鼠按10mg/kg體重腹腔注射3％戊巴比妥鈉麻醉，腹部皮膚消毒，無菌操作沿腹部正中線剪開腹腔，分離出膽管，在膽管近端和遠(yuǎn)端2處結(jié)扎膽管。手術(shù)后正常飼養(yǎng)28天。28天后解剖取肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：肝臟病理切片鏡下小膽管伴纖維組織增生積分按程度為0-3分：0分：無明顯病變；1分：呈局灶性分布，受累面積在30%以下者；2分：呈多灶性分布，受累面積在30%-70%之間者；3分：呈彌漫性分布，受累面積在70%以上者。統(tǒng)計(jì)分析：每份標(biāo)本在低倍視野(10×10)下依次選取左上、右上、左下、右下、中間5個(gè)視野（共1.5mm2）進(jìn)行觀察，測(cè)定并計(jì)算視野內(nèi)小膽管伴纖維組織增生總面積。

    即為本發(fā)明構(gòu)建的一種pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型。本發(fā)明所采用第二種技術(shù)方案的特點(diǎn)還在于，步驟1中得到grna1和grna2后分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級(jí)結(jié)構(gòu)。步驟3中g(shù)rna1、grna2的濃度均為2～10pmol/ul，cas9蛋白的注射濃度為30～100ng/μl。步驟4中southern雜交采用bamhi和avrii核酸內(nèi)切酶切割f1代雜合子小鼠的dna。本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明提供了pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型及其構(gòu)建方法，本發(fā)明的小鼠動(dòng)物模型對(duì)于pirb基因功能的研究和在體驗(yàn)證提供了良好的基礎(chǔ)。分離自pirb基因敲入小鼠的細(xì)胞還可以用于研究pirb發(fā)揮調(diào)節(jié)作用的下游機(jī)制。通過pirb敲入動(dòng)物模型與不同類型cre小鼠的雜交，可以用于研究ad不同***或不同細(xì)胞類型pirb的調(diào)節(jié)作用。附圖說明圖1為本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠插入pirb基因cds和loxp位點(diǎn)的打靶質(zhì)粒載體的構(gòu)建圖；圖2為本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠模型的構(gòu)建方法的流程圖；圖3為本發(fā)明f1代pirb敲入的小鼠的基因型pcr結(jié)果鑒定電泳圖；圖4為本發(fā)明f1代pirb敲入的小鼠驗(yàn)證pirb基因敲入效果的測(cè)序峰圖；圖5為本發(fā)明f1代pirb基因敲入的小鼠進(jìn)行southern鑒定的方法示意圖；圖6為本發(fā)明f1代pirb基因敲入的小鼠進(jìn)行southern鑒定的結(jié)果圖。疾病動(dòng)物模型建模好做嗎？

1、動(dòng)物模型名稱：腹主動(dòng)脈縮窄致心衰大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬：SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別：雌性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡：成年5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重：180~220g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境：SPF級(jí) 1、實(shí)驗(yàn)方法：采用主動(dòng)脈縮窄法建立模型大鼠麻醉后，仰臥位固定、去腹毛、消毒，沿腹正中線切開皮膚及肌層，分離出腹主動(dòng)脈，在腎動(dòng)脈上方將腹主動(dòng)脈與鈍頭8號(hào)探針一起結(jié)扎后，小心抽出針頭。手術(shù)造模后大鼠正常飼養(yǎng)3個(gè)月。大鼠終末體重(BW),心室重(VW),計(jì)算心體比(VW/BW),并進(jìn)行心功能檢測(cè),包括心率(HR)、左室收縮壓(LVSP)、左室舒張末壓(LVEDP)及左室最大壓力上升及下降速度(±dp/dtmax),并對(duì)心肌組織進(jìn)行病理學(xué)檢測(cè).2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：模型組大鼠VW/BW明顯增加，LVSP明顯降低，LVEDP明顯升高，±dp/dtmax則***減小，與正常對(duì)照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。病理學(xué)檢測(cè)結(jié)果表明心肌出現(xiàn)典型心衰樣病理改變。人類疾病的動(dòng)物模型是指各種醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動(dòng)物。奉賢區(qū)酒精肝疾病動(dòng)物模型建模

小鼠疾病模型應(yīng)用于轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究中的思路與策略該研究從臨床患者中篩選到潛在的致病基因。松江區(qū)非酒肝疾病動(dòng)物模型建模

    設(shè)計(jì)了一套能夠特異性標(biāo)記“穆勒膠質(zhì)細(xì)胞”的系統(tǒng)，再將能誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞形成的基因編輯系統(tǒng)，包裝成“病毒”，注射到小鼠的視網(wǎng)膜。約1個(gè)月后，研究人員在小鼠的視網(wǎng)膜視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層，發(fā)現(xiàn)了由穆勒膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化而來的視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞。這些誘導(dǎo)而來的視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞，不僅可以對(duì)光刺激產(chǎn)生相應(yīng)的電信號(hào)，還可以和大腦中正確的腦區(qū)建立功能性聯(lián)系，將視覺信號(hào)傳輸?shù)酱竽X，成功恢復(fù)視覺功能。進(jìn)一步的研究還表明，通過這一基因編輯技術(shù)，還能將小鼠模型中特定區(qū)域的“星形膠質(zhì)細(xì)胞”非常高效地轉(zhuǎn)分化為多巴胺神經(jīng)元。轉(zhuǎn)分化而來的多巴胺神經(jīng)元，能將帕金森模型小鼠的運(yùn)動(dòng)障礙，逆轉(zhuǎn)到接近正常小鼠的水平。這項(xiàng)研究的負(fù)責(zé)人楊輝指出，盡管將膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元的基因編輯技術(shù)在實(shí)驗(yàn)室里取得重要進(jìn)展，但要將研究成果真正應(yīng)用于人類疾病的***，還有很多工作要做。人類的視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞能否再生？帕金森患者是否能通過該方法被***？研究人員今后將從小鼠模型轉(zhuǎn)到靈長類模型，進(jìn)一步深入研究。松江區(qū)非酒肝疾病動(dòng)物模型建模

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