宿遷C57小鼠疾病動物模型建模

pcrmix：反應條件：pcr擴增產(chǎn)物的電泳鑒定結果如圖3所示，從圖3中可以看出，6、8、9號為pirb基因敲入小鼠在、，wt小鼠pcr產(chǎn)物沒有這兩個擴增產(chǎn)物。(c)短鏈pcr反應，引物如下：primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能夠擴增出344bp的產(chǎn)物，而野生型沒有。pcr體系：反應條件：(2)f1代小鼠測序：通過pcr擴增后測序鑒定小鼠基因型，如圖4所示，為6號pirb基因敲入小鼠測序峰圖，pcr所用引物如下：sequencingprimerforpcrproduct1：5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer(r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’(3)southern雜交檢測f1代小鼠基因型：采用bamhi和avrii核酸內切酶切割dna分子，切割示意圖如圖5。具體的southern雜交檢測過程如下：步驟a、提取f1代小鼠尾部dna；步驟b、制備探針，通過pcr方法將dig-dutp滲入到步驟a的dna分子中。實驗動物向小型化的發(fā)展趨勢更有利于實驗者的日常管理和實驗操作。宿遷C57小鼠疾病動物模型建模

人乳腺*裸鼠模型：1、實驗方法：**細胞移植法、**組織塊移植法。a.**細胞移植：**細胞在二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)至足夠數(shù)量。取對數(shù)生長期的**細胞，用0.25％胰酶消化，用不完全培養(yǎng)液配成濃度不低于1×107個/mL的細胞懸液，于小鼠乳腺脂肪墊注射0.2mL細胞懸液，注意每次注射前需混勻細胞懸液。b.**組織塊移植：**接種于動物長至1cm時，取新鮮的**組織塊，在不完全培養(yǎng)液中漂洗，切取生長良好、魚肉裝的瘤組織，將其剪切成約1.5mm直徑的小**塊。將動物接種部位消毒，剪一小口，將小**塊經(jīng)這一小口接種到小鼠乳腺脂肪墊，如切口較大需要縫合切口。心血管疾病疾病動物模型建模哪家好可以簡化實驗操作和樣品收集。

    SD大鼠腦缺血模型建立一、目的：SD大鼠腦缺血致腦梗死模型的建立二、試劑耗材：水合氯醛、線栓直徑（體重250-300g）三、方法：1、10％水合氯醛（35mg/kg）腹腔注射麻醉。2、仰臥位固定，頸正中線切口，分離肌肉和筋膜，分離左側頸總動脈（CCA）、頸外動脈（ECA）和頸內動脈（ICA）。3、微動脈夾暫時夾閉頸內動脈（ICA），活扣結扎近心端頸總動脈（CCA）、頸外動脈（ECA）打雙結，在雙結中間剪開小口插入線栓。4、將拴線插入到頸內動脈（ICA），用眼科鑷輕推拴線，以頸外動脈（ECA）和頸內動脈（ICA）分叉處為參考位置。5、栓線插入預刻深度，感到有阻力，說明栓線已到達腦中動脈（MCA）,打結固定栓線。6、血管外的栓線不要留得過長，1h后拔出栓線，縫合傷口，單籠飼養(yǎng)觀察。注：前兩三天老鼠會萎靡，不進食，注意不要，老鼠無死亡即可。

因此，應用動物模型，除了能克服在人類研究中經(jīng)常會遇到的理論和社會限制外，還容許采用某些不能應用于人類的方法學途徑，甚至為了研究需要可以損傷動物組織、或處死動物。（二）臨床上平時不易見到的疾病可用動物隨時復制出來臨床上平時很難收集到放射病、毒氣中毒、烈性傳染病等病人，而實驗室可以根據(jù)研究目的要求隨時采用實驗性誘發(fā)的方法在動物身上復制出來。（三）可以克服人類某些疾病潛伏期長，病程長和發(fā)病率低的缺點一般遺傳性、免疫性、代謝性和內分泌等疾病在臨床上發(fā)病率很低，例如急性白血病的發(fā)病率較降，研究人員可以有意識地提高其在動物種群的中發(fā)生頻率，從而推進研究。同樣的途徑已成功地應用于其他疾病的研究，如血友病、周期性中性白細胞減少癥和自身免疫介導性疾病等。明確研究疾病的獨特資源確定小鼠疾病模型的初步選擇。

球囊拉傷致高脂血癥動脈硬化兔模型，實驗動物種屬：新西蘭兔，實驗動物環(huán)境：SPF級1、實驗方法：用球囊拉傷誘導法。采用3%戊巴比妥鈉耳緣靜脈注射麻醉，經(jīng)右股淺動脈，將3.5F球囊擴張導管插至腹主動脈20cm，球囊充液膨脹至2個大氣壓緩慢拉出，反復3次。球囊拉傷手術后，動物喂以高脂飼料，連續(xù)9周，每天給料兩次，自由飲水。實驗結束后取腹主動脈斑塊進行組織病理學檢查。2、檢測標準：腹主動脈斑塊病理鏡下可見腹主***程度的改變。模型應適用于多數(shù)研究者使用，容易復制，實驗中便于操作和采集各種標本。上海品牌疾病動物模型建模

可以克服人類某些疾病潛伏期長，病程長和發(fā)病率低的缺點。宿遷C57小鼠疾病動物模型建模

2mg組、4mg組、6mg組lh水平均上升，同樣，只有2mg組有明顯升高(p＜)，如圖3所示。表3表4②體重變化：(mean±sd)，如圖4所示：2mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比，大鼠體重***下降(p＜，注射第2天開始)。3mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比，大鼠體重***下降(p＜，注射第4天開始)，直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg組(第1、8天注射)與空白組相比，大鼠體重分別在***次及第二次注射后的有***下降(p＜)，4mg組體重在停止給藥后4天與空白組無差異。③卵巢重量：如表5、圖5所示，2mg、6mg組大鼠在經(jīng)過順鉑注射后卵巢重量相比對照組，都有不同程度縮減，其中2mg組卵巢重量明顯減輕(p＜)，4mg、6mg組無明顯差異。表5④動情周期觀察(陰道涂片)：3mg組動物死亡時間早，無完整的動情周期。如表、圖6所示。正常大鼠動情周期4-5天。分為四個階段，動情前期：撇圓形有核上皮細胞占絕大多數(shù)，白細胞和角化上皮細胞很少(圖a)。動情期：角化上皮細胞占多大多數(shù)，由散在增至集白細胞和有核上皮細胞很少(圖b)。動情后期：片狀角化上皮細胞，有核上皮細胞和白細胞3種都有，無太大差異(圖c)。動情間期：白細胞占絕大多數(shù)，有核上皮細胞和角化上皮細胞很少(圖d)。表6⑤病理結果：如圖7所示。宿遷C57小鼠疾病動物模型建模