正規(guī)EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好

來源: 發(fā)布時間:2022-08-15

傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性,抗原修復,抗原抗體過夜孵育,操作步驟復雜繁瑣。并且由于BrdU抗體分子較大,嵌入DNA分子中的BrdU無法直接與BrdU抗體結合,必須先進行DNA變性操作才能使BrdU抗原表位暴露,但變性的程度可能導致錯誤結果。如果變性不充分,會導致BrdU難以暴露,無法檢測,而且變性過程從邊緣向中間滲透,會導致細胞核DNA的變性不均勻,邊緣模糊不清。如果變性過分,則會導致DNA斷裂,甚至降解,導致核染不均一。另外,不同抗體試劑公司的抗體質量不一致,造成難以確保實驗重復性,且容易產(chǎn)生假陽性結果。EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好?上海東寰告訴您!正規(guī)EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好

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EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測,可有效避免樣品損傷,在細胞和組織水平能更準確地反映細胞增殖等現(xiàn)象。EdU染色(a)通過用10:1去離子水稀釋10x反應緩沖液進行配制1xEdU反應緩沖液;(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現(xiàn)用現(xiàn)配;注:緩沖添加劑為白色粉末,較難準確稱量,稱量范圍可稍微放寬,但是不應超過±20%,且該粉末較易氧化,使用后請旋緊管蓋,如試劑出現(xiàn)棕黃色,則需報廢或更換。湖南如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒購買EdU細胞增殖檢測試劑盒的發(fā)展前景如何呢?

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EdU上的乙炔基能與生物素標記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發(fā)生共價反應,形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應非常迅速,被稱作點擊反應(Clickreaction),其反應原理參見圖1。通過點擊反應,新合成的DNA會被相應的生物素探針所標記,從而可以使用適當?shù)臋z測設備檢測到增殖的細胞。EdU檢測法中的點擊反應(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細胞DNA中的EdU,在銅離子的催化發(fā)生共價反應,形成穩(wěn)定的三唑環(huán),終使細胞DNA標記上生物素等探針。

細胞增殖分析是細胞生長和分化研究的關鍵,在藥物開發(fā)階段常用來評估化學藥物的毒性和對細胞生長的控制作用。通常根據(jù)平均DNA含量或細胞代謝參數(shù)進行細胞增殖檢測,此類分析可以報告出總細胞數(shù)目和活細胞數(shù)目,或者測定出單個細胞內(nèi)的DNA合成情況。細胞增殖染料稀釋分析主要基于細胞膜通透性,熒光團分子、染料進入細胞后,將會共價結合到蛋白質上的氨基基團上,從而使染料能夠長時間停留在細胞中。經(jīng)過之后的細胞分裂階段,各個子代細胞會從母細胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細胞儀對熒光強度進行分析,即可測定出自標記結合起,單個細胞或細胞群所經(jīng)歷的傳代數(shù)目。EdU細胞增殖檢測試劑盒的結構如何組成?

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EdU細胞增殖方法簡單,方便,無需DNA變性,能夠與各種抗體或熒光蛋白同時標記,以檢測細胞其他性狀特征。該方法無需DNA變性,無需抗原修復,無需抗原抗體反應,簡單、靈敏、快速、準確,適合各種細胞系的細胞增殖檢測,尤其適用于各種細胞系的高通量篩選實驗,如在藥物篩選中檢測加藥后細胞增殖變化。EdU方法無需DNA變性,完全適用于各種顯微成像技術,在10X,20X,40X都能得到很好的成像效果。EdU細胞增殖檢測方法不需要劇烈的DNA變性操作,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態(tài)、DNA整體結構及細胞內(nèi)抗原識別位點使用EdU細胞增殖檢測試劑盒前的安全檢查。江蘇提供EdU細胞增殖檢測試劑盒購買

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現(xiàn)在有一種新的檢測方法能避免這種情況的發(fā)生——EdU檢測。EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷)也是一種胸腺嘧啶核苷類似物,但其連有的炔羥基團在天然化合物中很少見,在細胞增殖時能夠插入正在復制的DNA分子中,基于EdU與染料的共軛反應可以進行高效快速的細胞增殖檢測分析,可以有效地檢測處于S期的細胞百分數(shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法相比,更簡單,更快速,更準確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內(nèi)更容易擴散,不需要嚴格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測細胞增殖的真實情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度正規(guī)EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好

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