江蘇如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒公司

來源: 發(fā)布時間:2022-05-27

細(xì)胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細(xì)胞固定液,室溫培養(yǎng)30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘,以中和過量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細(xì)胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細(xì)胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測上海東寰向您介紹EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的好處。江蘇如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒公司

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EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因為這樣可能會影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細(xì)胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時,棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留湖北提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒價格上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的應(yīng)用范圍。

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本試劑盒可以檢測到細(xì)胞或組織樣品中單個的增殖細(xì)胞,同時也可以對細(xì)胞或組織樣品總體的細(xì)胞增殖情況進(jìn)行定量檢測。本試劑盒可以檢測培養(yǎng)的細(xì)胞或組織樣品,也可以檢測組織切片,但均需提前進(jìn)行EdU的摻入。細(xì)胞增殖能力的檢測是評估細(xì)胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認(rèn)的精確的檢測細(xì)胞增殖的方法是直接檢測細(xì)胞中DNA的合成。初使用的通過檢測DNA合成來檢測細(xì)胞增殖的方法是放射性標(biāo)記核苷摻入法,如氚標(biāo)記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法

與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法用量小得多,十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測試劑盒相同甚至更好的檢測結(jié)果,而且小分子化學(xué)反應(yīng)檢測方法反應(yīng)快,效率高,反應(yīng)時間需幾分鐘,不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過夜孵育,能夠更好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài),更簡單、更靈敏、更快速、更準(zhǔn)確。EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,分子量很小,在動物體內(nèi)能夠迅速擴(kuò)散到各種組織和中,并滲入正在復(fù)制的DNA分子,通過基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應(yīng)即可簡單、快速、準(zhǔn)確地檢測出細(xì)胞增殖情況。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好?上海東寰告訴您!

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EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性。本試劑盒可以檢測到細(xì)胞或組織樣品中單個的增殖細(xì)胞,同時也可以對細(xì)胞或組織樣品總體的細(xì)胞增殖情況進(jìn)行定量檢測。本試劑盒可以檢測培養(yǎng)的細(xì)胞或組織樣品,也可以檢測組織切片,但均需提前進(jìn)行EdU的摻入。細(xì)胞增殖能力的檢測是評估細(xì)胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒可以去哪里購買?江西哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒評價

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傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性江蘇如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒公司

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