揚州哪一家疾病動物模型建模

來源: 發(fā)布時間:2022-05-07

1、動物模型名稱:二甲基苯蒽(DMBA)致乳腺*大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌性4、實驗動物年齡:6~8周齡5、實驗動物體重:80~100g6、實驗動物環(huán)境:SPF級1、實驗方法:二甲基苯并蒽(DMBA)誘導(dǎo)。大鼠按100mg/kg體重于臀部皮下一次性注射10mg/mL的DMBA溶液1次。正常飼養(yǎng)致24周。2、檢測標準:模型組大鼠第5對乳房直徑在各測定時間點與正常對照組比較有***性差異;大鼠注射致*劑后乳腺上皮組織逐漸發(fā)生有規(guī)律的變化,乳腺導(dǎo)管上皮細胞首先發(fā)生上皮增生、不典型增生,并逐漸加重,在第9周時可見同一大鼠的多個乳腺出現(xiàn)不同程度的導(dǎo)管上皮增生和不典型增生。第13周開始發(fā)現(xiàn)>3mm的乳腺*,至第24周時70%的大鼠發(fā)生乳腺*,并可見一只大鼠同時發(fā)生多個乳腺*,而同一大鼠的其他乳腺亦呈現(xiàn)出不同程度的上皮細胞增生和不典型增生,提示處于*發(fā)生的不同進展階段。找疾病動物模型建模,就找上海東寰。揚州哪一家疾病動物模型建模

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pcrmix:反應(yīng)條件:pcr擴增產(chǎn)物的電泳鑒定結(jié)果如圖3所示,從圖3中可以看出,6、8、9號為pirb基因敲入小鼠在、,wt小鼠pcr產(chǎn)物沒有這兩個擴增產(chǎn)物。(c)短鏈pcr反應(yīng),引物如下:primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能夠擴增出344bp的產(chǎn)物,而野生型沒有。pcr體系:反應(yīng)條件:(2)f1代小鼠測序:通過pcr擴增后測序鑒定小鼠基因型,如圖4所示,為6號pirb基因敲入小鼠測序峰圖,pcr所用引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer(r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’(3)southern雜交檢測f1代小鼠基因型:采用bamhi和avrii核酸內(nèi)切酶切割dna分子,切割示意圖如圖5。具體的southern雜交檢測過程如下:步驟a、提取f1代小鼠尾部dna;步驟b、制備探針,通過pcr方法將dig-dutp滲入到步驟a的dna分子中。皮膚疾病動物模型建模公司動物模型作為人類疾病的縮影。

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是從側(cè)面展示的壓迫元件插入椎間孔的結(jié)構(gòu)示意圖。圖3是術(shù)后大鼠四肢表現(xiàn)情況。圖4是術(shù)后28天大鼠的雙下肢縮足閾值變化曲線圖。圖5是重復(fù)經(jīng)顱磁刺激對大鼠背根神經(jīng)壓迫模型的影響。具體實施方式以下通過具體的實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案做進一步的描述。以下的實施例是對本發(fā)明的進一步說明,而不是限制本發(fā)明的范圍。實施例1、模型的制備1、腹腔注射1%戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠(220-250g),背部剃毛,碘伏消毒背部皮膚,俯臥位固定于動物手術(shù)臺上,鋪無菌巾。2、于大鼠腰4到骶1水平左側(cè)作一2-3cm縱行切口,切開皮膚,鈍性分離椎旁肌至橫突上方,暴露腰4椎間孔,腰5椎間孔(椎旁肌可用自制拉鉤保持分離狀態(tài))。3、將2根***端11為4mm,第二端12為2mm,直徑為,第二端12置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。如圖1和2所示,可以看到腰4錐體1、腰5錐體2、腰6錐體3、l型棒10、腰4神經(jīng)根4和腰5神經(jīng)根5的位置關(guān)系。當l型棒10的***端11插入腰4錐體1的腰4椎間孔后,會對腰4神經(jīng)根4起到壓迫作用;同樣的,當l型棒10的***端11插入腰5錐體2的腰5椎間孔后,會對腰5神經(jīng)根5起到壓迫作用。從而達到模擬腰椎間盤突出壓迫神經(jīng)根的目的,制備得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型~

本能發(fā)明的另一目的是公開了如上所述的方法制備的鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型的用途是將該模型用于腰椎間盤突出***方法研究和/或影像學(xué)檢測研究。進一步地,該模型用于與磁性相關(guān)的***和/或檢測方面的研究,比如經(jīng)顱磁刺激和核磁共振。本發(fā)明利用壓迫元件插入腰椎椎間孔,模擬腰椎間盤突出后突出物對神經(jīng)根的持續(xù)慢性的機械壓迫癥狀,有益效果有:1.應(yīng)用機械壓迫神經(jīng)根模擬腰椎間盤突出病理,癥狀的病因?qū)W與臨床情況接近;2.相關(guān)的疼痛行為類似于特定的慢性疼痛癥狀,且易于客觀測量;3.制備方法簡單,對動物損傷小,穩(wěn)定性好,成功率高;4.造模關(guān)鍵材料壓迫元件不受磁場干擾,無在磁場作用下移位風險,有利于后續(xù)對動物進行磁療,經(jīng)顱磁刺激等***及核磁共振等檢查;5.造模關(guān)鍵材料壓迫元件不影響磁場,不會對***儀器和核磁共振等儀器產(chǎn)生不良影響;6.此方法獲得的模型由于采用了h62黃銅或聚乳酸材料制備的壓迫元件,使得研究方法與檢測方法不受磁場作用限制,豐富了腰椎間盤突出臨床前研究的***方法及影像學(xué)檢測,為臨床研究提供理論依據(jù)。以下將結(jié)合附圖對本發(fā)明作進一步說明,以充分說明本發(fā)明的目的、技術(shù)特征和技術(shù)效果。附圖說明圖1是壓迫元件插入椎間孔的結(jié)構(gòu)示意圖。疾病動物模型建模好做嗎?

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其可與dna鏈交叉連接,顯示出細胞毒作用。溶解后在體內(nèi)無需載體轉(zhuǎn)運,即可通過帶電的細胞膜。由于細胞內(nèi)氯離子濃度低(4mmol/l),氯離子為水所取代,電荷呈陽性,具有類似烷化劑雙功能基團的作用,可與細胞核內(nèi)dna的堿基結(jié)合,形成三種形式的交聯(lián),造成dna損傷,破壞dna復(fù)制和轉(zhuǎn)錄,高濃度時也抑制rna及蛋白質(zhì)的合成。順鉑具有抗*譜廣、乏氧細胞有效、作用性強等優(yōu)點,已普遍用于***睪丸*、卵巢*、子宮*、膀胱*、頸部*、前列腺*、腦*等,療效***。但順鉑用于****有一定的毒性,會引起副作用,與卵巢的損害有直接關(guān)系,有研究表明順鉑可誘導(dǎo)卵巢細胞凋亡。收集研究疾病的生物學(xué)信息資料。靜安區(qū)皮膚疾病動物模型建模

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即為本發(fā)明構(gòu)建的一種pirb基因敲入的小鼠動物模型。本發(fā)明所采用第二種技術(shù)方案的特點還在于,步驟1中得到grna1和grna2后分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結(jié)構(gòu)。步驟3中g(shù)rna1、grna2的濃度均為2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射濃度為30~100ng/μl。步驟4中southern雜交采用bamhi和avrii核酸內(nèi)切酶切割f1代雜合子小鼠的dna。本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明提供了pirb基因敲入的小鼠動物模型及其構(gòu)建方法,本發(fā)明的小鼠動物模型對于pirb基因功能的研究和在體驗證提供了良好的基礎(chǔ)。分離自pirb基因敲入小鼠的細胞還可以用于研究pirb發(fā)揮調(diào)節(jié)作用的下游機制。通過pirb敲入動物模型與不同類型cre小鼠的雜交,可以用于研究ad不同***或不同細胞類型pirb的調(diào)節(jié)作用。附圖說明圖1為本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠插入pirb基因cds和loxp位點的打靶質(zhì)粒載體的構(gòu)建圖;圖2為本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠模型的構(gòu)建方法的流程圖;圖3為本發(fā)明f1代pirb敲入的小鼠的基因型pcr結(jié)果鑒定電泳圖;圖4為本發(fā)明f1代pirb敲入的小鼠驗證pirb基因敲入效果的測序峰圖;圖5為本發(fā)明f1代pirb基因敲入的小鼠進行southern鑒定的方法示意圖;圖6為本發(fā)明f1代pirb基因敲入的小鼠進行southern鑒定的結(jié)果圖。揚州哪一家疾病動物模型建模

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